Orientación para la identificación bacteriana y el procesamiento de muestras clínicas

CRITERIOS de CLASIFICACIÓN
• La identificación de bacterias puede basarse en
muchos caracteres:
• Morfología celular
• Presencia o ausencia de estructuras especiales:
flagelos, endosporas.
• Reacción frente a colorantes (Tinción)
• Fisiología: Condiciones necesaria para su
desarrollo / crecimiento (T°; Atm: O2, CO2, etc.)
• Bioquímica: metabolismo (fermentación de
carbohidratos; fuente de carbono, etc.)
• Morfología de las colonias

Morfología
Reacción de Gram
Metabolismo
Requerimiento de O2
Aerobias /anaerobias
facultativas
GRAM (+)
Cocos
Catalasa (+)
Staphylococcus
spp
Catalasa (-)
Enterococcus
spp
Bacilos
GRAM (-)
Cocos Bacilos
Fermentadores
de Glucosa
Enterobacteriaceae
No
fermentadores de
Glucosa
Anaerobias
Esporuladas/No
esporuladas

Cocos Gram (+) más frecuentes en
infecciones humanas
GENERO ESPECIE
Catalasa (+) S. aureus
Staphylococcus S. epidermidis
S. saprophyticus
Otras especies
Micrococcus spp y otros gérmenes relacionados
Rothia (Stomatococcus) mucilaginosa

Cocos Gram (+) más frecuentes en
infecciones humanas
GENERO ESPECIE
Catalasa (-) S. pyogenes
S. agalactiae
Estreptococos Grupo C-G
Streptococcus S. pneumoniae
E. Grupo viridans
Grupo S. bovis
S. Salivarius y S. uberis
Enterococcus E. faecalis
E. faecium
E. raffinosus
-74-

Catalasa (+)
• Micrococcus
• Kocuria*
• Nesterenkonia*
• Kytococcus*
• Dermatococcus*
• Arthrobacter*(>BGP)
• Alloiococcus (Cat.débil)
• Rothia mucilaginosa (Cat.∆)
Catalasa (-)
• Lactococcus
• Vagococcus
• Dolosicoccus
• Abiotrophia**
• Grabulicatella**
• Globicatella
• Leuconstoc
• Gemella
• Pediococcus
• etc
*Relacionados con Micrococcus
Cocos Gram (+): Otros géneros
** EVN

CPCatalasa +: Algoritmo
Bacitracina 0.04 UI
Resistente
Staphylococcus
Macrococcus*
Sensible
ClNa 6,5%
Rothia mucilaginosa
(Se adhiere al agar)
Micrococcus spp y
géneros relacionados
*Aún no se aislaron en humanos // R: ausencia de halo de inhibición

Género Staphylococcus
Producción de
Coaguasa
Sensibilidad a
Novobiocina
Uso del medio
Chapman

Diferenciación presuntiva del Gro. Staphylococcus
Staphylococcusspp
COAGULASA
(+)
S. aureus
(-)
NOVOBIOCINA (5µg)
R
S. saprophyticus
S (>16mm)
ECN

Diferenciación presuntiva del Gro. Staphylococcus
+ Frecuentes S. aureus
S. epidermidis
S. Saprophyticus
S. haemolyticus
S. hominis
S. lugdunensis
S. warneri
S. capitis
- Frecuentes S. simulans
S. auricularis
S. xylosus
S. schleiferi
S. cohnii
S. saccharolyticus
otros
Otras Pruebas Bioquímicas
Fosfatasa OH-
Ornitina Decarboxilasa
Hidrólisis de Urea
Producción de Acetoína
PYR
Acido de:
*D-Trehalosa
*D-Manitol
*D-Manosa

CPCatalasa -: …Algoritmo
• Frecuencia de los Géneros
Géneros más frecuentes Streptococcus
Enterococcus
Géneros menos frecuentes Lactococcus
Aerococcus
Gemella
Pediococcus
Leuconostoc
EVNutricionales

CPCatalasa -: Algoritmo
Hemólisis (A sangre
carnero)
ß
Tabla A
No-ß (α – γ)
Morfología en
m. líquidos
Cadenas
Vancomicina (30 µg)
R
(Tabla B)
S
(Tabla C)
Grupos
Vancomicina (30 µg)
R
Pediococcus
S
Otros géneros
Si es α
Optoquina «S»
S. pneumoniae
*Aún no se aislaron en humanos // R: ausencia de halo de inhibición

Tabla A: Estreptococos ß-H
Especie/Grupo
Reacción Bioquímica
BE ClNa Ba Hip PYR Grupo CAMP VP
S. pyogenes - - + - + A - -
S. agalactiae - V -* + - B + -
S. Grupo C - - -* - - C - -
S. Grupo G - - -* - - G - -
Enterococcus faecalis + + - V + D - -
Grupo S. anginosus V - -* - - ** - +
* Puede haber excepciones ; ** A,C,G,F, o no agrupable
-80-

Tabla C: no-ßH-Vanco-S
Especie/Grupo REACCIÓN BIOQUÍMICA
OPT SB BE ClNa Hip PYR HEM Grupo
serológico
S. pneumoniae + + - - - -/+ α ------------
Grupo «S. bovis»1 - - + - - - γ/α D
S. agalactiae - - - V + - γ/α B
Grupo «S. viridans»2 - - -* - - - γ/α diversos
Enterococcus spp - - + + V + γ/α D
1-2 : Diferenciación: Tabla D
EGV: Grupos: S. anginosus
S. mitis
S. sanguinis
S. mutans
S. salivarius

Tabla D
Diferenciación entre los Grupos S. bovis y G. viridans
PYR (-); BE (+); ClNa (-); ADH (-); VP (+)
Manitol
(+) /Sorbitol
(+) / S. mutans (-) /S. bovis I
(Almidón +)
(-) / Polisacárido extracelular
(+) / S. slivarius
(Ureasa V)
(-) /S bovis II

Tabla B
CGP/ en cadenas / Catalasa (-) / Vanco-R
PYR
(+)
Enterococcus spp
(-)
Cadenas
Leuconostoc spp
Bacilos
Probable
Lactobacillus spp

Género Enterococcus
BE (+); ClNa (+); PYR (+); LAP (+)
Especie REACCIÓN BIOQUÍMICA
Hemólisis Pir Arg Man Sorbi Sor Ara Raf
E. faecalis γ(ß/α) + + + + - - -
E. faecium γ/α - + + - - + -
E. raffinosus γ/α + - + + + + +

Identificación de Estreptococos del Grupo Viridans

Enterobacterias
Diferenciación entre Escherichia coli y Citrobacter feundii
Bacteria Levine TSI Citrato LDC Indol
E. Coli Colonias con
brillo metálico
Ácido/gas - V +
C. freundii Ác./fondo negro/gas + - -
Diferenciación entre Escherichia coli lactosa (+) lenta y Morganella morganii
Bacteria Levine TSI IMViC LDC U F. Alc. ONPG
E. coli Sin cambio Alcalino
ácido/gas
++-- V - - +
M. morganii ++-- - + + -

Enterobacterias
Diferenciación entre las distintas especies de los géneros Klebsiella, Enterobacter y Serratia
Bacteria TSI IMViC LDC ODC Motil. DNasa Polimixina
K. pneumoniae
Ac/gas
--++ + - - - S
E. cloacae --++ - + + - S
E. aerógenes --++ + + + - S
S. marcescens Ac/Ac.
con o sin gas
--++ + + + + R

Enterobacterias
Diferenciación bioquímica entre P. mirabilis, P. vulgris y P. penneri
Bacteria Invasión
en Agar
Levine TSI IMViC LDC ODC
P. mirabilis
+/- S/C
OH fondo negro - + - V
Desaminada
+
P. vulgris H fondo negro + + - V -
P. penneri Ac/con o sin gas - + - - -
P. mirabilis, P. vulgris y P. penneri: Ureasa + / Fenil Alanina + / Polimixina R

Bacteria Invasion
en Agar
Levine TSI IMViC LDC U F. A. ODC
M. morganii No S/C OH/H
gas
++-- - + + +
Providencia
spp
No S/C OH/H
Sin gas
++-+ Desaminada V + -
Diferenciación entre Morganella morganii y Providencia spp.
Enterobacterias
F.A.= Fenil Alanina

Bacteria Levine TSI IMViC U
Adonitol
Manitol
Inositol
Arabitol
Trehalosa
P. rettgeri S/C OH/H
Sin gas
++-+ + + + + + -
P. stuartii U+ S/C OH/H
Sin gas
++-+ + - - + - +
P. suartii U- S/C OH/H
Sin gas
++-+ - - - + - +
P. alcalifaciens S/C OH/H
Sin gas
++-+ - + - - - -
Diferenciación entre las especies del género Providencia (LDC: desaminada; FA: +)
Enterobacterias
Las especies del género No invaden al agar

Bacteria Levine TSI LDC IMViC U
Salmonella entérica
serovar Typhi *
S/C OH/H
Anillo negro
Sin gas
+ -+-- -
*(no Typhi)
S/C OH/fondo
negro/ gas
+ -+-+ -
Shigella spp** S/C OH/H
Sin gas
- V+-- -
Diferenciación entre Salmonella entérica serovar Typhi ,
Salmonella entérica (no Typhi) y Shigella spp
Enterobacterias
Las especies del género No invaden al agar
*Se confirma empleando antisueros correspondientes. S. Typhi presenta el Ag Vi,
**Requiere confirmación serológica

Bacteria Levine TSI IMViC LDC ODC U Acetato
E. Coli
(inactivo) Sin cambio Alcalino
ácido/sin
gas
++-- V V - V
Shigella spp V+-- - -* - -
Diferenciación entre Escherichia coli lactosa (+) lenta y Shigella spp
Enterobacterias
*S. sonnei es ODC +

Bacteria TSI LDC U IMViC
Proteus spp* OH/H
Fondo negro
con gas
Desaminada + V+-V
(no Typhi)
OH/fondo negro
con gas
+ /SH2+
- -+-+
Citrobacter freundii OH/fondo negro
con gas
- /SH2+
V
-+-+
Edwardsiella tarda* OH/fondo negro
con o sin gas
+ /SH2+ - ++--
Diferenciación bioquímica de los géneros de Enterobacteriaceae fuerte productoras de SH2
Enterobacterias
* E. tarda y Proteus spp son R a Polomixinas / Colistín

Enterobacterias
Diferenciación bioquímica entre las familias Vibrionaceae, Aeromonadaceae y
Enterobacteriaceae
FAMILIA Pruebas Bioquímicas
Fermentación de la
Glucosa (TSI)
Oxidasa
Vibrionaceae, Aeromonadaceae + +
Enterobacteriaceae + -

BGN-Fermentadores Oxidasa (+)
GÉNEROS Especies más frecuentes
A. hydrophila
Aeromonas (Aeromonadaceae ) A. sobria
A. caviae
V. cholerae Serogrupo O1
No O1
V. parahemolyticus
Vibrio (Vibrionaceae) V. fluvialis
V. vulnificus
V. algynoliticus
Plesiomonas (Enterobacteriaceae) P. shigelloides

Diferenciación bioquímica entre los géneros de la familia Vibrionaceae,
Aeromonadaceae y del género Plesimonas .
Género Hemólisis ClNa 6,5% ODC S a O129 DNAsa
Aeromonas ß - -* - +
Vibrio
ß, α, γ
V V + / - +
Plesiomonas
γ
- + + -
* Excepto Aeromonas veronii biotipo veronii

BGN-NO Fermentadores de Glucosa
Géneros más
frecuentes
Pseudomonas, Acinetobacter, Stenotrophomonas
Burkholderia, Achromobacter, Crhyseobacterium
TSI
Sin Cambio (Pico OH-/fondo neutro)
Oxidasa
-
Acinetobacter
Stenotrophomonas
Burkholderia
+
Pseudomonas,
Crhyseobacterium
Burkholderia, Achromobacter

Pseudomonas del grupo
fluorescentes
Especie P. fenacínico1 P. fluorescente ADH Glu (Ox.) Gelatinasa 42°C
P. aeruginosa +* + + + + / - +
P. putida - + + + - -
P. fluorescens - + + + + -
1: Piocianina (verde); Piorrubina (rojo); Piomelanina (marrón)
*Algunas cepas no producen pigmentos fenacínicos = P. aeruginosa apiociánicas

Microorganismo
42°C Gela-
tina
ADH LCD U Glu Lac Manit Xil
Complejo BC V V + V V + V + V
P. aeruginosa + V + - V + - V +
P. flurescens - + + - V + V V +
P. putida - - + - V + V V +
P. stutzeri V - - - V + - + +
R. picketti V V - - + + V - +
Brevundimonas spp V V - - - V - - V
Bacilos GNNF Oxidasa (+) / MacConkey (+)
Lac=Lactosa, Manit=Manitol, Xil=Xilosa

Diferenciación BQM de BGNNF
Ox. (-) más frecuentes
Especie
Morfología
Oxidasa
Motilidad
LDC
Esculina
DNAsa
Manitol
ONPG
S. maltophilia bacilo -/+ + + + + - V
Acinetobacter spp coco - - - - - ND ND
Complejo B. cepacia bacilo +/- + + +/- - + +
ND: no determinado
ONPG: ortofenil ß galactopiranósido
+/-: mayoría de las cepas con reacción (+)
-/+: mayoría de las cepas con reacción (-)

Microorganismo
Movilidad LCD U Glu Maltosa Hidrólisis
de la
Esculina
Complejo BC + V V + + V
S. maltophilia + + - + + V
Acinetobacter spp
sacarolítico
- - V + - V
Acinetobacter spp
asacarolítico
- - V - V -
Burkholderia gladioli + - V + - -
P. oryzihabitans + - V + + -
P. luteola + - V + + +
Bacilos GNNF Oxidasa (-) / MacConkey (+)

Género Stenotrophomonas
Especie de importancia clínica: S. maltophilia
Características culturales y bioquímicas
 Hemólisis: ß en zonas de desarrollo confluente
 Olor amoniacal
 Oxidasa (-) / algunas cepas pueden ser (+)
 Hidrólisis de la Esculina (+)
 Hidrólisis de DNA (+)
 LDC (+)
 Oxidación (+) de Maltosa y Manitol

Género Neisseria y relacionados
Microorganismo
Morfología
(Gram)
Oxidasa
Catalasa
Superoxol
TM AN
Pigmento
TSI
DNasa
GMLSF
(CTA)
N. gonorrhoeae Dc- + + +↑↑ + - - SD ND + - - - -
N. meningitidis Dc- + + +↓/- + V - SC/SD ND + + - - -
Neisseria spp Dc-* + + - -** + V H/OH - VVVVV1
Moraxella
catarrhalis
Dc- + + - - + - SC + - - - - -
Acinetobacter
spp
Dc-/b- - + - ND + - SC - VVVVV
Kingella spp B- + - - V + - H/SD - + V - - -
*Sólo N. enlongata tiene forma bacilar
**Algunas especies pueden desarrollar
1N. lactamica utiliza L-S-F

Diferenciación de las especies del género
Haemophilus
Especie Requerimiento de factores Hemólisis
X (protoprfirina) V (NAD o NADP)
Haemophilus influenzae1 + + -
Haemophilus parainfluenzae2 - + -
Haemophilus haemolyticus + + +
Haemophilus parahaemolyticus - + +
Haemophilus aegyptius + + -
Haemophilus ducreyi + - + débil
Aggregatibacter aphrophilus - V -
Aggregatibacter segnis - + -
1-2 Especies más frecuentes en patología humana
-187-

BGP aerobios más frecuentes en
muestras clínicas
Especie* Catalasa Hemólisis Pig. rosado Kinyoun Motilidad
Corynebacterium spp y
especies relacionadas
+/- γ, ß - - V1
Listeria + ß - - +
Erysipelothrix - α - - -
Lactobacillus - α, γ - - -
Nocardia2 + γ - + -
Rodhococcus + γ + + -
Mycobacterium spp 3,4 + γ - + -
*No producen esporas/ Bacillus spp: formas esporas internas
1:Las especies móviles, en general tienen pig. Amarillo-2: BGP ramificados
3,4: M. complejo fortuitum-chelonae (cto. Rápido), BGP no ramificado

BGPositivos: diferenciación:
Listeria, Enterococcus y S. agalactiae
Especie Catalasa Hemólisis
ClNa
6,5%
BE Movilidad CAMP PYR
Listeria
monocytogenes
+ ß + + + + -
Enterococcus faecalis - ß + + - - +
S. agalactiae -
ß V - - + -

Algoritmo de Trabajo
Muestra
Observación
Macroscópica:
Consistencia, moco,
pus, sangre
Microscópica
Fresco
/coloraciones
Siembra
M. sólidos:
EMB - SS
AS –MKS* -(TCBS*)
M. enriquecidos
Caldo selenito
Agua P. alcalina

EMB: búsqueda de EPEC-Salmomella spp y Shigella spp
EMB
Colonias Fermentadoras de
LACTOSA: Brillo metálico
4 colonias al azar
TSI – CITRATO► 1
Colonias No fermentadoras de
LACTOSA: Transparentes
4 colonias al azar
TSI – CITRATO-LIA-
UREA-SIM ► 2

ESQUEMA ► 1
Bacteria Levine TSI Citrato LDC Indol
E. Coli Colonias con
brillo metálico
H+/gas - V +
C. freundii H+/fondo negro/gas + - -
E. coli: Realizar serología de ECEP en pacientes menores de 2 años,
gerontes e inmunosuprimidos.

ESQUEMA ► 2
Bacteria Levine TSI Citrato LDC SIM Urea
E. coli
CT
OH-/ H+/gas - V - + + -
Shigella spp OH-/ H+/gas (-) - - - - - -
Salmonella spp OH-/ H+/SH2/gas
+ + / SH2 + - + -
Edwarsiella tarda OH-/ H+/SH2/gas
- + + + V -
Proteus spp OH-/ SH2/gas +/- DesNH2 + V + +

Agar SS: Salmonella spp – Shigella spp
Agar SS (24-48h)
Colonias Centro negro/SH2 (+)
LIA
+ /SH2 (+) ► 4
Colonias Transparentes /SH2 (-)
TSI – CITRATO-LIA-
UREA-SIM
Búsqueda de Salmonella
spp. S. Parathyphi A y
Shigella spp ► 3

ESQUEMA ►3
Bacteria SS TSI LDC IMViC U
Salmonella entérica serovar
Typhi *
CT OH/H
Anillo negro
Sin gas
+
- + - -
-
Salmonella entérica *(no
Typhi)
CT OH/fondo
negro/ gas
+ - + - + -
Salmonella paratyphi A CT
OH/H/ gas
-/anillo
negro
- + - + -
Shigella spp** CT OH/H
Sin gas -
V + - -
-
*Se confirma empleando antisueros correspondientes. S. Typhi presenta el Ag Vi,
**Requiere confirmación serológica

Bacteria TSI LDC U IMViC
Proteus spp* OH/H
Fondo negro
con gas
Desaminada + V+-V
(no Typhi)
OH/fondo negro
con gas
+ /SH2+
- -+-+
Citrobacter freundii OH/fondo negro
con gas
- /SH2+
V
-+-+
Edwardsiella tarda* OH/fondo negro
con o sin gas
+ /SH2+ - ++--
Diferenciación bioquímica de los géneros de Enterobacteriaceae fuerte productoras de SH2
ESQUEMA ►4
*E. tarda y Proteus spp son R a Polomixinas / Colistín

3- F-AISLAMIENTO DE E. coli PRODUCTOR DE VEROCITOTOXINA
Asociado a Diarrea Hemorrágica y Síndrome Urémico Hemolítico
Suspensión de M. Fecal
AGAR EMB LEVINE AGAR MACCONKEY-SORBITOL
INCUBAR 24 HS 37ºC
10 colonias Ferment. de Lactosa 10 colonias No Ferm. De Sorbitol
TSI, CITRATO SEROLOGIA O157
SEROLOGIA POSITIVA
E. coli O26, O111
Confirmación Bioquímica
De E. coli y Sorbitol en tubo(-)
Y Beta Glucuronidasa (-)
INFORME PRESUNTIVO DE
E. coli O157
ENVIAR A LABORATORIO DE REFERENCIA PARA CONFIRMAR
PRODUCCIÓN DE VEROCITOTOXINA EN CULTIVO DE TEJIDO

Búsqueda de E. coli enterohemorrágica (ECEH)
Agar Mc Conkey con Sorbitol
10 colonias NO fermentadoras de Sorbitol
Confirmación BQM de E. coli
ß- glucuronidasa (-) // Serología O157 (+)
E. Coli O157 ► Posible productor de shiga toxina
Detección de Toxina (LNR) O157 Toxigénico
o no Toxigénico.
-155-

Búsqueda de Vibrio cholerae
AGUA PEPTONADA ALCALINA
INCUBAR 6-8 HS A 37 ºC
REPIQUE A AGAR TCBS
INCUBAR 18-24 HS A 37ºC
COLONIAS AMARILLAS (Ferm. de Lactosa)
TSI AS
INCUBAR 18-24 HS INCUBAR 18-24 HS
ALC/AC SIN GAS REAC. DE OXIDASA
AC/AC SIN GAS POSITIVA
SEROLOGIA PARA V. chloreae O1
POSITIVA
PRESUNTO AISLA MIENTO DE Vibrio cholerae O1
ENVIAR A CENTRO DE REFERENCIA PARA SU CONFIRMACION
Oxidasa (-)
No Vc

Búsqueda de Vibrio cholerae: BQM
Características BQM Resultado
Hemólisis ß o γ
TSI H+ / H+ / sin gas
Citrato de Simmons +
LDC +
ODC +
Motilidad +
Indol +
Voges-Proskauer V
ClNa 0% +
S a O129 (150 µg) + (Halo de inhibición)

Diferenciación de Vc
Diferenciación serológica
Especie Aglutinación Con antisuero O1 Clínica
Vibrio cholerae O1 + Causa el «cólera»
Vibrio cholerae NO O1 - No causa epidemias
Diferenciación BQM de Vibrio cholerae O1 en sus biotipos
Prueba BQM V. cholerae O1 Biotipo clásico V cholerae O1 Biotipo El Tor
Hemólisis γ ß o γ
VP - +
Sensibilidad a
Polimixina (50 µg)
S R

Búsqueda de Aeromonas spp
Medio de siembra: Agar Sangre(AS) o AS con Ampicilina 30 Ug/ ml.
AS
Colonias Beta hemolíticas
(o eventualmente No hemolíticas)
Reacción de oxidasa
(3 ó más colonias al azar)
POSITIVA
NEGATIVA: No Aeromonas spp
TSI
Fermentador No Fermentador
(Alc./Ac. ó Ac./Ac.) (sin cambio)
Presunt. Aeromonas spp Evaluar según Huésped
(Ver Tablas de Identificación)

DIFERENCIACIÓN DE LOS GENEROS DE LA FAMILIA VIBRIONACEAE
VIBRIO AEROMONAS PLESIOMONAS
Hemólisis ,, , 
Dnasa + + -
ODC D -* +
ClNa 6% D - -
Sensibilidad al
O129(150g)
+ - +
* Aeromonas veronii biogrupo veronii es ODC +
DIFERENCIACIÓN DEL GENERO VIBRIO DE AEROMONAS
VIBRIO
HALOFILICOS
VIBRIO NO
HALOFILICOS
AEROMONAS
ODC D + -*
ClNa 6% + D -
ClNa 0% - + +
Sensibilidad al
O129(150g)
+ + -
* Aeromonas veronii biogrupo veronii es ODC +

Esculina Gas de
Glucosa
ODC LDC VP Manitol Sacarosa Indol
Grupo hydrophila* + + - + + + + +
Grupo
caviae*
+ - - - - + + +
A. veronii
bg. sobria
- + - + + + + +
A. veronii bg.
veronii
+ + + + + + + +
A. schubertii - - - + D - + -
A. handaei - + - + + + - +
A. trota - + - + - D D +
* Son Resistentes a Cefalotina
Diferenciación BQM de las especies de
Aeromonas spp más frecuentes

Algoritmo de Fauces: A.S.carnero
Colonias ß-Hemolíticas
BCITRACINA - PYR
1:S/ (+) – 2:R / (+) – 3:R / (-)
3-Otros Estreptococos ß H
VP
(+): Flora habitual
(-): Serología C G
1 -2: Streptococcus
pyogenes

Esputo: Criterio de aceptación
Células Epiteliales
Planas
PMN Criterio
< 10 > 25 Aceptable
10 - 25 > 25 Aceptable
> 25 > 25 No aceptable
> 25 10 - 25 No aceptable
> 25 < 10 No aceptable

Esputo: Procesamiento
Esputo
Ex. macroscópico
Aspecto:
salivoso,
mucopurulento,
hemoptoico
Ex. microscópico
Celulas en fresco
Gram / ZN
(Kinyoun-Giemsa-
Grocott)
Cultivo
AS / Ach
Medio para
BGN

Aspirado traqueal: Procesamiento
Aspirado traqueal
Ex. macroscópico
Aspecto:
salivoso,
mucopurulento,
hemoptoico
Ex. microscópico
Celulas en fresco
Gram / ZN
(Kinyoun-Giemsa-
Grocott)
Cultivo (*)
AS / Ach
Medio para
BGN
(*) Diluciones

Aspirado traqueal: Procesamiento
0,5 ml Secreciones + 0,5 ml Sol. Fisiol. = 1 (1/2)
0,1 ml de 1 + 0,9 ml Sol. Fisiol. = 2 (1/20)
Sembrar 0,1 ml de 3 y 4

Lavado Bronco Alveolar
BAL
< 1% CEE / Macrófagos alveolares
Homogeneizar en Vortex 1 - 2’
Mx. sin centrifugar
Siembra: 0,5 ml + 4,5 SF (1/10)=1
0,5 ml de 1 + 4,5 ml SF (1/100)= 2
Centrifugar 10 ml ►Sedimento
Fresco
Coloraciones
Sembrar 0,1 ml de 1 y 2

Cepillo Protegido
Cepillo Protegido
Homogeneizar en Vortex 1 ’ en 1 ml de BHI
Mx. sin
centrifugar
Sembrar 0,1 ml
AS + Ach + Medio para BGN+ ANA
Centrifugar ►Sedimento
Coloraciones
(↓S)

Utilidad de las Muestras
Mx E At BAL Cepillo Bx. Pulmón
Contaminación
orofaríngea
+++ ++ + NO NO
Mx
representativa
< 10 CEP // >25 PMN < 1% CEP Siempre
FBCopio NO NO SI SI NO
G. comunes SI SI SI SI SI
Hongos SI SI SI NO (esc.) SI
Micobacterias SI SI SI NO (esc.) SI
ANAE NO NO NO SI SI
Rto. Sign 3° - 4° Estría ≥ 106 ufc/ml ≥ 104 ufc/ml ≥ 103 ufc/ml ≥ 104 ufc/gr.
S ↓ ↑ ↑ (86%) +/- (75%) +/-
E ↓ ↓
↑ (82%) ↑↑ (100%) ↑↑

Micobacterias patógenas oportunistas y saprófitas
Velocidad de
Crecimiento
Pigmentación Pat. oportunistas No o rara vez
patógenos
Lento
> 7 días
Fotocromógenas M. kansasii
M. marinum
M. simiae
M. asiaticum
Escotodromógenas M. scrofulaceum
M. szulgai
M. xenopi
M. gordonae
M. flavescens
No cromógenas M avium
M intracellulare
M ulcerans
M malmoense
M haemophilum
M gastri
M terrae
M triviale
Rápido
< 7 días
No cromógenas M fortuitum
M abscessus
M chelonae
M smegmatis
Cromógenas M vaccae
M phlei

Estudio del exudado vaginal (FSP)
FV
pH
(FSMedio)
SF
Obs. En Fresco
Levaduras
Trichomonas
vaginalis
Test con KOH
Medio de
Transporte
Siembra en A-Sangre*
Saburaud (Levaduras)
Coloraciones
GRAM/Giemsa
-129-

Estudio de Endocervix
Endocervix
M. de Transporte
Siembra en A-Sangre*
Thayer Martin
Oxidasa
(+)/dc(-)
Coloraciones / GRAM
Dc (-)
-129-
TSI / H2O2 30% / AS sin CO2
ND / + ↑↑ / ND
Probable Neisseria gonorrhoeae Azúcares

Investigación de EBH
Hisopado introito vaginal + hisopado perineal
Caldo Todd-Hewitt (Ac. Nal 15 µg/ml + Colistin (10 µg/ml)
Medio de cultivo sólido «Adecuado»
Colonias «sospechosas»
Pruebas confirmatorias

Diferenciación:
Listeria, Enterococcus y S. agalactiae
Especie Catalasa Hemólisis BE CAMP PYR
Listeria
monocytogenes
+ ß + + -
Enterococcus faecalis - ß + - +
S. agalactiae* -
ß - + -
Partimos del Agar Sangre Ovina
Partimos de Agar Cromogénico
*Eventual confirmación serológica

Vaginosis Bacteriana: Criterios
1-Amsel y col.: 3 ó más de los siguientes criterios
*Presencia de flujo vaginal abundante, fino y homogéneo
*pH > 4,5
*Pruebas de aminas (+)
*Presencia de células guía («Clue cells»)
2-Nugent:
Morfotipos en la
coloración de GRAM
SCORE
0 1 2 3 4
Lactobacillus spp > 30 5 - 30 1 - 4 < 1 0
GV y Bacteroides spp 0 < 1 1 - 4 5 - 30 > 30
BGN «curvos» 0 1 - 4 5 > 30 - -
VB=puntaje total ≥ 7;
4 – 6: corresponde a un estado intermedio de desbalance;
Muestra normal: puntaje total de 0 a 3. 97% S-100% E

Infecciones Vs. Dx. Diferecial
Criterio Dx Normal VB Vaginitis x TV Vaginitis por
Candida
pH 3.8 – 4.2 > 4.5 > 4.5 < 4.5
Secreción Transparente ↑homogénea y
gris
↑amarilla,
verdosa
↑blanco, leche
cortada
«Fishy odor» - + +/- -
Síntoma No ↑flujo, mal olor,
ardor
↑flujo, mal
olor, ardor,
picazón, disuria
↑flujo, ardor,
picazón
Microscopía
(fresco 400X)
Flora
lactobacilar,
cel epiteliales
Clue cells
leucocitos
(< 10/cpo.)
TV, leucocitos
(>10/cpo.)
Levaduras con
pseudoh.
GRAM (1000x) B+ rectos Cb (-) y/ fl.
ANAE.
- Levaduras con
pseudoh.
GIEMSA ↑↑ - - TV -

Investigación de CT en nuestras clínicas
Muestra Clínica
Detección por (Ag) Serología
(Ac)
Cultivo
celular
PCR Elisa IFD
Hisopado Endocervical SI SI SI SI
H. uretral SI SI SI SI
Semen NO SI* NO SI
1°chorro miccional NO SI SI* NO**
H. conjuntival SI SI SI SI
L. Peritoneal (Mujer) SI SI NO NO
Aspirado de bubones (LGV) SI SI SI SI +/- Suero
H. anal SI NO NO NO
H. / ANF SI NO NO NO + (IgM MIF)
*No es la Mx ideal por su ↓↓ S// ** si en varones CT: Chlamydia trachomatis

Micoplasmas
Especies Cuadro clínico Diagnóstico
M. pneumoniae NMN atípica Cultivo
Elisa
Sondas de DNA
PCR
IFD / Ac
M. hominis
Ureaplasma urealyticum
Cervicitis-Uretritis-Prostatitis-
Esterilidad-Aborto-EIP-Fiebre post
parto-PLNfritis
Cultivo
PCR
M. genitallium Uretritis-Cervicitis-Salpingitis-EPI PCR

Procesamiento de las Mx.
Especie Ferment. de GLU H. de ADH H. De UREA
M. hominis - + -
U. urealyticum - - +
M. hominis + - -
T. De Muestra
-Abstinencia sexual por 72 h.
-Obtención de material ↑↑ celular
o Endocérvix - H. uretral
o Orina – Esperma
o Sangre - Tejidos – Esputo
o Otros fluidos corporales

Características de LCR en MNG
Etiología Citología Química Aspecto
Células
mm3
L (%) PNM (%) Glu
(mg%)
∏
(mg%)
Cl
(mEq/l)
V.N. 1 - 5 90 - 100 0 - 3 50 - 70 15 - 40 120-130 Cr de
Roca
MNG vi A A* N** N o A A N
SIFILIS A A N N A N
TBC y Cn A A N o A D A D
Absceso
cerebral
A N A N A N
MNG B. A N A D A D TURBIO
MNG
Leucémicas
A A.
blastos
N D A N TURBIO
Hem. SAc A A A N o A A N o A Hemorr.

LCR: Etiología según la edad
Huésped Agente
Neonatos (0 – 2 meses) ENTB (Escherichia coli)
Streptococcus agalactiae
Listeria monocytognes
Lactante 2 m – 6 a Streptococcus pneumoniae
Haemophilus influenzae
Neisseria meningitidis
Adultos y > 6 a Streptococcus pneumoniae
Adultos / Ancianos Streptococcus pneumoniae
ENT / Listeria monocytognes (↓↓)
Asociados a shunt Staphylococcus epidermidis
Staphylococcus aureus
BGN

LCR: Etiología en
Inmunosuprimidos
Alteración en la
Inmunidad Celular
Cryptococcus neoformans
Mycobacterium tuberculosis
Listeria monocytogenes
Pacientes VIH (+) Cryptococcus neoformans
Mycobacterium avium-intracelllare
Mycobacterium tuberculosis
Listeria monocytogenes
Candida spp
Virus
Parásitos

Líquido de derrame pleural
Características Trasudado Exudado Empiema
Derrame PN no
complicado
Derrame PN
complicado
Aspecto Claro/límpido Variable (V.) Variable (V.) Purulento
Leucocitos/mm3 < 1000 V. (>1000) V. (>1000) > 15000
Rto. diferencial Variable PMN PMN PMN
∏ (g/dl) < 3,0 > 3,0 > 3,0 > 3,0
Glu (mg/dl) ≈ suero > 60 40 - 60 < 40
pH ≈ suero > 7,2 7,0 – 7,2 < 7,2
LDH < 200 < 1000 > 1000 > 1000
Bacterias No No No Presentes

Tipos de medios
Medio Características
Basal Permiten crecer casi todas las
bacterias.
Selectivos Favorecen el crecimiento de algún
tipo de bacteria e inhiben el de otras.
Enriquecido Líquidos o sólido: se obtiene a partir
de un medio basal suplementado con
nutrientes.
Diferenciales Sirven para evaluar las propiedades
bioquímicas de las bacterias y así
identificar una población bacteriana.
De transporte Permiten conservar las bacterias
evitando la pérdida de viabilidad.

Medio (S) Componentes Utilidad/Aplicación
Agar sangre Agar tripticasa –soja, agar brucella o
infusión de carne y corazón con 5%
de sangre ovina
Nutritivo, detección de la
capacidad hemolítica
Agar
chocolate
Base de peptona enriquecida con
una solución de hemoglobina al 2%
Desarrollo de
Haemophilus y Neisserias.
Agar eosina
azul de
Metileno
(EMB)
Base de peptona con lactosa y
sacarosa. La eosina y el az. De
metileno actúan como indicador
Crecimiento y
diferenciación de BGN
entéricos ferm. y no ferm.
de lactosa
Agar manitol
salado
Base de peptona, manitol y rojo de
fenol como indicador. La CC. De sal
de 7,5% inhibe a la > de las bacterias
Aislamiento y
diferenciación selectiva
de estafilococos.
Agar
Salmomella-
Shigella
Base de peptona con lactosa, citato
férrico y citrato de Na. Contiene rojo
neutro como indicador. Sales biliares
y verde brillante para inhibir
coliformes
Selectivo para el rescate
de Salmonella spp y
Shigella spp

Medio (S) Componentes Utilidad/Aplicación
Agar de
Skirrow
Agar base de peptona y proteína de
soja, con lisado de sangre de caballo
Vancomicina para inhibir G(+),
Polimixina B y TMS para inhibir G(-)
Selectivo para el
crecimiento de
Campylobacter spp.
Agar Thayer-
Martin
Base agar sangre enriquecido con
hemoglobina y enriquecedor;
Colistín, nistatina, vancomicina y
TMS.
Selectivo para Neisseria
gonorrhoeae y N.
meningitidis
Agar de
Bordett-
Gengou
Medio con base de papa y glicerol
más 15-20% de sangre ovina
desfibrinada y 2,5 µg/ml del
meticilina.
Aislamiento de
Bordetella pertussis
Agar
MacConkey
con sorbitol
Base peptona con lactosa, cristal
violeta y sales biliares (inh. G+), rojo
neutro como indicador. Puede
reemplazarse lactosa por sorbitol.
Aislamiento y
diferenciación de BGN
fermentadores y no ferm.
de lactosa. E. coli O157

Medio (L) Componentes Utilidad/Aplicación
Caldo
Selenito
Caldo base de peptona con sales
biliares y citrato férrico.
Medio selectivo para
Salmonella y Shigella.
Caldo
Tioglicolato
Digerido pancreático de caseína,
caldo de soja y glucosa.
Favorece el crecimiemto
de aerobios, anaerobios y
microorganismos con
requerimientos especiales.
Caldo Todd-
Hewitt
Es un caldo de enriquecimiento de
estreptococos, se suplementa con Ac.
Nalidíxico y colistín
Selectivo y de
enriquecimiento para
estreptoccos.
Caldo
tripticasa-soja
La tripteína y la peptona de soya
aportan péptidos, aa, bases púricas y
pirimídicas, minerales y vitaminas. La
peptona de soya contiene alta CC’
de HdC. El ClNa mantiene el
balance osmótico. El fosfato diK
otorga capacidad buffer y la glucosa
es la fuente de energía
Permite en general el
desarrollo de gérmenes
Gram (+) y (-).

Catalasa
Determina la capacidad de producir la enzima catalasa.
Staphylococcus spp catalasa (+)
Streptococcus spp y Enterococcus spp(-)
Se adiciona H2O2 sobre una gota o ansada de cultivo sobre un
porta objeto. Un burbujeo indica la presencia de la enzima.
2H2O2
Catalasa
2H2O+ O2
Burbujas de O2

OXIDASA
Identifica bacterias que contengan la enzima
citocromo oxidasa (respiración).
Enterobacteriacae (-)
Pseudomonadaceae, Neisseria spp(+)
La enzima citocromo oxidasa cataliza el
transporte de electrones de un dador
(phenylenediamine) hacia el aceptor final de la
respiración (O2)
Si la enzima esta presente se observara una
coloración purpura.
Discos comerciales – Papel de filtro - Tubo

Coagulasa
Determina la capacidad de coagular el plasma
por la acción de la enzima coagulasa.
Permite diferenciar S. aureus (coagulasa positivo)
de otras especies de Staphylococcus.
La prueba en tubo
se puede leer tras incubación de 2h,
si es (-) debe incubarse hasta 24h.

Hidrólisis del DNA
Detecta la enzima termoestable
«DNAsa», capaz de romper los
enlaces Fosfodiéster de la molécula
del DNA. Luego se revela con ClH.
Si el DNA se degradó el
complejo ADN-ClH no se
forma, dando un halo claro
alrededor del desarrollo
bacteriano.
Pos
Neg
Pos
Neg

Ensayo de ureasa
Para diferenciar organismos capaces de hidrolizar urea
con la ureasa (Tribu Proteae).
El medio contiene U y el indicador de pH rojo fenol (rosa
oscuro a pH > 8.4)por el amonio liberado.
Neg Pos. Neg Pos.

Prueba de PYR
Detecta la actividad de la enz. l-pirrolidonilarilamidasa
(PYRasa), que hidroliza el sustrato pirrolidonil-ß-naftil amida,
(en los discos) y liberan un grupo pirrólico que reacciona con el
reactivo cinamaldehído dando un compuesto de color rosado-
rojizo.
Se la utiliza para la identificación de cocos Gram (+) catalasa
negativa.
Pos. nEG.
Positivo

Prueba de LAP
Determina la presencia de la enzima leucino
aminopeptidasa (LAP). Los discos contienen el
sustrato: leucina-ß-naftilamida,
que hidroliza la enzima, con liberación de ß-
naftilamina, que reacciona con el reactivo
revelador: N-N dimetilamino cinamaldehído,
dando un compuesto rojo-rosado.
PositivoPYR (+) LAP (+)

Fenilalanina deaminasa
Detecta la acción de la enzima fenilalanina deaminasa.
Diferencia Morganella, Providencia, y Proteus (+) de otras
Enterobacteriaceae.
El medio contiene el aa fenilalanina. La enzima remueve el grupo
(NH2) y libera ácido fenil-pirúvico, que puede ser detectado por
la adición de un Cl3Fe 10% (oxidante) con un cambio de color al
verde.
Negativo Positivo

Sensibilidad a Bacitracina
Se usa en la confirmación presuntiva de
Streptococcus pyogenes, ya que, a diferencia
de la mayoría de los estreptococos, suelen ser
sensibles a bajas concentraciones de
bacitracina (0.04 U).
La pueba NO tiene punto
de corte.

Sensibilidad a Novobiocina
Esta prueba puede utilizarse
para la identificación
diferencial de Staphylococcus
saprophyticus (Resistente) del
resto de los Estafilococos.
Sensible > 16 mm
Se usan discos con 5 µg de ATM

Sensibilidad a Optoquina
Esta prueba puede utilizarse para la identificación
diferencial de Streptococcus pneumoniae dentro de los
Estreptococos alfa hemolíticos.
Sensible > 14 mm
Discos con 5 μg de clorhidrato
de etil-hidrocupreína

Factor CAMP
Permite detectar una proteína extracelular difusible,
«Factor CAMP» Que actúa en forma sinérgica con la
betalisina de Staphylococcus aureus, potenciando la
lisis de los eritrocitos.
CAMP (+) en
S. agalactiae

Hidrólisis de la Bilis Esculina (BE)
Medio de cultivo contiene extracto de carne,
peptona de carne (nutrientes), bilis de buey
(selectivo para coco+), esculina (glucósido) e iones
hierro (indicador).
La bacterias degradan la esculina a esculetina, que se
combina con el Fe, dando un compuesto férrico de color
pardo oscuro.
Neg Pos.

Tree Sugar Iron Agar (TSI)
Diferencia bacterias por su capacidad para fermentar glucosa,
lactosa y/o sucrosa, y para producir SH2.
Fermentación (medio ácido) + Tiosulfato de Sodio SH2 (gas)
SH2 + iones férricos Sulfuro ferroso (↓↓ negro insoluble)
Peptonas Amoniaco (NH3) pH (Rojo)
Azúcar Productos ácidos pH (Amarillo)

El medio contiene peptona, Glu, Sac, Lac, tiosulfato y
una sal férrica. El indicador es rojo fenol (amarillo a
pH< 6,8 / rojo pH > 6,8)
Se siembra en profundidad con aguja y luego se estría
el pico de flauta.
Fermentación
Medio acidificado
Fermentación (-)
Medio OH- x uso de
las peptonas
Fermenta Glu:
pico OH- /Fondo H+
Fermenta Glu
+ SH2

Resultados (Tubo/Base) Símbolo Interpretación
Rojo/Amarillo K/A
Solo fermenta la Glucosa, y
luego utiliza las peptonas
Amarillo/Amarillo A/A
Fermenta la glucosa y la lactosa
y o la Sacarosa
Rojo/Rojo K/K
No hay fermentación, Solo se
utilizan las Peptonas
Rojo/sin cambio K/NC
No hay fermentación, Solo se
utilizan las Peptonas
aeróbicamente
Amarillo/Amarillo con
disrupción del agar
A/A,G
Fermenta la glucosa y la lactosa
y o la Sacarosa con producción
de gas

Resultados (Tubo/Base) Símbolo Interpretación
Rojo/Amarillo con
disrupción del agar K/A,G
Solo fermenta la Glucosa, con
producción de gas
Rojo/Amarillo con
disrupción del agar y PP
negro
K/A,G, H2S
Solo fermenta la glucosa con
producción de gas y H2S
Rojo/Amarillo y PP negro K/A, H2S
Solo fermenta la glucosa y
produce H2S
Amarillo/Amarillo y PP
negro
A/A, H2S
Fermentación de glucosa, lactosa
y / o Sacarosa con producción de
H2S
Sin cambio/ Sin cambio NC/NC No hay crecimiento

Prueba de I.M.V.iC
1-Indol
2-Rojo de Metilo
3-Voges Proskauer
4-Citrato

Producción de Indol (1)
Identificar bacterias por su capacidad de producir
indol usando la enzima triptofanasa, la cual
convierte el aa triptofano en Indol, ácido pirúvico y
amonio.
Triptofano Indol + ácido piruvico + amonio
triptofanasa
Indol + p-dimetletilenamino-benzaldehido Rosindol (Rojo)
HCl
Alcohol isoamilico
Reactivo de Kovacs
Para detectar el metabolito Indol se utiliza el reactivo de
Kovac, que contiene ácido clorhídrico,
dimetilaminobenzaldehido y alcohol amílico. Una coloración
roja indica resultado positivo.

Triptofano Indol + ácido piruvico + amonio
triptofanasa
Indol + p-dimetletilenamino-benzaldehido Rosindol (Rojo)
HCl
Alcohol isoamilico
Reactivo de Kovacs
Para detectar el Indol producido, se utiliza el rvo de Kovac, que
contiene ácido clorhídrico, dimetilamino-benzaldehido y
alcohol amílico. Una coloración roja indica resultado positivo.

El triptofano se adiciona al medio en una concentración
1%. Esta presente en peptonas obtenidas por digestión
enzimática.
Se adicionan 1 a 2 gotas del reactivo de KOVACS.

Positive positive negative control.

Glucosa Piruvato Lactato
Acetil-CoA
Formiato
Etanol
CO2
Acetato
H2
Succinato
+
CO2
Fermentación acido-mixta

Voges-Proskauer (VP - 3)
Algunos microorganismos no producen suficientes ácidos
estables que bajen el pH. El producto final de la fermentación
de la glucosa es acetoina y 2,3-butanediol. Después de 48 hs de
incubación.
Barritt's A (alpha-napthol) y Barritt's B (potassium hydroxide)
se adicionan al cultivo y se agita ligeramente. Rojo positivo
Prueba (-) - Prueba (+)
Prueba (-) - Prueba (+)

Glucosa Piruvato Lactato
Acetil-CoA
Formiato
Etanol
CO2
Acetato
H2
Succinato
+
CO2
Glucosa Piruvato
2.3 Butanodiol + CO2
Etanol
Lactato
Succinato
Acetato
CO2 + H2
Fermentación acido-mixta
Fermentación butanediolica

Determinar si un microorganismo es capaz de utilizar Citrato como
única fuente de carbono.
Citrato (4)
Citrato de Sodio Acido piruvico + Acido oxalacetico + CO2
Citrato premeasa
Citrasa
Exceso de Sodio + CO2 + H2O Na2CO3
(liberado luego de usar el citrato)
(Alcalino --> pH)

Agar Citrato (de Simmons): Es un
medio definido que contiene
Citrato de Sodio como única
fuente de C y amonio como
fuente de nitrógeno. Si el citrato
se utiliza se producen compuestos
que alcalinizan el medio. El
indicador de pH, azul de
bromofenol, cambia de verde a
pH neutro (6.9) a azul a pH
mayores que 7.6.
Citrato (4)

Reducción de nitrato
Muestra la capacidad de Reducir NO3 a nitrito NO2 / o
N2 por acción de la enzima Nitrato Reductasa.
Nitrato (NO3) puede ser Reducido a diferentes compuestos por
respiración anaerobia o por denitrificación. El medio de cultivo
contiene nitrato de potasio como sustrato. Si el organismo Reduce
el nitrato a nitrito este reaccionara con ácido sulfanilico y a-
naftilamina (presentes en el reactivo o en el medio para Nitrato)
para producir un color rojo.
Si no hay color: 1-el nitrato no se Redujo
2-se redujo a otros compuestos. (N2)
NO3 + 2 H + 2e- NO2 + H2O
Nitrato reductasa

Test (-): El Zn0 reduce el nitrato a nitrito, dando color.
Si al agregar Zn se produce el complejo coloreado, la
bacteria NO usó el NO3

Test (+): El Zn0 reduce el nitrato a nitrito, dando color.
Si al agregar Zn no se produce color la bacteria usó
el NO3 y también el NO2

Ensayo de decarboxilasas
Muestra la capacidad para decarboxilar un aminoácido.
En esta reacción se remueve el grupo carboxylo (COOH) del aa
produciendo amina y CO2.
Como indicador de pH se usa púrpura de bromocresol.
Se emplea aceite mineral que crean un ambiente de
anaerobiosis para promover la fermentación.
pH alcalino el indicador cambia a purpura (+)
ADH(-) ODC(+) LDC(+) Control

LIA (Lysine Iron Agar)
Pone en evidencia:
*la decarboxilación de Lisina (aa), en diamina cadaverina
*la desaminación de la Lisina en un alfa cetoácido.
Ambas reacciones se evidencian por el cambio de color del
púrpura de bromo cresol.
La produción de SH2 se
evidencia por la
conversión de Tiosulfato
sódico a Sulfato férrico
S/inocular

S/inocular
DesaminaciónDecarboxilación
(+) (-)
Descarboxilación
SH2 (+)

S/inocular
Proteus sppEscherichia coli
Shigella spp
Salmonella
Proteus spp

SIM (Sulfídrico – Indol – Motilidad)
Tiene peptona como sustrato principal, adicionado de
tiosulfato sódico, Fe y amonio.
Pos. nEG.
POS: turbidez difusa en todo el medio
NEG: crecimiento en el punto de siembra

Pos. nEG.
POS: Formación de SFe
que ennegrece la zona
de crecimiento
NEG: el medio no cambia
de color.

Pos. nEG.
POS: Formación de un
anillo rojo luego de
agregar el reactivo Kovacs
NEG: sin color

1 2
Combinación de los resultados:
1-Móvil, SH2 (+) e indológena
2-Inmóvil, SH2 e indol (-)

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