Bacterio práctica

2. El estudio del examen bacteriológico de heces reviste
especial importancia en nuestro medio, particularmente en
consideración de los pacientes de corta edad, los recién
nacidos, que pueden ser víctimas de diarrea frecuente, la
mayoría de las cuales se deben en nuestro medio a
infecciones del intestino por diferentes especies de
enterobacterias que son de tipo patógeno, como algunas
del grupo coliformes integrado por escherichia coli,
klebsiella, enterobacter, destacandose la patogenicidad de
la escherichia coli.
DR EDUARDO CHANCAY LOPEZ
JEFE DE CATEDRA DE BACTERIOLOGIA

3. Ademas otras bacteria como la
salmonella, shigella, proteus,
clostridium, estafilococos, estreptococos
y pseudomona aureoginosa, son también
agentes causantes de diarrea,
dependiendo del estado inmunologico del
paciente.
DR EDUARDO CHANCAY LOPEZ
JEFE DE CATEDRA DE BACTERIOLOGIA

4. ¿Qué es un Coprocultivo?
•Es un examen bacteriológico en el cual se investiga
la presencia de bacterias patógenas (que producen
enfermedad) en materia fecal.
¿Por qué se necesita hacerlo?
•Para identificar el agente causal del cuadro entérico
y tratarlo con el antibiótico adecuado, en caso de que
corresponda hacerlo. No todos los patógenos
intestinales se deben tratar con antibióticos, ya que
que algunos cuadros se autolimitan.

5. ¿Como debo recolectar la muestra?
•Se tomaran con hisopo estéril muestras de las
partes purulentas o sanguinolentas de la deposición.
•Embeber el hisopo, no juntar materia fecal con el
hisopo, solo embeberlo.
•Colocarlo hasta el fondo en el medio de transporte
provisto por el laboratorio.
•Cortar el exceso del palito del hisopo, y con él hacer
dos extendidos en los portaobjetos provistos por el
laboratorio. El grosor de los extendidos debe ser tal
que se pueda leer a través de ellos.
•Conservar a temperatura ambiente.
¿Cuanto demora el resultado?
•Usualmente 3 o 4 días.

6. 1. Muestra de heces
2.Instrumentos: caja de petri, tubos de ensayo,
pipetas de 1cc, asa y aguja de inoculación,
mechero, estufa y medios de cultivo.
3.Todo el material referente a instrumentos y
medios de cultivo deben estar en condiciones de
esterilidad.
4.Solución salina en tubos
5.Iodo al 30%
DR EDUARDO CHANCAY LOPEZ
JEFE DE CATEDRA DE BACTERIOLOGIA

7. CALDO DE TETRATIONATO: caldo base con tetrationato 4.6 gr.
AGUA DESTILADA
Se lo emplea principalmente para el bacilo tifoidico y otras salmonellas.
AGAR S.S.: se utiliza para aislar las salmonellas y principalmente las
shigellas.
AGAR BISMUTO SULFITO: lo utilizamos para aislar la salmonella tifosa
y otras salmonellas que producen ácido sulfhidrico.
AGAR T.S.I: (KLIGLER) nos va a servir en la lectura final del
coprocultivo, diferenciando los bacilos entericos a base de fermentación de
glucosa, lactosa, sacarosa y de la producción de gas de fermentación y de
SH2
DR EDUARDO CHANCAY LOPEZ
JEFE DE CATEDRA DE BACTERIOLOGIA

8. A.- Se inicia tomando una muestra de heces y
sembrando en caldo de Tetrationato, al cual se le
agrega 0,2 de yodo para inhibir la flora Grampositiva.
B.- Luego tomamos otra muestra de heces y la
sembramos en solución salina, con esta realizamos una
suspensión, de esta suspensión tomamos una muestra
y sembramos con el asa en estría en agar Bismuto e
incubamos a 48 horas y a 37°C. Para obtener un
aislamiento bacteriano por diseminación.
DR EDUARDO CHANCAY LOPEZ
JEFE DE CATEDRA DE BACTERIOLOGIA

9. C.- Luego tomamos otra muestra de esta
suspensión y la colocamos en una caja de
Petri vacía y estéril a la cual le agregamos
10cc de agar Bismuto fundido y enfriado
a 45°C y mezclamos, incubamos a 48hrs.
y 37°C. Para obtener un aislamiento
bacteriano por dilución.
DR EDUARDO CHANCAY LOPEZ
JEFE DE CATEDRA DE BACTERIOLOGIA

10. A.- Del caldo de Tetrationato sacamos una
muestra y sembramos en agar SS en estría,
incubamos a 24 horas y 37°C.
B.- Se incuba el agar para obtener un
aislamiento bacteriano por diseminación
DR EDUARDO CHANCAY LOPEZ
JEFE DE CATEDRA DE BACTERIOLOGIA

11. Por cada caja de Petri se toman 3 colonias y
sembramos en tres Agar Kliger diferentes en
superficie y en profundidad (con la aguja de
inoculación),es decir en total 9 tubos.
Se incuba a 37°C a 24 Horas.
DR EDUARDO CHANCAY LOPEZ
JEFE DE CATEDRA DE BACTERIOLOGIA

12. A.- Se hace la lectura de los Kliger (coprocultivo)
El agar Kliger o TSI es un medio de cultivo
diferencial de color rojo gelatina y que por efecto de
las enzimas bacterianas puede cambiar su color a:
•Amarillo total.- Indica acidez
•Rojo total.- Indica alcalinidad
•Negruzco.- Presencia de SH2
•Presencia de burbujas.- Indica gas de fermentación
DR EDUARDO CHANCAY LOPEZ
JEFE DE CATEDRA DE BACTERIOLOGIA

13. MUESTRA DE
HECES
YODO
PASO “A”
CALDO DE
TETRATIONATO
37°C 24H.
SUSPENSION
AGAR BISMUTO
37°C 48H..
DISEMINACION
AGAR BISMUTO
ESTERIL
DILUCION POR 48
HORAS
AGAR BISMUTO
FUNDIDO Y ENFRIADO
45°C.
0,2CC
SIEMBRA
SOLUCION SALINA
10CC
PASO
“B”
PASO
“C”
AGAR SS
INCUBA 37°C 24 HORAS
AISLAMIENTO BACTERIANO POR DISEMINACION
9 KLIGER
SE INCUBAN A 37 °C
DURANTE 24 HORAS
SE REALIZA UNA DOBLE RESIEMBRA EN
(PROFUNDIDAD Y EN SUPERFICIE)

14. POSIBLE ESCHERICHIA COLI
AUSENCIA DE SH2
CON GAS DE FERMENTACION
SUPERFICIE ACIDA
FONDO ACIDO
POSIBLE SHIGELLA
POSIBLE PROTEUS
POSIBLE PSEUDOMONA AERUGINOSA
POSIBLE ALCALIGENES FECALIS
POSIBLE SALMONELLA TIFOSA
SUPERFICIE ALCALINO
FONDO ALCALINO
NO SH2
NO GAS DE FERMENTACION
ABUNDANTE DE SH2
SIN GAS DE FERMENTACION
SUPERFICIE ALCALINA
FONDO ACIDO
FONDO Y SUPERFICIE SIN
REACCIONAR
COLONIAS DE COLOR AZOGADO – O
AZUL -VERDOSO
NO GAS DE FERMENTACION
NO SH2
DISCRETO PRESENCIA DE SH2
SIN GAS DE FERMENTACION
SUPERFICIE ALCALINA
FONDO ACIDO
AUSENCIA DE SH2
SIN GAS DE FERMENTACION
SUPERFICIE ALCALINA
FONDO ACIDO
DR EDUARDO CHANCAY LOPEZ
JEFE DE CATEDRA DE BACTERIOLOGIA