3. Biología Molecular: Terapia Genética:
Es la disciplina científica Es un área de la medicina
que tiene como objetivo el genómica que utiliza los
estudio de los procesos que conocimientos, técnicas y
se desarrollan en los seres tecnología de que dispone la
vivos desde un punto de biología molecular, para
vista molecular. introducir de manera dirigida
copias sanas de genes
En el Proyecto Genoma defectuosos en células
Humano se le definió como: especificas del organismo y
El estudio de la estructura, modificar el curso de la
función y composición de enfermedad.
Para lograr esto se hace uso de
las moléculas
otras moléculas llamadas
biológicamente
portadoras y que son
importantes .
usualmente procedentes de
virus.
4. Como trabaja la terapia genética:
Insertar ADN complementario: Una cadena sencilla de ADN que
se sintetiza a partir de una hebra simple de ARNm maduro y
utiliza para la clonación de genes propios de células eucariotas en
células procariotas.
Mutación Selectiva Inversa: La mutación inversa es un proceso
que permite revertir un gen mutado a su forma no mutada,
mutación selectiva inversa se refiere a la realización de este
proceso por medios artificiales.
Recombinación Homologa: Es un proceso por el cual las
secuencias de nucleótidos son intercambiadas entre dos cadenas
similares o idénticas de ADN.
Inhibición de genes: Consiste en el encendido o apagado de la
expresión de un gen.
6. EL USO DE VECTORES
Un vector es
generalmente
un virus que ha
sido alterado
genéticamente
con el propósito
de que sea
inofensivo al
organismo pero
se aprovecha su
habilidad para
generar copias
de ADN.
7.
8. Retrovirus Son virus con envoltura que
presentan un genoma de ARN
mono catenario de cara y se
replican de manera inusual a
través de una forma intermedia
de ADN bicatenario. Este proceso
se lleva a cabo mediante una
enzima: la retrotranscriptasa o
transcriptasa inversa, que dirige
la síntesis de ADN a través de
ARN y posee una importancia
extraordinaria en la
manipulación genética. Una vez
se ha pasado de ARN mono
catenario a ADN se inserta
dentro del ADN propio de la
célula infectada donde se
comporta como un gen más .
9. son una familia de virus que
infectan tanto humanos como
Los Adenovirus
animales. Los adenovirus
fueron aislados en las
adenoides (amígdalas) de los
humanos, de donde deriva el
nombre.
La Capacidad para infectar
las células en división o
quiescentes, los hace útiles
en la terapia genética ya que
podrían integrar el gen en
diversas zonas del
organismo. El problema
principal es la alta
inmunogenicidad, y que su
10. VIRUS ADENO ASOCIADO
Se encuentran en combinación con otros virus. Sin
embargo, por sí mismo son inofensivos.
Ventajas en Terapia Genética:
1. No estimulan la inflamación en la célula huésped;
2. Pueden entrar en células que no estén en división.
3. Se integran en un único sitio del genoma, en el
cromosoma 19 en humanos.
4. No causa enfermedades en humanos y no es
inmunogénico.
Limitaciones:
1. son difíciles de desarrollar en grandes cantidades,
2. son difíciles de manipular y
3. Necesitan otros virus durante la confección.
11. Casos clínicos en
los que se ha
utilizado terapia
genética
Un ejemplo es la denominada inmunodeficiencia combinada severa
o <<enfermedad de los niños burbuja>>, que ocasiona la muerte a
los afectados, (pues estos niños no disponen de un sistema inmune
sano). Con terapia somática ex vivo se han logrado salvar nueve de
cada diez niños tratados, aunque dos de ellos desarrollaron
leucemia que, afortunadamente, en niños suele ser tratable.
12. Fibrosis y cirrosis hepática
ATRACTIVOS DEL HÍGADO
PARA LA TERAPIA GÉNICA Estructura
Posición
Vía
13. Base biológica
legítima
Agente
Concentrac Objetivo terapéutico
iones altas Terapéutic debe
del o para la permanecer en
compuesto Fibrosis el micromedio
activo en el Hepática del tejido
hígado. blanco por
largo tiempo.
Producir pocos
efectos extra
hepáticos
14. Transferencia de
genes entre
hígados normales
y enfermos.
PROCEDIMIENTOS
EN EL ÓRGANO
BLANCO
Inyectando Inyección
vectores virales directa de DNA
plasmídicos
recombinantes
desnudos
complejos que se unidos con
liberan en los diferentes
lóbulos hepáticos. ligandos.
15. Casos clínicos en los que se ha utilizado terapia genética
Fibrosis y Cirrosis Hepática
. El gen de la telomerasa inhibe y protege en contra de la fibrosis
hepática inducida por CCL4 en ratones.
. La transferencia de la sintasa del óxido nítrico neuronal en ratas
cirroticas mejora la hipertención portal.
. La inibición del NF- kB mediante el envió de su represor el IkB
reduce la lesión temprana en ratas inducidas por alcohol.
. Vectores adenovirales pueden ser transducidos en hepatocitos de
hígado cirroticos y se demostró que estos no se alojan en otros
órganos , a pesar de ser introducidos por vía general ( vena iliaca
de la rata).
16. Casos clínicos en los que se ha utilizado terapia genética
Fibrosis y Cirrosis Hepática
Se puede revertir la cirrosis hepática?
Los estudios en vivo se llevaron a cabo en el modelo de CCL4 y el de ligadura de
conducto biliar.
Se probó:
La eficacia de transducción con 3x1011 partículas víricas/kg del vector adenoviral
portando el gen de la metaloproteasa de matriz 8 (MMP8). El razonamiento de
utilizar MMP8 fue el de la promoción de la degradación in situ de las proteínas
de la matriz extracelular, liberando e factor de crecimiento hepático (HGF) y
dejando espacio libre para la proliferación de células hepáticas.
Resultados:
Modelo: Ligadura biliar , disminución de la fibrosis de 45%.
Modelo: CCL4, disminución 56%.
Otro gen terapéutico fue el plasminógeno urocinasa humano (HUPA); con este gen
se logró una reducción de 85% de la fibrosis hepática al día 10 posterior a la
inyección del adenovirus.
17. Casos clínicos en los que se ha utilizado terapia genética
Terapia antisentido
Se trata de otra estrategia metodológica, en donde las
enfermedades caracterizadas por una proteína anormal o la
producción en exceso de una proteína anormal pueden
potencialmente tratarse mediante un bloqueo selectivo del
gen o los genes que causan esta enfermedad. Cuando un
gen se expresa, la secuencia de bases de DNA se transcribe
a una sola cadena de RNA y luego se traduce a una
proteína. La idea principal de la terapia antisentido es evitar
la expresión del gen RNA de la proteína; esto es interrumpir
el flujo de la información genética usando oligonucleótidos
que tienen como blanco secuencias específicas de RNAm.
18. TERAPIA GENETICA LA MEDICINA DEL SIGLO XXI
2002 y anteriores
La terapia génica apareció a partir de los años 70 y
se dieron las primeras pruebas con virus, las cuales
fracasaron. En 1990, se utiliza células de médula
ósea tratadas con un vector retroviral que porta una
copia correcta del gen que codifica para la enzima
adenosina desaminasa, la cual se encuentra mutada,
es una enfermedad que forma parte del grupo de las
inmunodeficiencias severas combinadas (SCID).
Cinco años más tarde, publicaron los resultados de
la terapia, que contribuyó a que la comunidad
científica y la sociedad consideraran las
posibilidades de ésta técnica.
No obstante, el apoyo a la terapia fue cuestionado
cuando algunos niños tratados para SCID
desarrollaron leucemia. Las pruebas clínicas se
interrumpieron temporalmente en el 2002, a causa
del impacto que supuso el caso de Jesse Gelsinger,
la primera persona reconocida públicamente como
fallecida a causa de la terapia génica.
19. TERAPIA GENETICA LA MEDICINA DEL SIGLO XXI
2003
Un equipo de investigadores de la
universidad de California, en Los Ángeles,
insertó genes en un cerebro utilizando
liposomas recubiertos de un polímero
llamado polietilen glicol (PEG). La
transferencia de genes en este órgano es
un logro significativo porque los vectores
virales son demasiado grandes para
cruzar la “barrera hematoencefálica”.
Este método tiene el potencial para el
tratamiento de la enfermedad del
Parkinson.
También la interferencia por ARN se
planteó en éste año para tratar la
enfermedad de Huntington.
20. TERAPIA GENETICA LA MEDICINA DEL SIGLO XX
2006
Científicos tratan exitosamente un melanoma
metastásico en dos pacientes, utilizando células T
para atacar a las células cancerosas.
En Marzo del 2006, un grupo internacional de
científicos anunció el uso exitoso de la terapia
génica para el tratamiento de dos pacientes adultos
contagiados por una enfermedad que afecta a las
células mieloides.
En Mayo del 2006, un equipo de científicos
informaron del desarrollo de una forma de prevenir
que el sistema inmune pueda rechazar la entrada
de genes.
En Noviembre del mismo año, se informó sobre
VRX496, una inmunoterapia para el tratamiento del
HIV que utiliza un vector lentiviral para transportar
un DNA antisentido contra la envuelta del HIV. Fue
la primera terapia con un vector lentiviral aprobada
por la FDA para ensayos clínicos. Los datos de la
fase I/II ya están disponibles.
21. TERAPIA GENETICA LA MEDICINA DEL SIGLO XXI
2007
El 1 de mayo del 2007 anunciaron el primer ensayo de terapia
génica para la enfermedad hereditaria de retina. La Amaurosis
congénita de Leber es una enfermedad hereditaria que causa la
ceguera por mutaciones en el gen RPE65. Se investigó la
transfección su retiniana por el virus recombinante adeno-
asociado llevando el gen RPE65, y se encontraron resultados
positivos. Los pacientes mostraron cierto incremento de la
visión, y no se presentaron efectos secundarios aparentes. Los
ensayos clínicos de esta terapia se encuentran en fase I.
22. TERAPIA GENETICA LA MEDICINA DEL SIGLO XXI
2008
Investigadores de la Universidad de Míchigan en Ann Arbor
(Estados Unidos) desarrollaron una terapia genética que
ralentiza y recupera las encías ante el avance de la enfermedad
periodontal, la principal causa de pérdida de dientes en
adultos. Investigadores descubrieron una forma de ayudar a
ciertas células utilizando un virus inactivado para producir más
cantidad de una proteína denominada receptor TNF. Este
factor se encuentra en bajas cantidades en los pacientes con
periodontitis. La proteína administrada permite disminuir los
niveles excesivos de TNF, un compuesto que empeora la
destrucción ósea inflamatoria en pacientes que sufren de
artritis, deterioro articular y periodontitis. Los resultados del
trabajo mostraron que entre el 60 y el 80 por ciento de los
tejidos periodontales se libraban de la destrucción al utilizar la
terapia génica.
23. TERAPIA GENETICA LA MEDICINA DEL SIGLO XXI
2009
En Septiembre de 2009, se publicó en Nature que
unos investigadores de la Universidad de
Washington y la Universidad de Florida fueron
capaces de proporcionar visión tricromática a
monos ardilla usando terapia génica.
En noviembre de ese mismo año, la revista Science
publicó resultados alentadores sobre el uso de
terapia génica en una enfermedad muy grave del
cerebro, la adrenoleucodistrofia, usando un vector
retroviral para el tratamiento.
24. TERAPIA GENETICA LA MEDICINA DEL SIGLO XXI
2010
Se anuncian resultados exitosos en el tratamiento de
pacientes de VIH con el uso de terapia genética, Sin embargo,
los científicos admitieron que todavía existen obstáculos y
que el próximo paso será asegurar que las células sanguíneas
que reciban los genes de protección contra el sida no sean
destruidas por el sistema inmunológico del paciente.
2011
En la actualidad se trabaja en la elaboración de nuevas
estrategias genéticas contra el VIH que implican el uso del
propio virus como vector, a un se esta a la espera de anuncios
oficiales de los resultados.
