Praktikum patologi klinik semester 4 angkatan 2012
•
8 likes•10,999 views
Praktikum ini membahas pengambilan sampel darah, pengukuran kadar hemoglobin (Hb) dengan metode Sahli, dan hitung leukosit. Terdapat penjelasan tentang prinsip, alat dan bahan, serta cara kerja pengambilan sampel darah secara vena dan kapiler, serta pengukuran Hb dengan metode Sahli yang melibatkan pembentukan hematin asam dan pembandingan warna hasil reaksi dengan standar.
Recommended
More Related Content
What's hot
What's hot (20)
Viewers also liked
Viewers also liked (20)
Similar to Praktikum patologi klinik semester 4 angkatan 2012
Similar to Praktikum patologi klinik semester 4 angkatan 2012 (20)
Recently uploaded
Recently uploaded (10)
Praktikum patologi klinik semester 4 angkatan 2012
- 1. PRAKTIKUM PATOLOGI KLINIK SEMESTER 4 ANGKATAN 2012 PRAKTIKUM 1: Pengambilan sampel darah, pengukuran Hb dan hitung leukosit) I. Pengambilan Sampel Darah A. Prinsip: • PHLEBOTOMY: Mengambil sampel darah di vena superficial dan besar, seperti v. mediana cubiti, v. cephalica, vv. Dorsum manus dan v. saphena magna. • PENGAMBILAN DARAH KAPILER: pada ujung jari III-‐IV tangan, lobulus auricularis atau calcaneus dan halux pada bayi. B. Alat dan Bahan: • PHLEBOTOMY: o Semperit dan jarum steril (no. 18-‐21) o Kapas alkohol 70% o Tourniquet o Penampung (plain atau anticoagulated) à EDTA, sodium citrat, heparin • Pengambilan darah kapiler: o Lancet steril o Kapas alkohol 70% o Botol/tempat penampung C. Cara Kerja • Phlebotomy: o Tentukan lokasi penusukan o Ikat lengan bagian atas dengan tourniquet di proksimal v. mediana cubiti pada fossa cubiti, tidak lebih dari 1 menit o Desinfeksi lokasi penusukan dengan kapas alkohol secara sirkuler dari pusat ke luar o Fiksasi dengan cara meletakkan tangan di bawah lokasi penusukan, ibu jari tepat di distal v. mediana cubiti o Tusukkan jarum sejajar dengan arah vena dan sedatar mungkin (<30°) o Bila dilakukan dengan tepat makan akan tampak darah pada pangkal jarum. Lepaskan tourniquet. o Hisap darah pelan-‐pelan hingga 2 ml. o Letakkan kapas pada tempat penusukan (jangan ditekan). Cabut jarum pelan2. o Tutup semprit dengan penutupnya kemudian lepaskan jarum. o Masukkan darah ke dalam tempat penampung. o Goyangkan penampung agar darah tercampur dengan antikoagulan • Pengambilan darah kapiler: o Periksa kulit yang akan ditusuk
- 2. o Desinfeksi dengan alkohol 70% o Fiksasi dan tegangkan kulit o Tusuk dengan lancet (cepat, tepat dan tegak lurus) D. Yang perlu diperhatikan • Phlebotomy: o Saat memeriksa spuit harus didorong dulu sebelum digunakan agar tidak menimbulkan emboli. o Tourniquet dipasang di proksimal jika mau mengambil darah vena dan di distal jika mau mengambil darah arteri. o Tourniquet dilepaskan setelah jarum masuk dan sebelum darah diambil agar tidak muncrat2 darahnya. o Bila memasang tourniquet terlalu lama, menyebabkan peningkatan HCT. Bila HCT naik otomatis, viskositas darah meningkat, dan LED (laju endap darah) menurun karena darah lebih lama mengendapnya. • Pengambilan Darah Kapiler: o Tidak mengambil darah di jari 1 dan 5 karena ada vagina tendinum musculorum o Tetes darah yang pertama keluar tidak dipakai o Setelah ditusuk jangan dipijat-‐pijat II. Pengukuran Kadar Hb dengan Metode Sahli (Hematin Asam) A. Prinsip: • Darah ditambah larutan asam encer (untuk melisiskan eritrosit) sehingga Hb keluar à terbentuk hematin asam. • Kemudian diencerkan dengan aquadest dan membandingkan terhadap warna standar secara visual B. Alat dan Bahan: • Hb meter sahli • Spuit • Aquadest • Darah sampel • Gelas standar warna coklat • Tabung sahli berskala • Pipet sahli 20 mikro liter • Gelas pengaduk • Pipet pasteur à yang merah2 • Larutan HCl 0,1 M C. Cara Kerja: • Isi tabung sahli dengan HCl 0,1 M sampai pada 2 gr % (ambil menggunakan pipet pasteur kemudian masukkan ke dalam tabung sahli) • Pasang spuit pada pipet sahli, ambil darah EDTA sampai 20 mikro liter.
- 3. • Membersihkan sisa darah pada bagian luar pipet sahli (hti-‐hati jangan meletakkan tisu tegak lurus dengan pipet karena darahnya nanti terhisap keluar) • Memasukkan darah ke tabung sahli, dibilas beberapa kali dalam larutan HCl 0,1 M • Mencampurkan dan meratakan dara dengan gelas pengaduk, tunggu hingga 10 menit hingga terbentuk larutan hematin asam. • Mengencerkan larutan hematin asam dengan aquadest menggunakan pipet pasteur sampai warnanya sama dengan warna kaca standart sahli • Baca skala pada tabung lalu kalikan dengan faktor koreksi D. Yang perlu diperhatikan: • Nilai normal Hb: o Laki2: 14-‐18 gr/dL o Perempuan: 12-‐16 gr/dL • Faktor kesalahan: o Alat: volume pipet kurang tepat, warna kaca standar berubah, kadar larutan HCl kurang tepat o Manusia: pengambilan darah kurang tepat, pengelihatan petugas, bias (intensitas warna) • Cara menentukan faktor koreksi: o Periksa sedikitnya 10 sampel darah dengan cara sahli dan sianmet Hb yang sudah dikaliberasi o Hitung rata2 nilai Hb dari cara sahli (X g%) dan nilai Hb cara sianmetHb (Y g%) o Y=f.X o Tiap kali mendapatkan nilai Hb dari sahli harus dikalikan dengan faktor koreksi (f). • Mengapa Hb harus diubah menjadi hematin asam? Karena HCl yang digunakan untuk membuat larutan hematin asam berfungsi untuk melisiskan eritrosit. • Apa yang terjadi bila kadar HCl yang dipakai tidak sesuai? Kalau kurang, tidak semua eritrosit lisis, bila kelebihan kaca tabungnya bisa pecah • Apa yang terjadi bila jumlah HCl yang dimasukkan ke dalam tabung sahli tidak tepat tanda 2 g%? Karena 2 g% adalah jumlah minimal untuk melisiskan eritrosit manusia • Mengapa harus ditunggu 10 menit sebelum melakukan pengenceran hematin-‐asam? Agar eritrosit lisis semua dan Hbnya keluar. Kalau Hb tidak keluar apa yang mau diperiksa? • Apa yang terjadi bila pengenceran untuk menyamakan warna hematin asam dengan warna standar sahli tidak menggunakan aquades? Dipakai aquades karena dianggap hipotonis terhadap darah manusia sehingga bisa melisiskan eritrosità untuk mengencerkan III. Pengukuran Kadar Hb Metode SianmetHb A. Prinsip:
- 4. Mencampurkan sampel darah dan darah standar dengan larutan drabkin, membaca absorbance nya dengan spektrofotometer untuk dibandingkan dan dikalkulasi. Kalkulasi: Kadar Hb (g/dL) = Abs sampel/Abs standar x konsentrasi standar Hb Darah + lar. Drabkin à K3Fe(CN06 Mengoksidasi Hb (Fe2+) menjadi metHb (Fe3+) MetHb + KCN à sianmet Hb B. Alat dan Bahan • Spektrofotometer • Reagensia (larutan drabkin): o NaHCO3 1 gr o K3Fe(CN)6 0,2 gr o KCN 0,05 gr o Aquadest 1000 ml C. Cara Kerja: • Pipet 5 ml lar. Drabkin ke dalam 2 tabung • Masukkan 20 mikro liter darah kapiler ke dalam tabung kedua dan bilas beberapa kali • Campur baik baik biarkan 10 menit • Masukkan ke dalam kuvet • Baca absorbance pada spektrofotometer λ=540 nm dengan larutan drabkin sebagai blanko • Pada kuvet lain, masukkan larutan standar HiCN yang sudah diketahui kadarnya baca pada alat yang sama • Lakukan kalkulasi D. Yang perlu diperhatikan: • Larutan drabkin orisinal reaksinya lambat dan cenderung mengendapkan protein plasma, dengan modifikasi ditambahkan dihidrogen fosfat untuk menurunkan pH dan mempercepat reaksi dan deterjen non ionik untuk mempercepat lisis sel dan mengurangi kekeruhan akibat presipitasi protein • HbCO menyerap lebih banyak sinar daripada HiCN pada 540 nm à bila berlum cukup waktu untuk merubah HbCO menjadi HiCN, akan terjadi kadar Hb yang tinggi-‐palsu • Hasil tinggi palsu juga terjadi pada sampel yang keruh misal pada pasien leukositosis, hiperlipidema, proteinemia atau bila eritrosit tidak lisis sempurna IV. Penghitungan Sel Darah A. Prinsip: • Darah diencerkan dengan larutan pengencer tertentu
- 5. o Untuk leukosit 1 vol darah: 20 larutan pengencer o Untuk eritrosit: 200 larutan pengencer • Dimasukkan ke dalam kamar penghitung, melalui tepi gelas penutup sampai tepat mengisi daerah penghitungan • Jumlah sel dihitung secara mikroskopis o Lensa objektif 10x untuk leukosit o Lensa objektif 45x untuk eritrosit dan trombosit B. Alat dan Bahan: • Kamar penghitung: neubauer/ improved neubauer/ dacie/ burker/ fuchs Rosenthal o Untuk menghitung leukosit dan trombosit: 4 kotak W (kotak di sudut kanan kiri atas dan kanan kiri bawah), volume 1 kotak: 0,1 mm3 o Untuk menghitung eritrosit: 5 kotak R, volume 1 kotak: 0,004 mm3 • Pipet mikro/pipet thoma • Larutan pengencer: o Untuk eritrosit: hayem o Untuk leukosit: turk, asam asetat glasial o Untuk trombosit: rees-‐ecker C. Cara Kerja: • Hisap darah tusuk kulit/EDTA dengan piepet thoma untuk leukosit atau eritrosit sampai tanda 0,5 • Lanjutkan dengan menghisap larutan pengencer ke dalam pipet thoma o Sampai tanda 11 untuk leukosit (pengenceran 20x) o Sampai tanda 101 untuk eritrosit (pengenceran 200x) • Campur baik2 darah dan larutan pengencer yang berada dalam bagian pipet thoma yang bulat (dengan mengayunkan pergelangan tangan atau memutar pergelangan ke depan dan ke belakang) • Setelah tercampur baik, buang 4-‐5 tetes larutan yang ada dalam bagian pipet thoma yang berskala 0,5 dan 1 (karena bagian bawah dari tabung larutannya tidak tercampur dengan baik, yang tercampur adalah yang pada bagian yang bulat maka yang pertama harus dibuang dulu) • Selanjutnya masukkan campuran darah dalam pipet thoma ke dalam kamar hitung yang sudah dilapisi dengan cover glass sampai mengisi dengan tepat seluruh area penghitungan • Untuk memudahkan penghitungan sel, biarkan kamar hitung beberapa saat agar sel2 darah mengendap pada dasar area penghitungan, dengan meletakannya pada petri dish yang berisi kertas tissue basah/lemabab (menjaga agar larutan darah pada kamar hitung tidak kering) • Lihat kamar hitung di bawah mikroskop dan perhatikan distribusi sel2 dalam kotak2 penghitungan harus merata. • Hitung jumlah sel dalam kotak penghitungan o Leukosit dan trombosit: hitung dalam 4 kotak W o Eritrosit: hitung dalam 5 kotak R/E D. Yang harus diperhatikan:
- 6. • Kalkulasi: o Volume kotak penghitungan: § Vol 4 kotak W: 4 x 0,1= 0,4 mm3 § Vol 5 kotak E: 5 x 0,004= 0,02 mm3 o Besarnya pengenceran: § Pengenceran leukosit: 20 x § Pengenceran eritrosit dan trombosit: 200 x o Jumlah sel darah dalam kotak penghitungan: § Jumlah leukosit dalam 4 kotak W = P sel/0,4 § Jumlah eritrosit dalam 5 kotak E = Q sel/0,02 § Jumlah trombosit dalam 4 kotak W = R sel/0,4 • Maka jumlah sel/mm3 darah: o Leukosit: 1/0,4 x 20 x P = 50 P/mm3 o Eritrosit: 1/0,02 x 200 x Q = 10.000 Q/mm3 o Trombosit: 1/0,4 x 200 x R = 5.000 R/mm3 PRAKTIKUM 2: Membuat hapusan darah tepi, hitung jenis leukosit, dan hitung retikulosit I. Membuat hapusan darah tepi A. Alat dan Bahan • Gelas objek • Gelas penggesek • 1 tetes darah tusuk kulit/darah EDTA B. Cara Kerja • 1 tetes darah tusuk kulit/darah EDTA pada salah satu ujung gelas obyek • Tempatkan tepi gelas penggesek dengan sudut 30° (ideal untuk counting area) di depan tetesan darah • Geser meundur gelas penggesek hingga tepinya menyentuh tetesan darah à biarkan darah menyebar rata di sepanjang tepi gelas penggesek • Gesek dengan kecepatan cukup gelas penggesek ke depan sehingga seluruh darah pada tepi ujung penggesek terpapar merata pada gelas obyek • Keringkan hapusan di udara, tidak boleh ditiup dengan mulut (karena CO2 dapat menciptakan suasana asam). Boleh dengan kipas angin. C. Yang perlu diperhatikan: • Gerak pelan, sudut <30° à hapusan tipis • Gerak cepat, sudut >30° à hapusan tebal • Untuk menghindari hapusan yang terlalu tebal, setelah tepi gelas penggesek menyentuh tetesan darah dan darah telah merata di tepinya, kita angkat dan pindahkan posisi tepi gelas penggesek lebih ke depan dan baru kemudian kita gesekan ke depan. II. Pengecatan hapusan darah tepi
- 7. Pengecatan rutin: • Kriteria pengecatan baik o Hapusan berwarna merah-‐kecokelatan o Eritrosit berwarna salmon pink o Inti leukosit biru-‐ungu o Sitoplasma trombosit purple blue ke lilac, granula merah ungu o Granula eosinophil: oranye jingga • Penyebab deviasi warna merah: o Cat/buffer terlalu asam o Buffer cat berlebihan o Pengecatan kurang lama o Hapusan terlalu tipis o Kontaminasi chlorine air o Buffer/car terpapar uap asam o Car lama • Penyebab deviasi warna biru: o Cat/buffer terlalu basa o Buffer cat kurang o Waktu pengecatan kurang o Pencucian kurang o Pengeringan singkat o Air terlalu basa o Hapusan terlalu tebal o Hapusan lama, protein abnormal o Antikoagulan heparin o Lekositosis dengan blast • Masalah yang dihadapi: o Fiksasi: § Fiksasi kurang adekuat à lepas pada pencucian à morfologi berubah § Kontaminasi air à artefak pada pengeringan § Pengeringan minimal 5 menit § Fiksasi minimal 1 menit § Metanol harus anhydrous dan chemically pure o Pengecatan: § Campuran car-‐buffer waktunya terbatas § Air kran tidak untuk campuran buffer § Aquades sering ada kontaminan § Deionized water menyerap CO2 à terlalu asam § Lama pengecatan minimal 2 x lama fiksasi o Pencucian: § Sebaiknya pakai aquadest atau buffered rinse water § Pencucian kurang adekuat à warna biru atau presipitat o Pengeringan: § Pengeringan di udara adalah cara terbaik § Mempercepat pengeringan secara paksa à waktu paparan car dengan air pencuci memendek à intensitas warna terganggu
- 8. CAT GIEMSA A. Alat dan Bahan • Giemsa 1 gr à encerkan dengan buffer 4-‐5 kali volume cat • Metanol 100 ml • Panaskan 50°C/15 menit (sesekali dikocok) à saring • Larutan buffer: buffer air B. Cara Kerja: • Fiksasi hapusan kering dengan metanol • Tuangi hapusan dengan cat giemsa • Biarkan 20-‐30 menit • Cuci dengan buffer air atau air biasa • Keringkan hapusan dengan memiringkan pada satu sisi CAT WRIGHT A. Alat dan Bahan • Cat wright B. Cara Kerja • Hapusan darah kering difiksais dengan meneteskan cat wright menutupi rata hapusan darah selama 2 menit • Lanjutkan dengan meneteskan larutan buffer sama atau 1,5 kalinya di atas cat wright • Campurkan car dan buffer dengan meniup-‐niup di atasnya sampai timbul warna metalik à tunggu 20 menit • Cuci hapusan dengan air/aquades di atas hapusan pada posisi hapusan pada posisi hapusan mendatar sampai seluruh lapisan cat hanyut tercuci • Keringkan hapusan darah dengan memiringkannya pada satu sisi di atas kertas penghisap III. Hitung Jenis Leukosit Hitung jenis leukosit dilakukan dengan mengamati dan mengidentifikasi paling sedikit 100 leukosit dengan obyektif 100 x dengan minyak imersi, kemudian dikelompokkan sebagai berikut: • Eosinofil à granula kasar berwarna merah • Basofil à granula kasar berwarna biru yang kadang menutupi inti (sangat jarang) • Stab neutrophil à inti ada cekungannya tapi belum ada penyempitan, sitoplasma mengandung granula • Segmen neutrophil à inti sudah ada penipisan, sitoplasma mengandung granula • Limfosit à inti bulat hampir memenuhi sel dan tidak mengandung cekungan, sitoplasma tidak bergranula
- 9. • Monosit à inti ada cekungannya, sitoplasma tidak bergranula Harga normal • Eosinofil (0-‐5%) • Basofil (0-‐1%) • Stab (0-‐1%) • Segmen (50-‐60%) • Limfosit (20-‐40%) • Monosit (3-‐11%) Yang perlu diperhatikan: • Penghitungan dilakukan pada counting area. • Dari hasil hitung jenis dapat ditemukan: o Eosinofilia à infeksi parasit o Limfositosis o Limfopenia o Monositosis o Shift to the left: § Jika ditemukan peningkatan promyelosit, myelosit, metamyelost dan stab à curiga infeksi bacterial § Jika ditemukan peningkatan myeloblast, promyelosit, myelosit, metamyelost dan stab à curiga leukemia o Shift to the right: § Ditemukan 1 leukosit dengan segmen >5 à hipersegmentasi, atau § Ditemukan 5 leukosit dengan 5 segmen § Curiga anemia megaloblastik (hipersegmentasi neutrophil, sel oval-‐makrosit) IV. Hitung jenis retikulosit Retikulosit/polikromatofilik cell: • Eritrosit muda tidak berinti • Mengandung sisa ribosom dan RNA yang bereaksi dengan car Brilliant Cressyl Blue 9VCB) atau New Methylene Blue (NMB) membentuk presipitat granul/filamen berwarna hijau biru • Reaksi terjadi pada eritrosit hidup (belum difiksasi = supravital) • Karena lebih muda, ukurannya lebih besar dari eritrosit • Tidak ada central pallor • Kondisi anemia hemolitik dan perdarahan • Nilai normal: 0,5-‐1,5% A. Prinsip: • Darah + cat supravital • Hitung jumlah retikulosit di samping 1000 eritrosit • Dinyatakan dalam persen atau permil
- 10. B. Alat dan Bahan: • Darah EDTA • BCB (brilliant cressyl blue) • Tabung reaksi • Pengaduk • Mikroskop • Minyak emersi C. Cara Kerja • Mencampur 2 tetes darah EDTA atau lebih dengan cat BCB dengan perbandingan 1:1. Untuk pasien anemi, 2 darah: 1 BCB • Membuat sediaan kering. • Membuat hapusn darah dari campuran darah-‐BCB • Mengeringkan haousan dan mengamati di bawah mikroskop menggunakan minyak imersi D. Yang harus diperhatikan: • Kalkulasi: o Hitung 1000 eritrosit dan catat berapa retikulosit yang dijumpai o Hati2, bedakan dengan benda inklusif HbH. Granula trombosit dan leukosit tercat juga à sering dikelirukan dengan retikulosit o Angka kesalahan à >25% o %retikulosit: jumlah retikulosit/jumlah eritrosit x 100% • Pada anemia didapat bias dalam penghitungan retikulosit karena umlah eritrosit relatif rendah sehingga jumlah retikulosit yang terhitung relatif tingi sehingga perlu dikoreksi. o Corrected Retic à %retik x PCV penderita/PCV normal o PCV normal laki2: 50%, wanita: 40% • Pada kondisi tertentu, corrected retic masih belum menggambarkan eritropoeisis karena pengaruh shift retic (retik yang berada di darah tepi lebih lama sebelum menjadi eritrosit yang matur). Besarnya shift sebanding dengan rangsangan eritropoitin. • Koreksi: o Retic prod index = corrected retic count/maturation time PRAKTIKUM 3 : Evaluasi Hapusan Darah Tepi à dengan preparat hapusan darah tepi yang sudah diwarnai dengan pewarnaan Giemsa I. Pemeriksaan dengan Obyektif 10x • Penilaian mutu hapusan darah: o Lapisan darah cukup tipis à eritrosit dan leukosit saling terpisah o Jangan ada endapan cat o Sel2 tercat dengan baik o Leukosit tidak menggerombol di bagian ekor • Penaksiran jumlah leukosit, kesan hitung jenis, dan ada/tidak sel2 abnormal
- 11. o Penaksiran leukosit dilakukan pada counting area, tergantung dari jenis mikroskop yang dipakai (ukuran Field Number/FN) o Untuk FN-‐18 à bila jumlah leukosit per lapangan pandang sekitar 15-‐ 25 à NORMAL o Untuk FN-‐22 à bila jumlh leukosit per lapangan pandangan sekitar 22-‐50 à NORMAL o Kesan hitung jenis leukosit dapat dilakukan dengan mengamati beberapa lapangan pandang hapusan. II. Pemeriksaan dengan Obyektif 100 x dengan minyak imersi • Eritrosit: o Ukuran: bandingkan dengan inti limfosit kecil, hasil: normositik/mikrositik/makrositik o Warna: bandingkan diameter central pallor dengan diameter eritrosit, hasil: normokromik (diameter central pallor 1/3 dari diameter eritrosit), hipokromik (diameter central pallor >1/3 dari diameter eritrosit dan warna pucat), anisokromia (terdapat eritrosit dengan warna berbeda-‐beda), anisopoikilositosis (ada eritrosit yang ukurannya berbeda dan bentuknya abnormal), anisositosis (ada eritrosit yang ukurannya berbeda-‐beda), poikilositosis (bentuk berbeda-‐beda) o Bentuk: § Ovalosit § Sferosit (eritrosit bundar, tidak bikonkaf) § Drepanosit (sickle cell) § Schistosit/fragmentosit/keratosit § Sel helmet § Bite cell § Stomatosit (central pallor seperti celah dan eritrosit berbentuk seperti mangkuk) § Sel target/codocyte (central pallor hitam) à kelainan pada hepar § Tear drop cell/dacryocyte (pada thalassemia dan anemia) § Echinosit (seperti bulu babi, kalau bikin hapusannya kelamaan à krenasi) § Akantosit (eritrosit dengan taju2 yang tidak beraturan panjangnya) § Leptocyte (central pallor besar dan eritrosit gepeng) o Benda inklusi: § Normoblast § Howell-‐Jolly bodies (sisa inti) § Basophilic stippling à bintik2 inklusi basofilik, hasil agregat dari ribosom, mencolok pada keracunan timah) § Cincin dari Cabot § Heinz bodies (partikel presipitat Hb, tanda kerusakan oksidatif eritrosit) § Granula siderotik (pappenheimer) à mengandung besi
- 12. § Parasit malaria (plasmodium) § Rouleaux (stack of coins) § Otoaglutinasi o Bila dijumpai normoblast (eritrosit berinti, mirip limfosit) dalam jumlah cukup banyak >10 dalam 100 leukosit, perlu dilakukan koreksi terhadap hasil hitung leukosit. Jumlah normoblast dalam 100 eritrosit dinyatakan dalam N. o Koreksi leukosit = 100/ (100+N) x Hit. Leukosit • Leukosit: o Dapat dilakukan hitung jenis leukosit o Perhatikan leukosit imatur. § Shift to the left § Shift to the right o Perhatikan: § Anemia megaloblastik: sel oval makrosit, hipersegementasi neutrophil § Anomali Pelger-‐Huet: kegagalan segmentasi herediter à inti <2, kromatin padat menggumpal. § Granula toksik: granula kasar, gelap à pada infeksi bakteri § Vakuola: sering dijumpai pada infeksi bajteri, bersama granula toksik menunjukkan tanda2 degenerasi neutrophil § Auer rod: benda inklusif parologik, batang, merah, agregat dari lisosom, tunggal/multiple pada sitoplasma sel mieloblas atau monoblas à pada pasien AML § Dohle bodies: inklusif oval, kebiruan, tunggal atau banyak berasal dari RNA, sering pada infeksi berat, khemoterapi atau adanya perubahan2 toksik dan kelainan leukosit kongenital (May-‐Hegglin, Chediak-‐Higashi) § Sel Limfosit Atipik à pada infeksi virus • Trombosit: o Memperkirakan jumlah trombosit § Pada mikroskop FN-‐18: jumlah trombosit/mm3 à jumlah trombosit dalam 18 LP x 1000. Normal: 8-‐25 trombosit/LP § Pada mikroskop FN-‐22: jumlah trombosit/mm3 à jumlah trombosit dalam 11 LP x 1000. Normal: 13-‐40 trombosit/LP o Memperhatikan morfologi trombosit; adanya mega/giant platelet, menunjukkan turn over trombosit yang meningkat misalnya pada perdarahan. o Membedakan giant platelet dengan sferosit? Sferosit: batas lebih jelas dan warnaya mirip eritrosit. Giant platelet: lebih bercak2 dan warnanya mirip platelet. CARA MELAPORKAN EVALUASI HDT: contoh à • Eritrosit: o Hipokromik, anisopi=oikilositosis o Polikromasi (+) à ditemukan retikulosit
- 13. o Sel target (+) o Normoblas (+) • Leukosit: o Kesan jumlah meningkat, didominasi oleh sel2 PMN (neutrophil) bergranula toksik, tampak sel muda • Trombosit: o Kesan jumlah meningkat, giant thrombocyte (+) Complete Blood Count: • Sysmex KX-‐21 • Cell-‐Dyn Rubi Yang perlu diperhatikan: (laki2) • White blood cell, normal: 4.800-‐10.800 o Kurang: leukopenia o Lebih: leukositosis, leukimia • Red blood cell, normal: 470.000-‐610.000 o Kurang: anemia, thalassemia, defisiensi G6PD o Lebih: polisitemia • Hb, normal: 14-‐18 o Lebih: polisitemia • HCT (hematocrit), normal: 42-‐52% o Lebih: viskositas meningkat, LED menurun • MCV (mean corpuscular volumeàrata2 ukuran volume sel), normal: 80-‐94 o Makrositik o Normositik o Mikrositik • MCH (mean corpuscular haemoglobin) à kandungan hb rata2 dalam 2 eritrosit, normal: 27-‐31 • MCHC (mean cell haemoglobin concentration à kadar hb rata2 dalam 1 eritrosit, normal: 30-‐35 o Hipokromik o Normokromik o Hiperkromik • PLT (platelet), normal: 150.000-‐45-‐.000 o Kurang: trombositopenia o Lebih: trombositosis • RDW-‐CV (red cell distribution width à variasi RBC), normal: 11,5-‐14,5 • PDW (platelet distribution width), normal: 9-‐13 • MPV (mean platelet volume), normal: 7,2-‐11,1 o Lebih: giant platelet • P-‐LCR (platelet large cell ratio), normal: 15-‐25 o Lebih: giant platelet • Neutrophil • Lymphocyte • LED, normal: 0-‐15
- 14. PRAKTIKUM 5: pemeriksaan LED, PCV, Rumple Leed, Bleeding Time, Clotting Time I. Laju Endap Darah Metode Westergren A. Prinsip: Menghitung kecepatan pengendapan eritrosit dalam plasmanya. Satuan: mm/jam. B. Alat dan Bahan: • Tabung kosong • Tabung Westergren, skala 0-‐200 mm • Darah EDTA : NaCl à 4:1, ATAU Darah tanpa pengenceran : Na Sitrat à 4:1 • Bola hisap • Rak C. Cara Kerja: • Hisap NaCl sampai angka 50 dengan tabung westergren dan bola hisap kemudian masukkan ke dalam tabung kosong. • Hisap darah EDTA sebanyak 200 mm dengan tabung westergren dan bola hisap kemudian masukkan ke dalam tabung yang sebelumnya sudah diisi dengan NaCl. • Campur darah EDTA dan NaCl dengan menggunakan pompa. • Hisap campuran darah dan NaCl tersebut dengan menggunakan tabung westergren sebanyak 200 mm kemudian letakkan vertikal di rak. • Biarkan pada suhu kamar, baca setelah tepat 1 jam. D. Yang perlu diperhatikan: • Dalam mengambil darah menggunakan tabung westergren tidak boleh lebih. Kalau kurang, perhitungan disesuaikan. • Berhati2 saat memasang tabung pada rak, tekankan tabung bagian bawah dengan karet sedemikian rupa baru tutup bagian atasnya. Jangan sampai darah tumpah2. • Tahap sedimentasi darah: o Tahap pembentukan rouleaux à dipengaruhi oleh bentuk. Kalau sferosit (darah yang sudah diambil >2 jam), pembentukan endapan lebih lama, LED menurun. o Tahap sedimentasi cepat à dalam 1 jam pertama. § Dipengaruhi oleh viskositas. Makin kental, makin lambat turunnya § Dipengaruhi oleh protein (albumin, globulin, fibrinogen) à eritrosit muatannya negatif sehingga tolak menolak dan rouleaux sulit terbentuk. Dengan bantuan proein yang mempengaruhi muatan eritrosit, rouleaux jadi lebih mudah terbentuk. o Tahap sedimentasi lambat à jam berikutnya. • Faktor2 yang mempengaruhi LED: o Eritrosit: jumlah, ukuran, bentuk o Plasma: protein di dalamnya
- 15. o Tehnik: tehnik sampling, panjang dan diameter tabung, posisi tabung, suhu kamar, ekses antikoagulan, darah beku sebagian, darah >2 jam o LED meningkat pada: keradangan, infeksi, keganasan, myeloma multiple, leukemia, keracunan logam, anemia II. Hematokrit/PCV metode mikrohematokrit A. Prinsip: Penentuan proporsi packed red cells terhadap volume darah total setelah pemusingan. Satuan: % atay L/L B. Alat dan Bahan: • Darah EDTA atau darah kapiler sebanyak 1 ml • Tabung kapiler • Alat sentrifuge • Sealer C. Cara Kerja: • Hisap darah sampai ¾ tabung microhematocrit • Tutup dengan plastisin beberapa kali. • Sentrifuge dengan kecepatan 10.000-‐15.000 rpm selama 3-‐5 menit. • Baca hasilnya dengan grafik kontrol D. Yang perlu diperhatikan • Darah yang digunakan tidak boleh terbentuk clot karena dapat membuat eritrosit terperangkap • Darah yang digunakan tidak boleh lisis karena jika terjadi lisis, yang lisis tidak hanya eritrosit namun leukosit juga sehingga tidak representatif • Nilai normal HCT: o Pria: 40-‐54% o Wanita: 37-‐47% • Tabung biru: sudah dibasahi anti koagulan • Tabung merah: harus pakai darah EDTA • Saat sentrifuge, seal harus diletakkan di LUAR, jangan terbalik nanti darahnya hilang semua. • Faktor kesalahan: o Ekses antiokoagulan à eritrosit mengkerut à PCV menurun o Sampel darah kurang homogen karena pengocokan kurang o Kecepatan dan lama pemusingan tidak tepat o Trapped plasma: pada sferositosis, anemia makrositik, thalassemia dan anemia hipokromik • Cara membaca grafik: o Letakkan tabung yang sudah disentrifuge pada grafik kontrol secara vertikal o Letakkan perbatasan antara darah dan plastisin pada skala 0
- 16. o Geser tabung sampai meniscus plasma yang berwarna bening tepat berada pada skala 100 o Lihat perbatasan antara darah dan meniscus plasma dan bacalah HCT pada darah tersebut. III. Bleeding Time (Duke method) A. Prinsip • Waktu yang terukur sejak timbulnya sampai berhentinya pendarahan dari luka standar yang dibuat pada kuliy à sampai terbentuknya sumbat trombosit (platelet plug) • Bleeding time adalah cara untuk mengukur fungsi vaskular, jumlah serta fungsi trombosit • Metode pemeriksaan: o Duke o Ivy/template B. Alat dan Bahan • Alcohol swab • Blood lancet • Kertas saring • Stopwatch C. Cara kerja • Desinfeksi cuping telinga dengan alcohol swab • Tegangkan cuping, tusuk dengan lancet steril tegak lurus pada tepi bawah cuping • Bila darah mulai nampak, jalankan stopwatch dan catat waktunya • Tiap 30 detik selanjutnya, hisap tetesan darah dengan kertas saring (tapi jangan sampai menyentuh kulit karena dapat mengaktivasi faktor koagulasi jalur ekstrinsik) sampai tidak ada lagi bercak darah pada kertas saring. • Catat waktu berhentinya perdarahan sebagai masa perdarahan, atau dengan menghitung jumlah bercak darah pada kertas saring dan mengalikannya dengan 30 detik. D. Yang perlu diperhatikan • Hati2 pada trombositopenia, perdarahan sukar berhenti dan bleeding time meningkat. • Pada bleeding time yang meningkat, lanjutkan dengan pemeriksaan agregasi trombosit • Normal bleeding time: 1-‐9 menit IV. Rumple Leed Test A. Prinsip Digunakan untuk mengetahui kelainan:
- 17. • Vaskuler (resistensi kapiler) • Trombosit (terutama jumlahnya) • Pada trombositopenia tes ini sering positif • Visa positif walaupun bleeding time nya normal B. Alat dan Bahan • Tensimeter • Stetoskop C. Cara Kerja • Pasang tekanan tensimeter antara sistol dan diastole (maksimal 100 mmHg) • Pertahankan selama 5 menit • Setelah 5 menit, lepaskan bendungan, hitung ptechiae pada 5 cm di bawah fossa cubiti dalam lingkaran diameter kurang lebih 5 cm. • Tunggu 10 menit lagi, hitung ptechiae pada bagian volar dan dorsal dari regio antebrachii V. Clotting Time A. Prinsip: Menentukan waktu yang diperlukan darah untuk koagulasi à untuk mengetahui fungsi jalur koagulasi intrinsik. B. Alat dan bahan: • 3 tabung kosong • 3 ml darah tanpa EDTA • Stopwatch C. Cara kerja • Ambil 3 ml darah vena (aktifkan stopwatch saat darah tampak masuk ke pangkal jarum à HARUS CEPAT), kemudian bagi ke dalam 3 tabung masing2 1 ml • Inkubasi tabung pada 37° C dengan cara digenggam selama 4 menit. • Tiap 30 detik kemudian miringkan ketiga tabung, perhatikan tabung mana yang sudah tampak membeku kemudian catat waktunya • Setiap 30 detik berikutnya, miringkan 2 tabung sisanya dan perhatikan tabung mana yang sudah membeku kemudian catat waktunya • Setiap 30 detik selanjutnya miringkan dan perhatikan tabung terakhir, bila sudah tampak membeku, catat waktunya • Ambil rata2 I+II+III • Normalnya: 5-‐15 menit VI. Clot Retraction à demo A. Prinsip:
- 18. • Mengukur kemapuan bekuan darah untuk melakukan retraksi (mengkerut) à sehingga lepas dari dinding tabung dan menghasilkan serum. • Normal: 2 jam setelah membeku terjadi retraksi sebagian dan 24 jam setelah membeku terjadi retraksi lengkap. VII. Tes Lisis Bekuan A. Prinsip: • Hasil tes retraksi bekuan setelah inkubasi selama 24 jam kemudian dilanjutkan untuk melihat terjadinya lisis bekuan. • Lisis positif bila tampak serum menjadi berwarna kemerahan. Lisis sempurna terjadi setelah inkubasi selam 48 jam. PRAKTIKUM 6: Penentuan Golongan Darah ABO, Tes Serologi HIV dan HBsAg I. Penentuan Golongan Darah ABO (Forward Grouping/Cell Grouping) A. Prinsip Menentukan antigen bahan yang diperiksa. B. Alat dan Bahan: • Bahan: sel darah merah (bisa darah kapiler atau darah vena) • Reagen: anti A, anti B, anti AB C. Cara Kerja: • Gelas obyek diberi tanda • Anti sera 1 tetes (di bagian atas) • Sel darah 1 tetes (tepat di bawahnya anti sera) • Dicampur dengan pengaduk • Lihat aglutinasinya D. Yang perlu diperhatikan: • Darah O: tidak terjadi aglutinasi dengan semua antisera à karena punya antibodi tapi tidak punya antigen à genotip dominan: OH OH atau OH Oh • Darah O bombay: genotip resesif : Oh Oh • Darah B: terjadi aglutinasi dengan antisera B à karena punya antigen B dan antibodi A • Darah A: terjadi aglutinasi dengan antisera A à karena punya antigen A dan antibodi B • Darah A1 à aglutinasi dengan anti A dan aglutinasi dengan anti A1 • Darah A2 à aglutinasi dengan anti A tapi tidak terjadi aglutinasi dengan anti A1 • Darah AB: terjadi aglutinasi dengan à karena punya antigen A, B dan tidak punya antibodi II. Penentuan Golongan Darah ABO (Serum Grouping/Reverse Grouping)
- 19. A. Prinsip: Menentukan antibodi bahan yang diperiksa B. Alat dan Bahan: • Bahan: plasma/serum • Reagen: suspensi sel A 3%, suspensi sel B 3% • Tabung • Pipet pasteur • Gelas obyek • Centrifuge • Mikroskop C. Cara kerja: • Masukkan masing2 2 volume plasma yang akan diperiksa ke dalam 2 tabung • Tambahkan 1 volume suspensi sel A ke tabung 1 dan tambahkan 1 volume suspensi sel B ke tabung 2 • Campur baik-‐baik bahan pada kedua tabung • Biarkan pada suhu kamar selama 5 menit • Pusingkan dengan kecepatan 1000-‐1500 rpm selama 1-‐2 menit • Bila negatif, campur pelan2 dan lihat: o Aglutinasi o Mikroskopis o Mikroskopis D. Yang perlu diperhatikan: • Darah O: aglutinasi dengan suspensi A dan suspensi B • Darah A: aglutinasi dengan suspensi B • Darah B: aglutinasi dengan suspensi A • Darah AB: tidak terjadi aglutinasi dengan suspensi A dan suspensi B • Hasil forward dan reverse grouping bisa berbeda karena: o Antibodi lemah: pada newborn, orangtua, hipergamaglobulinemia dan penderit imunodefisiensi o Antigen lemah: subgroup A atau B, penyakit hodgkin’s, leukemia o Protein/plasma abnormal o Dll III. Tes Serologi HIV A. Prinsip • Ikatan antigen-‐antibodi menyebabkan reaksi pada reagen warna sehingga terjadi perubahan warna yang bisa dilihat dengan mata telanjang. • Perubahan warna tersebut tampak sebagai garis berwarna pada alat penguji. • Positif: tampak 2 garis yakni pada area tes (T1 atau T2) dan 1 garis di area kontrol. • Negatif: tampak 1 garis pada area kontrol saja
- 20. • Invalid: tidak nampak garis pada area kontrol • HIB 1.2/) Tri-‐Line Human Immunodeficiency Virus Rapid Test terdiri dari T1 test line (dicoated dengan antigen HIV1), T2 test line (dicoated dengan antigen HIV2) dan control line • Antigen yang terdapat pada test line akan mengikat antibodi yang ada di dalam darah sampel dan menyebabkan perubahan warna B. Cara Kerja: • Keluarkan tes dari pembungkusnya dan letakkan di tempat yang bersih dan permukaan yang rata • Sampel (plasma/serum) diteteskan 1 tetes pada tempat sampel kemudian ditambahkan 1 tetes buffer pada tempat yang sama. • Kalau memakai sampel whole blood sampel diteteskan 2 tetes pada tempat sampel kemudian ditambahkan 2 tetes buffer pada tempat yang sama. • Biarkan 10 menit kemudian dibaca hasilnya. • Jangan membaca hasil tes lebih dari 20 menit setelah sampel diteteskan. IV. Tes HBsAg Rapid Test (ICT) A. Prinsip • Dengan imunokromatografi dan merupakan pemeriksaan kualitatif untuk mendeteksi Hepatitis B Surface Antigen • Sampel: serum atau plasma • Test line dicoated dengan anti HBsAg, yang nantinya akan mengikat HBsAg dari sampel yang akan diperiksa B. Cara Kerja • Keluarkan strip tes dari pembungkusnya dan biarkan pada suhu kamar sebentar namun tidak boleh lebih dari 1 jam. • Celupkan strip tes ke dalam tabung berisi sampel serum atau plasma selama 10-‐15 detik dengan tanda panah mengarah ke bawah, jangan melewati tanda batas maksimum • Letakkan strip tes di tempat yang rata, hasil dibaca setelah 15 menit PRAKTIKUM 7: URINE Yang harus diperhatikan: • Urine terbaik: sampel urine segar pagi (karena pekat), tidak boleh lebih dari 1 jam dengan cara pengambilan porsi tengah (supaya pemeriksaan tidak bias karena adanya flora normal). o Urine sesaat: urine acal o Urine pagi: paling baik karena volume dan osmolaritas seragam ,pekat dan pHnya rendah o Urine segar: <1 jam dari penampungan o Urine post prandial: 1,5-‐3 jam setelah makan
- 21. o Urine 24 jam: seseorang diminta berurine pukul 6 pagi kemudian pada jam 6 pagi berikutnya urine ditampung. • Jika urine terlalu lama disimpan: o Terjadi perubahan sel/susunan kimia o Tidak steril: timbul bakteri o Ureum sudah berubah menjadi amonia dan menyebabkan urine menjadi lebih basa o Torak rusak o Pada glukosuria: kadar glukosa menurun sehingga dapat menimbulkan hasil negatif palsu. • Jika urine tidak dapat langsung diperiksa, dapat diawetkan I. Pemeriksaan Fisik Urine • Jumlah urine per 24 jam: o Dewasa: 600-‐1600 ml § Anuria: 100 ml § Oliguria: 100-‐600 ml § Poliuria: >1600 ml • Warna urine: o Urine normal: kuning muda, tergantung jumlah urine yang dikeluarkan o Encer: pucat o Pekat: lebih tua o Kuning coklat seperti teh: bilirubin (gangguan fungsi liver) o Merah coklat: urobilin, porpirin o Merah dengan kabut coklat: darah dan pigmen darah o Coklat hitam: melanin o Hitam: asam homogentisik • Kejernihan: o Jernih o Hazy: sedikit putih o Cloudy: berkabut o Turbid: keruh • pH à kontrol untuk infeksi ginjal o normal: 4,8-‐7,5 • Buih: o Buih putih: akibat pengocokan urine o Buih banyak: proteinuria o Buih kuning: pigmen bilirubin dari empedu à coba cek metabolisme bilirubin ya siapa tau ditanya o Buih palsu: wadah berdetergen • Bau: o Urine segar: tidak keras, sedikit aromatis, dipengaruhi makanan o Bau manis: diabetes mellitus o Bau amonia: gangguan fungsi liver o Bau busuk: infeksi o Bau aseton: ketosis
- 22. • Berat jenis à normal: 1,001-‐1,035 • Prinsip dan cara kerja: o Jumlah: urine diukur o Warna: warna urine dilihat o Kejernihan: diamati o pH: dengan kertas lakmus o Buih: kocok urin, amati o Bau: dicium aroma urine o Berat jenis § Urometer: hukum Archimedes • Kaliberasi urometer dengan aquades, misal B.J: 1,002, maka faktor koreksi= 0,002. Bert jenis urine yang terbaca: 1,012. Berat jenis urine sesungguhnya: 1,012-‐ 0,002= 1,010 • Isi gelas ukur dengan urine ¾ penuh (letakkan di tempat datar dan hilangkan buih dengan kertas saring atau tambah 1 tetes eter) • Masukkan urometer, putar pada sumbunya, jangan menyentuh dinding dan dasar gelas ukut • Baca meniscus o Misal suhu kamar=30° C dan pada urometer= 15° C. Maka, berat jenis urine= (30/15)/3 x 0,001 + 1,010 = 1,015 o Koreksi pengenceran à 2 angka terakhir x besar pengenceran, maka berat jenis urine= 1,030 § Refraktometer: indeks refraksi § Carik celup: adanya kation II. Pemeriksaan Kimia Urine • Carik celup: urine segar, tunggu 1 menit o Prinsip: § Merupakan secarik plastik yang dilekati dengan kertas isap yang mengandung reagen spesifik terhadap zat yang aka diperiksa. Bila dalam urine mengandung zat yang akan diperiksa maka akan terjadi perubahan warna. o Cara kerja: § Masukkan urine ke dalam tabung sampai setinggi strip § Celupkan strip ke dalam tabung yang berisi urine selama 1 detik § Lihat perubahan warna dan bandingkan dengan warna standar
- 23. • Percobaan protein rebus: protein dalam urine suasana asam lemah, bila dipanaskan akan denaturasi dan muncul endapan. Merupakan pemeriksaan semikuantitatif. o Alat dan Bahan: § Spesimen urine § Tabung reaksi § Penjepit § Pipet § Asam asetat 6% § Pemanas spiritus § Kertas saring o Cara kerja: § Pipet urine 3 ml ke dalam tabung reaksi, saring § Jepit tabung, bakar di spirtius hingga mendidih § Tetesi 2-‐3 tetes asam asetat 6% § Didihkan kembali § Amati urine dalam tabung o Keterangan: § (-‐) tetap jernih § (+) kekeruhan minimal (,001-‐0,05 gr/dL) § (++) kekeruhan nyata ada butir2 halus (0,05-‐0,2 ge/dL) § (+++) gumpalan2 nyata (0,2-‐0,5 gr/dL) § (++++) gumpalan2 besar yang sudah membeku (>0,5 gr/dL) • Percobaan glukosa urine o Prinsip: tetesi dengan reduktor fehling. CuSO4 dalam suasana alkali akan tereduksi, jadi CuSO4 warna merah bata o Alat dan bahan: § Spesimen urine § Tabung reaksi § Penjepit § Pipet § Fehling A + B § Pemanas spiritus o Cara kerja: § Coba reagen dahulu, ambil 2 ml fehling A dan 2 ml fehling B ke dalam satu tabung kemudian panaskan sampai mendidih. Bila tidak terjadi perubahan warn berarti reagen baik. § Teteskan 1 ml urine ke dalam tabung § Teteskan Fehling A+B masing2 2 ml ke dalam tabung yang sudah berisi urine § Panaskan tabung hingga mendidih § Amati perubahan warna • Percobaan Gula Darah (POCT) o Prinsip: mengetahui kadar gula darah praktis tapi kunag peka
- 24. o Alat dan bahan: § Lancet steril § Alat tes § Strip § Kapas alkohol o Cara kerja: § Siapkan alat tes dan strip § Strip harus sesuai dengan yang tertera pada barcode tabung tempat strip § Bersihkan jari pasien dengan kapas alkohol § Tusu dengan lancet, bersihkan tetes darah yang keluar pertama, ambil tetes kedua, taruh pada strip § Masukkan strip pada alat dan tunggu hasil PRAKTIKUM 8: Sedimen urine dan Tes Rivalta I. Sedimen Urine A. Prinsip: • Urine dicampur bail/merata • Harus selalu segar, jika urine tidak dapat langsung diperiksa: o Urine disimpan dalam refrigerator (kurang lebih 1 jam) o Pengawet: formalin, toluene • Urine pagi porsi tengah • Tempat/botol yang bersih • Hindarkan kontaminasi dengan bahan2 seperti sekret vagina B. Cara Kerja • Masukkan 10-‐12 ml urine ke dalam tabung komikal dan campur urine sampai rata • Pusingkan dengan kecepatan 1500-‐2000 rpm selama 5 menit • Buang supernatant secara pelan-‐pelan supaya sedimen tertinggal • Sisa kurang lebih 1 ml resuspensi o Tanpa pewarnaan: langsung teteskan di object glass, tutup dengan cover glass o Dengan pewarnaan: teteskan pewarna sedi stain sebanyak 2 tetes, tunggu 10 menit, teteskan di object glass dan tutup dengan cover glass • Amati di bawah mikroskop dengan: o Kondensor diturunkan o Diafragma dikecilkan o Sinar minimal • Laporkan perhitungan konstituen sedimen (semi kuantitatif) C. Yang perlu diperhatikan • Sedimen: unsur organik dan non organik
- 25. • Unsur organik: epitel, oval fat bodies, leukosit, eritrosit, silinder, spermatoxoa, parasit, bakteri, spora dan pseudoyphae • Unsur anorganik: o Kristal normal § pH asam; asam urat, natrium urat, kalsium sulfar § pH asam/netral: kalsium oksalat § pH basa/netral: tripel fosfat § pH basa: kalsium karbinat o Kristal abnormal: sistein, leusin, kolesterol, tirosin, bilirubin o Kristal obat: sulfonamide o Bahan amorf: fosfat, urat II. Tes Rivalta A. Prinsip • Transudat: o Tidak berwarna/kuning muda/serous/jernih/keruh o Berawan/agak keruh o Hilang, tidak ada endapan o Bukan karena infeksi o Kadar protein rendah • Eksudat: o Tidak berwarna/serous/purulent/milky/cloudy (pada keganasan) o Berbau = infeksi/keganasan o Terbentuk endapan o Cepat turun ke dasar o Kadar protein tinggi B. Cara kerja • Campurkan 100 ml aquades dengan 0,1 ml asam cuka glasial ke dalam tabung • Periksa dengan indikator pH hingga pH 4-‐5 • Teteskan sampel dan identifikasi