laboratory

1. Pembentangan Latihan
Praktikal
ESPEK RESEARCH AND ADVISORY SDN
BHD
PENYELIA UKM: DR NURUL YUZIANA BT MOHD YUSOF
PENYELIAAGENSI: PN AKMA LIZA BT AHMAD MANSOR
ANNA FIRA BT AHMAD FIZAL
A145750

2. LATAR BELAKANG
SYARIKAT
• Estet pekebun kecil sdn bhd (ESPEK) adalah milik
penuh oleh syarikat RISDA (Rubber Industry Small
Holders Development Authority)
• Anak syarikat ini telah bermula pada tahun 1995
• ESPEK menawarkan perkhidmatan penganalisisan
sampel tanah, baja dan juga daun.
• ERAS mempunyai kelengkapan peralatan makmal yang
serba lengkap dan moden seperti ICP, buchi distillation
unit, AAS etc.

3. Bahagian unit-unit makmal
Unit-unit
makmal
Makmal tanah Makmal baja Makmal daun Makmal mikrob

4. Makmal analisis tanah
Pendaftaran
sampel
Pengeringan
sampel dan
pengisaran
Analisis
sampel

5. Langkah penganalisan
sampel
Langkahanalisissampeltanah
Penentuan nilai pH
Penentuan jumlah
fosforus
Penentuan kapasiti
penukaran kation dalam
tanah
Penentuan fosforus
tersedia
Penentuan unsur mikro
Penentuan kelembapan

6. Penentuan jumlah fosforus
(total P)

7. 1.0 g sampel tanah
ditimbang dan
dimasukkan ke dalam
tiub pencernaan
3 ml reagen ditambah
ke dalam sampel (asid
perklorik + asid
sulfurik)
Sampel dibiarkan
semalaman
Sampel dimasak pada
suhu 180ᵒc selama 1
1
2
jam dii atas digestion
block system
Suhu ditingkatkan
sehingga 260ᵒc dan
dimasak sehingga 2
jam
Sampel dibiarkan
sejuk dan ditambah
sedikit air suling
Goncang sampel
menggunakan vortex
Make up sampel
sehingga ke paras
yang ditetapkan
Tiub ditutup dengan
parafilm dan
digoncang dan dituras
dalam plastik vail

8. Penentuan fosforus tersedia
(available P)

9. 2 g sampel tanah
ditimbang
20 ml larutan
pengekstrakan
Sampel digoncang
selama 30 min
Sampel dituras ke
dalam plastik vail

10. Penyediaan reagen A , B, C
1. Larutan pewarnaan Molybdenum
i. Reagen A = asid sulfurik + ammonium molybdate+ potasium
antimony
12 g asid
molydate
dilarutkan
dalam air
suling
0.2908
potassium
antimony
148 ml asid
sulfurik
Larutan di
make up
sehingga 2
liter
1.32 g asid askorbik
ditimbang
250 ml reagen A
ii. Reagen B = asid askorbik
iii. Reagen C = reagen A+B

11. 2. Larutan pengekstrakan (soil extraction solution)
75 ml 2M
ammonia
fluorida
1000 ml 0.5 ml
HCI dalam 5 L
flask
Make up dengan
air suling

12. Data sampel

13. CARA PENYEDIAAN UNTUK BACAAN
Pipet sampel T/p & A/p
5ml
Setiap sampel + reagen C
sebanyak 8ml dan make
up
Larutan standard setiap ppm
+ reagen C dan make up
Sampel A/P dan T/P dibaca pada
uv-vis spectrofotometer pada 882
nm
bacaan penyerapan vs
nilai ppm (0-1.0 ppm)
direkod

14. • Sampel tanah yang telah dimasak ditentukan kandungan fosforus secara
kalorimetri dengan menggunakan kaedah MOLYBDENUM BIRU
kaedah molybdenum biru??
• kaedah Molybdenum adalah berdasarkan prinsip di mana di dalam larutan
asid molybdate mengandungi ortofosfat ion dan kompleks
phosphomolybdate ion yang boleh diturunkan oleh agen penurunan iaitu asid
askorbik dan ditukarkan kepada pewarnaan biru Molybdenum

15. MINI PROJEK
Pencirian dan pengenalpastian Lactobacillus
Acidophilus daripada sampel baja

16. Objektif kajian :
1. Untuk memencilkan dan mengenal pasti kehadiran
Lactobacillus acidophilus dari sampel baja
2. Pengenalpastian ciri-ciri LAB melalui kaedah
mikroskopik dan ujian biokimia

17. • Koloni dipencilkan pada nutrien agar
menggunakan kaedah inoculation method “piring
sebaran”
Pemencilan LAB
• Larutan yang digunakan kristal violet, larutan
Lugol’s, alkohol, safranin
Pewarnaan gram positif
• Sampel yang dilakukan pencairan 10−3
hingga
10−8
dicerap di bawah mikroskop dengan
magnifikasi 40x dan 100x
Pencirian morfologi
LAB secara
mikroskopik
• 50µl larutan hydrogen peroksida dititiskan ke
atas koloni yang dikenal pasti sebagai koloni
LAB
Ujian katalase
• 4g kalsium karbonat + 11.5g serbuk agar nutrien
dicampur dgn 500 ml air suling dan dipanaskan
pada suhu 121ᵒc selama 20 min
Ujian Kalsium
karbonat

18. Pencairan 𝟏𝟎−𝟑 𝟏𝟎−𝟒
𝟏𝟎−𝟓 𝟏𝟎−𝟔 𝟏𝟎−𝟕
𝟏𝟎−𝟖
A 14 11 8 8 5 2
B 10 8 8 6 3 1
C 13 11 7 5 4 3
PURATA 12 10 8 6 4 2
CFU/ml (12± 2.08)×103
(10±1.73)×104
(8±0.58)×105 (6±1.53)×106
(4±1.00)×107
(2±1.00)×108

19. Hasil pencerapan morfologi LAB secara mikroskopik
𝟏𝟎−𝟑
𝟏𝟎−𝟒
𝟏𝟎−𝟓 𝟏𝟎−𝟔 𝟏𝟎−𝟕
𝟏𝟎−𝟖
A 40x
100x
B 40x
100x
C 40x
100x

20. Hasil ujian katalase
Pencairan
sampel
(triplikat)
𝟏𝟎−𝟑
𝟏𝟎−𝟒
𝟏𝟎−𝟓 𝟏𝟎−𝟔 𝟏𝟎−𝟕
𝟏𝟎−𝟖
A + + + + + +
B + + + + + +
C + + + + + +
*Positif katalase (+) = terhasilnya buih gas oksigen
*Negatif katalase (-) = tiada tindak balas

21. Hasil ujian kalsium
karbonat
sampel
10−3
•Pembentuka
n zon jernih
Sampel
10−4
•Pembentukan
zon jernih
Sampel
10−5
•Pembentukan
zon jernih
Sampel
10−6
•Pembentukan
zon jernih
Sampel
10−7
•Pembentukan
zon jernih
Sampel
10−8
•Pembentukan
zon jernih
*Pembentukan “zon jernih” menunjukkan koloni yang
dipencilkan adalah bakteria jenis Laktobacillus Acidophilus
menghasilkan asid laktik

22. KESIMPULAN
Secara kesimpulannya, L.acidophilus berjaya dipencilkan
daripada sampel baja dan dikenal pasti melalui pewarnaan
gram, pencerapan mikroskopik, ujian katalase dan kalsium
karbonat.