esta bien

1. Prueba de la catalasa
Objetivo
Comprobar la presencia de la enzima catalasa
La enzima catalasa se encuentra en la mayoría de las bacterias aerobias y anaerobias
facultativas que contienen citocromos. (proteínas que participan en el
transporte de energía química). Su función es descomponer el peróxido de
hidrogeno, desprendiendo el oxigeno libre.
Se usa para diferenciar los siguientes géneros:
La catalasa (peróxido de hidrógeno oxidorreductasa)
descompone el peróxido de hidrógeno u oxida sustratos
secundarios
El peróxido de hidrógeno H2O2 es un producto final oxidativo de
la degradación aerobia de los azúcares

2. Procedimiento
Método en portaobjetos
Con un asa se toma una colonia y se deposita en un portaobjetos
(si el medio es agar sangre no se debe tocar con el asa el medio pues los hematíes
contienen catalasa). Añadir una gota de peróxido de hidrógeno al 30%
(no mezclar)
Observar la formación de burbujas (resultado positivo)
Método en tubo
Agregar 1ml de peróxido de hidrógeno al 3% directamente sobre un
cultivo en agar en pico de flauta
Observar la formación de burbujas (liberación de O2)

3. Prueba de la coagulasa
Objetivo
Probar la capacidad de un microorganismo de coagular el plasma por
la acción de la enzima coagulasa (estafilocoagulasa)
Esta prueba se usa para diferenciar especies dentro del género
Staphylococcus
La prueba de la coagulasa se utiliza para la identificación definitiva
de S. aureus y con frecuencia se usa para indicar virulencia o
patogenicidad

4. Prueba en tubo
En un tubo de vidrio agregar 0.5ml de plásma
Tomar una asada de una colonia y mezclar suavemente
Incubar a 37ºC por 4 horas. (observar cada 30 minutos)
Inclinar suavemente el tubo para ver si hay coagulo
Prueba en portaobjetos
Colocar una gota de agua destilada sobre un portaobjetos
Agregar una gota de suspensión bacteriana y homogeneizar
Agregar una gota de plasma
Se observa una reacción positiva en 5 a 20 segundos, se
observan grumos blancos

5. Prueba de oxidasa
Objetivo
Determinar la presencia de las enzimas oxidasas
La prueba oxidasa se basa en la producción bacteriana de una
enzima oxidasa intracelular. Esta reacción de oxidasa se debe a
un sistema de citocromo oxidasa que activa la oxidación del
citocromo reducido por el oxígeno molecular.
El sistema citocromo esta presente en organismos aerobios y
permite a éstos utilizar el oxígeno como aceptor final de
hidrógeno para reducir el oxígeno molecular a peróxido de
hidrógeno en el último eslabón de la cadena respiratoria.
La mayoría de las bacterias gram positivas son oxidasa negativas
Las especies de Neisseia son oxidas positivas
La familia Enterobacteriaceae es oxidasa negativa (excepto
Plesiomonas shigelloides)

6. Procedimiento directo en placa
Agregar 2-3 gotas de reactivo directamente sobre las colonias
Observar los cambios de color
Con el reactivo de Kovacs la reacción se produce en 10-15
segundos, se observa un color violeta
Método indirecto sobre papel
Colocar papel filtro en una placa de petri
Agregar 2-3 gotas de reactivo de Kovacs en el centro del papel
Colocar una asada de la colonia sospechosa sobre el reactivo
formando una linea
La reacción de color positivo se observa en 5-10 segundos