Este documento presenta información sobre la toma de muestras, conservación, aislamiento del analito y métodos de cuantificación para la intoxicación con plomo, arsénico y mercurio. Resume los tipos de muestras, temperaturas de conservación, técnicas de mineralización y espectrometría de absorción atómica para el análisis de estos metales en el laboratorio. También incluye detalles sobre las fuentes de exposición, toxicocinética y efectos agudos y crónicos de la intoxicación

2. Lo que vamos a ver hoy…
Metales y Metaloides Intoxicación con Pb
Intoxicación con As Intoxicación con Hg

3. Toma de muestra
Metal Preparación
previa
recipiente Tipo de
muestra
tiempo
Pb ninguna plástico Orina y
sangre (H)
Orina de 24
hs
Hg ninguna Plástico Orina de 24
hs
Fin de
jornada
As Si requiere plástico Orina 24 hs
Primera
micción
Extemporá-nea

4. Toma de muestra para As
 Preparación previa: Dieta libre de consumo de peces
y mariscos 72 hs antes de la recolección de muestra
 Tipo de recipiente: Estándar de laboratorio
preferentemente tratado con ácidos
 Tipo de muestra: Orina de 24hs o primera micción de
la mañana Pelos y uñas (1g).
Medio ambiente (agua, alimentos, suelos, aire)
 Tiempo de recolección: Extemporánea

5. Conservación de la muestra
Metal Temperatura Estabilidad
Pb Ambiente (25ºC)
Heladera (2-8 ºC)
Freezer ( -20ºC)
4 Hs
5 días
60 días
Hg Ambiente (25ºC)
Heladera (2-8 ºC)
Freezer ( -20ºC)
10 días
10 días
10 días
As (Orinas) Ambiente (25ºC)
Heladera (2-8 ºC)
Freezer ( -20ºC)
1 mes
1 mes
1mes

6. Conservación de la muestra para As
Temperatura Estabilidad
Ambiente (25ºC) Orinas 1 mes
Pelo y uñas: indefinidamente
Sangre 7 días
Heladera (8ºC) Orina: 1 mes
Pelo y uñas:
Indefinidamente
Sangre: 7 días
Freezer (-20ºC) Orina: 1 mes
Pelo y uñas: indefinidamente
Sangre: 7 días

7. Aislamiento del analito de la matriz
• Extracción con solventes
(Pb por AA)
• Mineralización: destrucción de la materia
orgánica (As y Hg )
• Pb en Sangre
no necesita
mineralización
Se Hemoliza la sangre y se
Extrae el Pb con solventes
orgánicos

8. Mineralización de la materia Orgánica
• Vía húmeda
# En caliente
- Mezcla de ácidos minerales
- Microondas
# En frío
• Vía seca
El Hg no se somete a Mineralización
En caliente ya que es Volátil y se
Pierde fácilmente por formación de vapores

9. Mineralización húmeda
1- Ácido sulfúrico
-Fijador de cationes
- Agente hidrolítico
- Agente deshidratante
- Indicador redox
2- Ácido Nítrico
-Oxidante activo
- Catalizador de HClO4
3- Ácido Perclórico
-Craqueo molecular
-Incrementa velocidad de
destrucción integral de la
materia orgánica

10. Mineralización húmeda
Muestra y Blanco de mineralización
Ambos con mezcla de ácidos minerales
Calentamiento en manta o mechero
Reducción de volumen del mineralizado

11. Mineralización en frío
1- Ácido sulfúrico
-Fijador de cationes
- Agente hidrolítico
- Agente deshidratante
- Indicador redox
2- Permanganato de K
-Oxidante activo
3- Baño de hielo
-Mantiene baja la
-temperatura

12. Mineralización por Vía seca
Mineralización vía seca
Digestión ácida
Digestión ácida en horno microondas

13. Métodos de Cuantificación
• COLORIMÉTRICOS
• ESPECTROMÉTRICOS:
- Espectrometría de Absorción Atómica (AA)
Vía Húmeda Colorimétrico
Vía Seca Abs. Atómica

14. ESPECTROMETRÍA DE ABSORCIÓN
ESPECTROMETRÍA DE ABSORCIÓN
ATÓMICA
ABSORCIÓN ATÓMICA
LLAMA
ABSORCIÓN
EMISIÓN
ATOMIZACIÓN
ELECTROTÉRMICA
GENERACIÓN
DE VAPOR
ATÓMICA

15. Espectrofotométrica de Absorción
Atómica-Fundamento

16. Componentes del equipo

17. Espectrometría de absorción Atómica

18. ABSORCIÓN ATÓMICA: HORNO de GRAFITO
En hornos de grafito la
Sangre va directamente

19. LÁMPARA DEUTERIO-CÁTODO HUECO

20. Especiación de As: HPLC – Absorción
Atómica- Llama

21. Arsénico
Características Químicas:
•METALOIDE
Compuestos orgánicos e inorgánicos
TRIVALENTES (más tóxicos)
PENTAVALENTES (más solubles)
Grados de oxidación:
+5: ARSENIATO (en aguas naturales)
+3: ARSENITO (en aguas naturales)
0: ARSÉNICO
-3: ARSINA

22. DESTINO DEL ARSÉNICO EN EL AMBIENTE
ANIMALES HOMBRE HERBICIDAS
ORGÁNICOS
ARSENICALES
EMISONES
INDUSTRIALES
Y URBANAS
COSECHAS
AIRE
PLANTAS AGUA
SUELOS Y SEDIMENTOS

23. FUMIGACIÓN
VÍAS DE EXPOSICIÓN AL ARSÉNICO
INDUSTRIA
CORTEZA
TERRESTRE
AIRE
AMBIENTE
SUELO AGUA SUPERFICIAL
VIDRIOS
AGUA DE POZO
PLANTAS ANIMALES
ALIMENTOS AGUA DE BEBIDA
HUMANOS
INCINERACIÓN
AIRE INHALADO POLVOS

24. Toxicocinetica del As
ABSORCIÓN
* CUTÁNEA
* DIGESTIVA
* INHALATORIA
DISTRIBUCIÓN
VIDA MEDIA MUY CORTA (1-3 HS)
UNIÓN a SH- PROTEÍNAS (Hemoglobina-
GR, albúmina)
NO BHE, Si Placentaria
ALTAS CONCENTRA-CIONES (24 HS)
* HÍGADO
* BAZO
* PULMÓN
* INTESTINO
* PIEL
* CABELLOS
* UÑAS
BIOTRANSFORMACIÓN
As+5 As+3
Metilación: ác. metilarsónico
ác. dimetilarsínico (cacodílico)
EXCRECIÓN
* RIÑÓN (70-75%, 10 días)
* HECES (6-9%)
* SALIVALES Y MAMARIAS
* FANERAS Deposito

25. Mecanismo de acción del As
• AFINIDAD POR LOS GRUPOS SULFHIDRILOS:
INHIBICIÓN ENZIMÁTICA
MITOCONDRIAL:
• INTERFIERE EN LA RESPIRACIÓN CELULAR (As+3
, Se une a la Lipoamida del complejo piruvato
deshidrogenasa)
• DESACOPLE DE LA FOSFORILACIÓN OXIDATIVA
• (As+5 compite con el fósforo, inhibiendo la
succínico deshidrogenasa)

26. Tipos de Intoxicación
• AGUDA
• CRÓNICA
* ACCIDENTAL
* LABORAL
* HOMICIDA o SUICIDA
* ENDÉMICA
Antídoto: Quelante
con Grupos Sulfhídrilos
• CONSECUENCIAS CLÍNICAS: GASTROINTESTINALES,
NEUROLÓGICOS, RENALES, HEPÁTICOS,
CARDIOVASCULAR y HEMATOLÓGICOS
Ingestión 70-180 mg: fatal

27. Intoxicación Aguda
• POR INGESTIÓN (30´)
Vómitos
Dolor abdominal intenso
Hematemesis
Aliento aliáceo (ajo)
Diarrea profusa
Deshidratación
Hipotensión
Cardiomiopatía
Muerte por fallo circulatorio
• SECUELAS:
• RENALES
hematuria, proteinuria
necrosis tubular aguda
• HEMATOLÓGICAS
anemia, leucopenia,
trombocitopenia
• NEUROLÓGICAS
neuropatía periférica
(sensitivos > motores )

28. INTOXICACIÓN CRÓNICA
REGIONES ENDÉMICAS
ARGENTINAS:
CÓRDOBA
BUENOS AIRES (Pcia. y conurbano)
SANTA FÉ
SANTIAGO DEL ESTERO
CHACO
CATAMARCA
SAN LUIS

29. Hidro Arsenicismo Crónico Regional
Endémico ( HACRE)
• Multifactorial y afecta a varios sistemas y
órganos
Cutáneo:
1-Hiperhidrotico: sudoración asociada con
pruito, tonalidad rojiza en palmas de la mano
y plantas de los pies
2- Hiperqueratosico: callosidades en sitios
mencionados anteriormente

30. Hidro Arsenicismo Crónico Regional
Endémico ( HACRE
3- Melanodermico: Aparecen zonas
hiperpigmentadas en forma de gotas de lluvia
en cuello, tronco y axilas
4-Cáncer de piel
• Extracutáneos: cáncer de
pulmón, Hígado vejiga, etc.

33. Laboratorio
Evaluación de la exposición: Fuente: Agua
BIOMARCADORES
Exposición resiente y crónica
Orina 24 hs/ primer micción
Corrección por creatinina
Tener en cuenta la vida media
Exposición crónica
Pelos y Uñas

34. Marcador de Exposición
• Exposición reciente: As urinario
Ventajas: muestra fácil de obtener, estable en el
tiempo, cuantificable por distintos métodos
analíticos.
Desventaja: Posible cuantificación de especies
de nula importancia toxicológica:
Arsenobetaina

35. Mercurio – Fuentes y Usos
• Mercurio metálico Hg0
• Compuestos Inorgánicos:
- Calomelanos o Cloruro mercurioso ClHg
- Cloruro mercúrico Cl2Hg
- Nitrato mercúrico (NO3)2Hg
-Fulminato de mercurio (CON)2Hg
-Óxido rojo de mercurio HgO –(pinturas)
• Compuestos Organomercuriales:
- Metilmercurio - Etilmercurio
- Dimetilmercurio - Fenilmercurio
(insecticidas, fungicidas, bactericida)

36. Mercurio - Fuentes y Usos
• Termómetros, manómetros
• Lámparas fluorescentes, UV, fotocopias
• Plaguicida
• Minería metales:
preciosos- odontología
• Obtención de lavandina, soda cáustica, pinturas,
papel
• Medicamentos: antisifilítico, diurético, antiséptico,
cicatrización de úlceras, psoriasis

37. Mercurio metálico Hg0 : vapor-líquido
• Toxicocinética:
• Absorción: vía inhalatoria 70-80%
• Distribución: unido GR~70%
• Órgano blanco: cerebro (SNC), riñón, pulmón
• Biotranformación: Catalasas a Hg2+
• Eliminación: renal (<<heces)
• Toxicodinamia:
• Unión SH- Ciclo de Krebs,
glucolítico, ATP
Los vapores de Mercurio atraviesan fácilmente la barrera hematoencefálica

38. Mercurio metálico Hg0 : vapor-líquido

39. Fisiopatología
• Intoxicación aguda: tos, bronquitis corrosiva, neumonitis,
fiebre, escalofríos, debilidad, dolor torácico, cianosis, náuseas,
vómitos diarrea, sabor metálico
• SNC: eretismo con disturbios mentales: irritabilidad,
depresión, excitabilidad y temblor
• Intoxicación crónica: Síndrome Asténico Vegetativo ó
MICROMERCURIALISMO
• Síndrome neurasténico + temblor, Tiroides con I2,
taquicardia, dermografismo, salivación profusa y gingivitis.
Espasmos
• Efectos neurológicos y psiquiátricos: depresión, irritabilidad,
respuesta exagerada a estímulos, excesiva timidez, insomnio,
inestabilidad emocional, amnesia, confusión

40. • Estudios complementarios:
Mercurio en orina
Alteración tomografía cerebral
Radiografía de tórax
Alteración de funciones respiratorias
• TRATAMIENTO:
Alejar de la fuente de exposición
Monitoreo de función pulmonar
Quelantes: D-Penicilamina

41. Mercurio inorgánico: Hg+-Hg2+
Toxicocinética:
• Absorción: vía inhalatoria 45%, digestiva 10% , dérmica %
• Distribución: unido a proteinas 75% (3/1 Π/GR)
• Órgano blanco: riñón (túbulo contorneado proximal y asa de
Henle)
• Biotranformación: Catalasas a Hg2+
• Eliminación: renal
Toxicodinamia:
• Unión SH- inhibición enzimática
• Interfiere activación linfocitos glomérulonefritis
autoinmune

43. Estudios complementarios:
• Mercurio en orina
• Alteración examen urinario
• Alteración de funciones renal
• Radiografía de tórax
Se puede analizar Hg en
peses

44. Tratamiento de la Sífilis: baños con
vapor de Hg, edad media

45. CUANTIFICACIÓN DE MERCURIO: por
Absorción Atómica por Vapor frío
20ml orina + 3ml HNO3 + 3ml H2SO4+ 1,5g KMnO4
Mineralización mínimo 2hs (24hs)
Reducción con Hidroxilamina 20% en agua (5ml)
Lectura por generación de Vapor Frío
con SnCl2 20% en HCl 20% V/V

46. PLOMO
ETIOLOGÍA Y FUENTES
• Laboral: fabricación de
acumuladores y baterías,
fundición, imprentas,
plomería, soldadura,
pinturas, fabricación de
plásticos, vidrios y cerámicas,
municiones y balas
• Accidental: ingestión de
Aguas contaminadas
• Ambiental: zonas cercanas a
chimeneas de fábricas

47. FUENTES DE EXPOSICIÓN
MINERÍA E
INDUSTRIAS
NAFTAS
CERÁMICA
VIDRIADA
POLVO
EN LAS
CASAS
TUBERIA
DE
PLOMO
PINTURA
CON
PLOMO
PLOMO EN
EL AIRE
LAPICES Y JUGUETES,
DECORADOS CON PINTURA CON PLOMO
INHALACION
DEPOSITO
AGUA
LATAS
INGESTION
DIETA

48. Toxicocinetica
• ABSORCIÓN:
- Compuestos inorgánicos: vía digestiva e inhalatoria
- Compuestos orgánicos: vía cutánea
• DISTRIBUCIÓN:
- 99% unido al GR
- Se distribuye 1° a hígado y riñón, luego
- se redistribuye y se deposita en huesos
• ELIMINACIÓN:
- Orina - Heces - Bilis
- Saliva - Sudor - Leche materna
- Faneras: pelos, uñas, piel
En cronicidad no
hay cantidades
Altas en orina
Compite con el Ca
Y se deposita en huesos

49. Toxicocinetica

51. TOXICODINAMIA
UNIÓN A GRUPOS -SH
Tejido blanco: afecta la síntesis del Hemo e
indirectamente del metabolismo del Fe2+ y T1/2 del GR

52. • INTOXICACIÓN AGUDA
Lesiones erosivas en tracto digestivo, náuseas, vómitos,
cólicos abdominales, constipación, diarrea sanguinolenta y
negruzca, insuficiencia renal
• INTOXICACIÓN CRÓNICA – SATURNISMO
Síndrome Gastrointestinal: ribete de Burton, cólico
saturnino, anorexia, pérdida de peso, constipación,
astringencia, sabor metálico, sed
• Síndrome Hematológico:
ANEMIA MICROCÍTICA e HIPOCRÓMICA
Punteado basófilo de los hematíes
Ribete de Burton Ribete violáceo o negruzco situado
sobre las encías, a nivel del cuello de los dientes. Indica
una intoxicación crónica por el plomo

55. Anemia Microcitica e Hipocromica

57. Perfil Plúmbico
No existen ensayos totalmente especificos
que nos permitan por si solos confirmar la
toxicidad con plomo, por lo que se
recomienda una serie de determinaciones
analiticas a la que se denomina Perfil
Plumbico

58. Perfil Plúmbico
• Actividad de la δ-ALA deshidratasa
• Acido δ-aminolevulinico urinario
• Coproporfirinas III totales
• Plombemia Grado de exposición al Pb
• Plomburia

59. Preparación de muestra por extracción
con solvente para:
CUANTIFICACIÓN DE PLOMO POR
ATOMIZACIÓN en
la LLAMA
2,5ml de sangre + I(gota) Tritón X-100 Hemólisis
Vortex 10” + 1ml APDC
Centrifugar 5´ - Trasvasar fase orgánica

60. Utilidad de la Orina
• La determinación de PB en orina se realiza:
En pacientes agudos para ver como se elimina
el metal
En pacientes Crónicos para seguimiento del
antídoto pero no para Diagnostico
Antídoto: Leche suplementada con Ca o EDTA
con Ca
Pacientes internados por que el Pb2+ que sale del hueso
Puede interactuar con los Glóbulos rojos

61. ABSORCIÓN ATÓMICA-ATOMIZACIÓN en la LLAMA
ESQUEMA
Detector
Fotomultiplicador
(transformador
de la radiación en
señal eléctrica)
Monocromador

62. Plomo
1- SUJETOS CLINICAMENTE SANOS Y NO EXPUESTOS
Mujeres: 2,0 a 15,2 g/dl
Varones: 3,1 a 17,7 g/dl
2- SUJETOS EXPUESTOS LABORALMENTE
Limite biológico de exposición: 30 g/dl
3- -SUJETOS EXPUESTOS LABORALMENTE
Limite biológico de exposición: 30 g/dl

63. Mercurio
1- SUJETOS CLINICAMENTE SANOS Y NO EXPUESTOS
Hasta 14 μg/l (microgramos por litro)
2- SUJETOS EXPUESTOS LABORALMENTE (**)
Límite biológico de exposición: 30 μg/g de creatinina
3- SUJETOS EXPUESTOS LABORALMENTE (**)
Límite biológico de exposición: 35 μg/g de creatinina

64. Arsénico en Orina
1- SUJETOS CLINICAMENTE SANOS Y NO EXPUESTOS
Hasta 44,6 μg As/l
Hasta 29,6 μg As/g creatinina
2- SUJETOS EXPUESTOS LABORALMENTE
Límite biológico de exposición: 35μgAs/l
3- SUJETOS EXPUESTOS LABORALMENTE
Límite biológico de exposición: 35μgAs/g de creatinina
Arsénico en pelos
Hasta 1,00 μg/g

65. Cadmio