3. Los Bioensayos son experimentos que se realizan bajo
condiciones controladas de laboratorio con el
propósito de evaluar cualitativa y cuantitativamente
el efecto que los agentes xenobióticos producen sobre
organismos vegetales o animales cuidadosamente
seleccionados.
4.
5. Los Bioensayos de toxicidad son una herramienta
intensamente utilizada en países desarrollados, con el
objeto de evaluar en forma efectiva y eficiente los
efectos tóxicos agudos y crónicos de la contaminación
en los organismos vivos. En la práctica, esta técnica
cuantifica la relación concentración-efecto de
compuestos químicos conocidos o mezclas
complejas, por medio de respuestas biológicas
medidas bajo condiciones controladas y
estandarizadas
6. Los efectos son muy diversos y pueden manifestarse
como inhibición o magnificación, son evaluados por la
reacción de los organismos:
muerte, crecimiento, proliferación, multiplicación, ca
mbios morfológicos, fisiológicos o histológicos
7. las dosis de substancia administradas pueden venir
dadas en diferentes unidades de medida.
Las respuestas son una medida del resultado de la
aplicación de la substancia en determinadas dosis y
pueden ser de varios tipos:
8. Ordinal (categoría de
una infección),
Discreta cuantitativa
Cuantitativa continua
(número de golpes de
(tiempo de
tos, número de
coagulación, peso).
mutaciones)
Dicotómica
(muerte o no
muerte, contracción
muscular o no
contracción muscular
9. Efectos de los xenobióticos en estructuras
subcelulares
Efectos de los xenobióticos en sistemas
enzimáticos
Efectos de los xenobióticos a nivel de poblaciones
o comunidades.
10.
11. El primer problema que se presenta al elegir una
técnica de bioensayo es decidir entre la utilización de
un ensayo directo o indirecto. En este sentido, se han
de tener en cuenta las definiciones siguientes:
12. • Si los datos obtenidos resultan
exactamente las dosis de
substancia (dosis umbrales)
DIRECTO medidas en cada individuo
para las cuales se observa una
respuesta específica
• Si las muestras obtenidas para
cada substancia consisten en
INDRECTO la observación de la respuesta
a diferentes dosis fijadas
anteriormente.
13. • Se mide en cada individuo
Respuestas una variable cuantitativa
discreta o continua.
cuantitativas
• Para cada nivel de dosis se
Respuestas mide el porcentaje de
individuos que presentan
PORCENTUAL una respuesta determinada
15. • Cuantifican las concentraciones letales de un xenobiótico a
Bioensayos una especie en particular. El valor calculado se denomina
concentración letal media (CL50), y representa la
concentración que causa la muerte al 50 % de la población
agudos: experimental, en un tiempo determinado (generalmente
48 o 96 horas)
• Estiman la concentración efecto media (CE50), la cual es
la concentración de la sustancia de prueba que causa un
efecto al 50% de la población experimental, al cabo de un
Bioensayos tiempo determinado; depende del estadío de vida
considerado o del ciclo de vida del organismo empleado.
crónicos: Alternativamente, un ensayo definitivo puede utilizarse
para estimar el tiempo requerido para producir un efecto
al 50% de los organismos (TE50), a una concentración
específica
16. De tipo estático: Se efectúa sin la renovación continua del flujo
constante de las diluciones sometidas al ensayo
Sin renovación: los organismos se exponen a la misma solución de
prueba el tiempo de duración del ensayo
Con renovación: los especimenes se someten a una preparación
fresca de la misma concentración inicialmente
empleada, periódicamente (generalmente cada 24 horas) . Tal
renovación puede ser necesaria cuando importantes sustancias
tóxicas se deterioran, o son absorbidas, o se pierden por cualquier
otra razón, con suficiente rapidez para influir considerablemente
con los resultados del ensayo (FAO, 1981).
De flujo continuo: Circula continuamente una corriente de
sustancia de prueba nueva en contacto con los individuos
experimentales. Se realizan con la renovación continua o casi
continua de las diluciones sometidas al ensayo, con el fin de
mantener casi constantes las concentraciones de las sustancias
tóxicas activas (FAO, 1981).
17. Se mide la facultad de las aguas residuales o de las
sustancias químicas de estimular la multiplicación y el
desarrollo de algas, efecto este de eutroficación que
frecuentemente se traduce en una superabundancia o
proliferación de algas
18. Trata de medir en el laboratorio las reacciones de escapes
de los animales acuáticos frente a un contaminante. Al
organismo utilizado (generalmente pez o crustáceo de
buen tamaño) se le ofrece la oportunidad de elegir entre
aguas "contaminadas" y aguas "limpias" en un tubo o
tanque pequeño; el gradiente de interfaz puede ser brusco.
Los aparatos y procedimientos miden también, por lo
general, cuando existe la atracción hacia el contaminante.
Para las especies con motilidad el escapamiento puede ser a
veces la respuesta subletal clave, de naturaleza más sensible
y más significativa que el deterioro de
la reproducción medido mediante ensayos de toxicidad
crónicos.
19. Algunos contaminantes pueden producir olores o
sabores desagradables en los organismos acuáticos. El
contaminante puede no ser nocivo para el organismo
acuático, pero puede ocurrir que el organismo pierda
valor económico. El mejor procedimiento, consiste en
la evaluación por parte de personas experimentadas en
bromatología y emplear gran número de catadores
diestros
20. Bioensayos estáticos
Se efectúa sin la renovación continua del flujo
constante de las diluciones sometidas al ensayo. Son
pruebas dirigidas en laboratorio para determinar los
efectos de toxicidad sobre algunas especies de
organismos
21. Bioensayos con renovación periódica
Los especímenes se someten a una preparación fresca
de la misma concentración inicialmente
empleada, periódicamente (generalmente cada 24
horas).
Determinan la toxicidad comparativa de diferentes
desechos o efluentes, así como la sensibilidad de los
organismos a un material dado, determinan también
los requerimientos en corto plazo de
oxígeno, pH, temperatura y otros factores ambientales.
22. Bioensayos de flujo continuo
Circula continuamente una corriente de sustancia de
prueba nueva en contacto con los individuos
experimentales. Se realizan con la renovación continua
o casi continua de las diluciones sometidas al
ensayo, con el fin de mantener casi constantes las
concentraciones de las sustancias tóxicas activas
(FAO, 1981), teniendo así una dinámica del agua y del
tóxico.
23.
24. Tipo Ventajas Desventajas
Disponibilidad de metodologías estandarizadas Deficiencia de realismo
Laboratorio
Comparación de especies de diferentes niveles Incapacidad de predecir efectos bajo condiciones
tróficos de campo
Posibilidad de utilizar las especies mas sensibles Aplicable solo en especies probadas
Los resultados pueden correlacionarse con los Incapacidad de aislar los factores causantes
datos físico-químicos
Campo
Proporciona evidencia incuestionable del deterioro No utilizable para pruebas de hipótesis
Indica los contaminantes responsables de la
afectación
25. CLASIFIQUE LOS BIOENSAYOS REALIZADOS A LA
Lactuca sativa ARGUMENTANDO OBJETIVOS Y
RESULTADOS
26.
27. En Chile, la preocupación por el tema ambiental no es
reciente ni privativa de un Gobierno específico. Desde
el punto de vista jurídico, a principios del siglo pasado
ya se dictaron normas que, de una u otra forma, han
tenido por objeto regular aspectos específicos de la
actividad humana, en cuanto ésta tiene incidencia
ambiental. Ya en 1916 se dictó la Ley N° 3.133 sobre la
Neutralización de los Residuos Provenientes de
Establecimientos Industriales (Ley 3.133, artículo
10, Diario Oficial 07/09/1916).
28. En Chile existe el Instituto Nacional de
Normalización, INN - Chile, cuya función es el
estudio y preparación de las normas técnicas a nivel
nacional. Es miembro de la INTERNATIONAL
ORGANIZATION FOR STANDARIZATION (ISO) y de
la COMISIÓN PANAMERICANA DE NORMAS
TÉCNICAS (COPANT), representando a Chile ante
esos organismos
29.
30. D.S N°4, “REGLAMENTO PARA EL MANEJO DE LODOS
GENERADOS EN PLANTAS DE TRATAMIENTO DE AGUAS
SERVIDAS
D.S 189, APRUEBA REGLAMENTO SOBRE CONDICIONES
SANITARIAS Y DE SEGURIDAD BÁSICAS EN LOS RELLENOS
SANITARIOS
DTO. N° 236/26, REGLAMENTO GENERAL DE ALCANTARILLADOS
PARTICULARES, FOSAS SÉPTICAS, CAMARAS
FILTRANTES, CAMARAS DE CONTACTO, CAMARAS ABSORBENTES
Y LETRINAS DOMICILIARIAS
DTO. N° 735 DE 1969,”REGLAMENTO DE LOS SERVICIOS DE
AGUA, DESTINADOS AL CONSUMO HUMANO; DEROGA EL
DECRETO N° 1132, DE 3 DE MAYO DE 1952, DEL EX MINISTERIO DE
SALUBRIDAD, PREVISIÓN Y ASISTENCIA SOCIAL
DTO. N° 148/03;”REGLAMENTO SANITARIO SOBRE MANEJO DE
RESIDUOS PELIGROSOS”
D.F.L. N° 725/67, CODIGO SANITARIO
D.S N° 594, DE 1999,”REGLAMENTO SOBRE CONDICIONES
SANITARIAS Y AMBIENTALES BASICAS EN LOS LUGARES DE
TRABAJO”
31. DTO. Nº 144/61, ESTABLECE NORMAS PARA EVITAR
EMANACIONES O CONTAMINANTES
ATMOSFERICOS DE CUALQUIERA NATURALEZA
NCh Nº 1333 de 1978 - NORMA CHILENA SOBRE
REQUISITOS DE CALIDAD DEL AGUA PARA
DIFERENTES USOS
D.S. Nº 609, 07 de May. 1998, ESTABLECE NORMA DE
EMISION PARA LA REGULACION DE
CONTAMINANTES ASOCIADOS A LAS DESCARGAS
DE RESIDUOS INDUSTRIALES LIQUIDOS A
SISTEMAS DE ALCANTARILLADO