Successfully reported this slideshow.
We use your LinkedIn profile and activity data to personalize ads and to show you more relevant ads. You can change your ad preferences anytime.

1

Share

Download to read offline

Mitochondria and oxidative stress

Download to read offline

Mitochondria, ROS, cell culture, anoxia

Related Books

Free with a 30 day trial from Scribd

See all

Related Audiobooks

Free with a 30 day trial from Scribd

See all

Mitochondria and oxidative stress

  1. 1. МИТОХОНДРИИ И ОКИСЛИТЕЛЬНЫЙ СТРЕСС Древицкая Татьяна к.б.н., cт.н.с., Институт физиологии им. А.А.Богомольца, Киев, Украина
  2. 2. Митохондрии в клетке и их функция
  3. 3. Функции митохондрий  Синтез АТФ – «энергетический центр» клетки (95% синтезируется в мт)  Участие в метаболизме аминокислот, липидов, холестерола, стероидов, нуклеотидов  Инициация процессов апоптоза (программируемой клеточной смерти)  Регуляция экспрессии ядерного генома  Участие в собственном воспроизведении
  4. 4. Свободный радикал - частица (атом или молекула), имеющая на внешней оболочке один или несколько неспаренных электронов. Радикал может образоваться в результате потери одного электрона нерадикальной молекулой: X e− + X+→ или при получении одного электрона нерадикальной молекулой: Y + e− Y−→
  5. 5. Окислительное фосфорилирование в митохондриях - главный источник энергии и свободных радикалов. В норме свободные радикалы необходимы для: - выполнения сигнальной функции - индукции иммунной системы - мобилизации систем ионного транспорта - апоптоза В норме свободные радикалы в клетке нейтрализуются собственными антиоксидантными системами, и только когда возникает или гиперпродукция свободных радикалов, илинедостаточны силы антиоксидантной защиты – возникают повреждения ДНК, органелл и мембран клетки
  6. 6. Для экспериментов используется первичная культура, полученная из желудочков 2-х дневных крыс линии Wistar дня. КУЛЬТУРА НЕОНАТАЛЬНЫХ КАРДИОМИОЦИТОВ – модель для изучения функций митохондрий
  7. 7. Использование такой модели позволяет оценить влияние различных веществ и факторов на: - клеточную смерть - работу генов - функцию митохондрий - активность систем свободнорадикальной защиты - уровень свободных радикалов в клетке
  8. 8. Методы и подходы - выделение и культивирование неонатальных кардиомиоцитов; - флуорисцентная микроскопия; - моделирование аноксии/реоксигенации; - определение экспрессии генов; - трансфекция клеток и введение интерферирующих РНК
  9. 9. МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ: - флуоресцентная микроскопия; - выделение ДНК, РНК, хроматина, белков, митохондрий; - полимеразно-цепная реакция в режиме реального времени; - определение уровня свободных радикалов; - определение митохондриального потенциала;
  10. 10. REAL-TIME PCR
  11. 11. Флуоресцентная микроскопия
  12. 12. . КРЫС Флюоресцентная микроскопия для определения уровня свободных радикалов Окраска с помощью DСF a – контроль б – моделирование окислительного стресса при аноксии/реоксигенации
  13. 13. . MitoTracker Red CMXRos – окрашивает митохондрии с высоким митохондриальным потенциалом 1. контрольные кардиомиоциты 2-3. использование активаторов митохондриального дыхания
  14. 14. Что может нам сделать наш организм более подготовленным к таким неблагоприятным воздействиям, нехватка кислорода или окислительный стресс? -отказ от вредных привычек -здоровое и сбалансированное питание -употребление преимущественно растительной пищи, которая содержит витамины и антиоксиданты -физическая и умственная нагрузка - активный отдых, в том числе в горах - хорошее настроение и приятные эмоции
  15. 15. ! Спасибо за внимание! Спасибо за внимание
  • Dosenko

    May. 24, 2017

Mitochondria, ROS, cell culture, anoxia

Views

Total views

197

On Slideshare

0

From embeds

0

Number of embeds

1

Actions

Downloads

2

Shares

0

Comments

0

Likes

1

×