ASYE, optimal örnek alımı, mikrobiyolojik örnekler, balgam, torasentez, transtorasik iğne aspirasyonu, kan kültürü, idrar antijen testi, legionella, pnömokok

1. Dr.Abdurrahman SARMIŞ
Ocak,2011
1

2. Akut Solunum Yolu Enfeksiyonları
 Hem ÜSYE hem ASYE, klinisyenlerin
karşılaştıkları EN SIK hastalık
 SYE nedeniyle AB ülkelerinde 180 milyon
antibiyotik reçetesi rapor edilmiş(2008)
 ABD’de bronşit nedeniyle 16-64 yaş arası
erişkinlerde 6.4 milyon antibiyotik reçete
edilmekte*
 *Mainous, A. G., III, S. Saxena, W. J. Hueston, C. J. Everett, and A. Majeed.2006. J. R. Soc. Med. 99:358–
362.
2

3. Etken tespiti
 Ciddi bir problem
 Vakaların yaklaşık yarısında yapılmakta
 Hastane enfeksiyonlarının sadece %25 - 50’sinde
etken tanımlanmakta
3

4. Rinofarenks
 Havadaki bakterilerle temasa açık bir bölge
 Aynı zamanda bu bakterilere karşı güçlü bir bariyer
4

5. Bariyer fonksiyonu
 Lokal lenfoid dokudan üretilen FAGOSİTİK
hücreler
 Sekretuar Ig
 Kommensal flora(2.6 x10⁴-4 x 10⁸ CFU aerob ve
anaerob bakteriler) *
* Stenfors, L. E., and S. Raisanen 1989 Acta Otolaryngol. 108:122–125.
5

6. ÜSY florasında yaş arttıkça
 Aeroblar AZALMA- Anaeroblar ARTMA eğiliminde
 Genel anestezi altında opere edilen, otolaringeal
enfeksiyonu olmayan 37 hastada
 Nasal kavite, larinks, arka farenks duvarı ve palatin
tonsillerden örnek alımı
 Farenkste daha fazla suş saptanmış
 Bu durum, farenksten alınan kültürlerin daha başarılı
olacağını göstermekte
 Fibronektin etkisi sayesinde 50 yaş ve üzerinde beta
laktamaz üreten suşlarda daha az üreme olduğu
düşünülmekte*
* Tanaka, I., K. Suzuki, E. Tanaka, and S. Baba. 1996 Acta Otolaryngol. Suppl. 525:44–50.
6

7. Kolonizasyon
 Yaşamın ilk yılında başlar
 Komensal organizmalar + muhtemel
patojenler:
 Grup A -hemolitik streptokoklar,
 Streptococcus pneumoniae,
 Haemophilus influenzae,
 Moraxella catarrhalis.
7

8. Muhtemel patojenler
 Bu bakteriler ya sürekli var ya da geçici
 Yaş ( erişkinlerde daha az)
 Diğer çocuklarla temas
 Coğrafik lokalizasyon
 Sosyoekonomik durum
 Aşılanma durumuna bağlı*
* Garcia-Rodriguez, J. A., and M. J. Fresnadillo Martinez. 2002. J. Antimicrob. Chemother. 50(Suppl. 2):59–
73.
8

9.  Bu organizmalar kolonize kişilerden çok az bir
kısmında hastalık etkeni
 Virüsler normalde rinofarinkste BULUNMAZ.
 Ancak,çoğu bakteriyel enfeksiyon virüslerin
rinofarinkste çoğalmasıyla oluşur.
 Virüsler seröz bir salgı oluşmasına neden olur.
 Bakteriyel enfeksiyon da geliştiğinde pürülan
akıntı oluşur.
9

10.  ASYE tanısında kullanılan steril olmayan örnekler,
ASYE etkenleri ile rinofarenkste kolonize olmuş
mikroorganizma ayrımını iyi yapmalıdır.
10

11. SOLUNUM YOLU PATOJENLERİNİN TESPİTİNDE
OPTİMAL ÖRNEKLER
11
Örnekler İnvaziv İnvaziv olmayan
Steril *Kan
*Torasentez
*TİA
Steril olmayan *Bronkoskopik PSB
(Korunmuş Fırça)
*BAL
*Balgam
*NFA,NFS,OFS

12. SOLUNUM YOLU PATOJENLERİNİN TESPİTİNDE
OPTİMAL ÖRNEKLER
1)İnvaziv teknikler:
a)Steril örnekler
Kan :
 Pnömoni tanısı için yüksek özgüllüğe sahip
 Tedavi edilmemiş vakaların sadece %4 - 18’ inde üreme var 1
 Kan kültürü pozitiflik oranlarıyla toplumdan kazanılmış pnömoni
ciddiyeti arasında bir ilişki saptanmış.(Pnömoni ciddiyeti indeksi temelli)
 Hastalığın mümkün olan en erken döneminde , antibiyotik
tedavisi başlamadan önce 2 kan kültürü alınmalı 2
• 1 Bishara, J., L. Leibovici, S. Ashkenazi, Z. Samra, and S. Pitlik. 2000. Eur.J. Clin.
Microbiol. Infect. Dis. 19:926–931.
• 2 Waterer, G. W., and R. G. Wunderink. 2001. The influence of the severity of
community-acquired pneumonia on the usefulness of blood cultures. Respir. Med. 95:78–82.
12

13. Pnömoni ciddiyeti indeksi
 Klinisyenlerin toplumdan kazanılmış pnömoni
hastalarının morbidite ve mortalite ihtimallerini
hesaplamalarını sağlayan bir indeks
 Hastaları risk gruplarına ayırmayı sağlıyor.*
*http://pda.ahrq.gov/clinic/psi/psicalc.asp
13

14. Soru Cevap
50 yaş üstü Evet/Hayır
Değişken mental durum Evet/Hayır
Nabız ≥125/dk Evet/Hayır
SS > 30 /dk Evet/Hayır
Sistolik kan basıncı < 90 mmhg Evet/Hayır
Ateş<35 veya ≥ 40°C Evet/Hayır
Anamnez
Neoplastik hastalık Evet/Hayır
Konjestif kalp yetmezliği Evet/Hayır
Serebrovasküler hastalık Evet/Hayır
Renal hastalık Evet/Hayır
Karaciğer hastalığı Evet/Hayır
14
Hepsi hayırsa Risk Sınıf 1, ancak bir tane evet varsa 2.evreye geç.

15. Erken kan kültürü almanın önemi
 İlk semptomdan sonraki 4 gün içinde alınan kan
kültürlerinde pozitiflik % 34 , daha sonra
alınanlarda % 12
 Pozitif kültürlerin % 60’ı S.pneumoniae, % 2- 13’ü
H.influenzae*
* Kalin, M., and A. A. Lindberg. 1983. Diagnosis of pneumococcal pneumonia: Scand. J. Infect.
Dis. 15:247–255.
15

16. Torasentez
 Pnömoni ile birlikte plevral effüzyon %40 birlikte
görülmekte
 Plevral eksüda kültürü özgüllüğü yüksek,
duyarlılığı düşük(plevraya invazyon insidansı
düşük olduğu için)*
Yoğun plevral efüzyon varlığında tercih
edilebilmekte
* Skerrett, S. J. 1999. Diagnostic testing for community-acquired pneumonia. Clin. Chest Med. 20:531–548.
16

17. 17

18. 18

19. TİA ( Transtorasik iğne aspirasyonu )
 Sık tercih edilmemektedir.
 Ancak, ağır pnömonili hastalarda tercih edilmekte
 Ciltten kontaminasyon riski mevcut (dezavantaj)
 Rinofarenks gibi diğer kommensal florayla
kontaminasyon riski olmadan, enfeksiyon bölgesine
odaklı örnek (avantaj)
 TİA, pnömonili hastaların %33-80’inde pozitif kültür
sağlama 1
 Etyolojisi bilinmeyen 55 hastanın 36’sına (%65) TİA ile
mikrobiyolojik tanı 2
1 Skerrett, S. J. 1999. Clin. Chest Med. 20:531–548.
2 * Ruiz-Gonzalez, A., M. Falguera, A. Nogues, and M. Rubio-Caballero. 1999. Am. J. Med. 106:385–390.
19

20. TİA
 Ciddi komplikasyon riski olduğu için
 Fokal infiltrasyon alanları olan
 Daha az invaziv yöntemlerle tanı konulamayan
hastalarda tercih edilebilir.
20

21. 21

22. 22

23. B) Steril olmayan örnekler
 Bronkoskopik PSB (korunmuş fırça) ve BAL:
 Bronkoskopinin ASYE tanısında özgüllüğü , üst
solunum yolu florasından kontaminasyon riski
nedeniyle yüksek değil.
 Korunmuş fırçada bu risk daha az olduğu için
özgüllük daha yüksek
23

24.  Önce bronkoskopiyle ve daha sonra
bronkoskopisiz alınan (NB-BAL),
 Korunmuş fırça(PSB) ve BAL ile tanısal etkinlikte
artış
 Daha düşük risk
 Hasta açısından transtrakeal aspirasyon ve direk
TİA ’dan daha az invaziv olduğu için daha kabul
edilebilir bir yöntem
24

25. PSB ile
 Distal bronşiyal sekresyonun düşük bir miktarı
alınmakta
 Bu tekniklerde kantitatif bakteri kültürü (koloni
sayısı) önemli
 Pnömoni tanısı için sınır değer:
 10³ kob/ml
 BAL kültürlerinde ise 10⁴ kob/ml*
 * Rasmussen, T. R., J. Korsgaard, J. K. Moller, T. Sommer, and M. Kilian. 2001. Respir. Med. 95:885–890.
25

26.  PSB için, 10³ CFU/ml ve üzeri pozitif olarak
kabul edildiğinde ASYE etken tespiti için;
 %90 duyarlılık
 %97 özgüllük saptanmıştır.
 BAL kültürlerinde 10⁴ CFU/ml pozitif kabul
edildiğinde , ASYE etkenlerini saptama
özgüllüğü % 100 olmuştur*
* Cantral, D. E., T. G. Tape, E. C. Reed, J. R. Spurzem, S. I. Rennard, and A. B. Thompson. 1993. Am. J. Med. 95:601–
607
26

27. İnvaziv olmayan teknikler
Balgam
 En sık kabul edilen örnek
 Değerli olması için alt solunum yolları sekresyonlarını
içermeli
 Değerlendirme sitolojik kriterlere göre yapılmakta
 Red kriteri:
Mikroskobik incelemede 10’luk büyütmede, her alanda
≥10 yassı epitel hücresi ve ≤25 PNL hücre sayısının
bulunmasıdır.
 İyi kaliteli balgam elde etmek zor
 Çoğu pnömoni hastası balgam üretemez (Özellikle
yaşlılar)
27

28. Erişkinlerde yapılan çalışmalarda
 Gleckman %32
 Roson %39
 Ewig %55
 Kalin % 76 tatmin edici örnek elde ederken;
 Geckler ,genç askerlerde %90’lık oran
yakalamıştır.(Gram boyama ve Nomarski mikroskobi
kriterlerine uygun olan balgamları kabul ederek)*
*Geckler, R. W., D. H. Gremillion, C. K. McAllister, and C. Ellenbogen. 1977.. J. Clin. Microbiol. 6:396–399. (YIL ???)
28

29. Nomarski mikroskobi kriterleri
 Gram boyama alternatif olarak yıllar önce önerilmiş
 Faz yoğunluğuna göre çalışmakta
 Işık prizmalarla dağıtılmakta, mercekten geçmekte ve
mercekteki lens tarafından yeniden şekillendirilerek
üç boyutlu bir görüntü elde edilmekte
 Avantajları:
 Hazırlaması daha kolay ve daha hızlı
 Isı fiksasyonu olmadığı için hücre tahribatı yok
 Kapsül şişme testi direk yapılabilmekte
 Dezavantajları:
 Görülen mikroorganizmalar sınıflandırılamamakta*
*LARRY G. REIMER* AND ATHENA KEPAS,JOURNAL OF CLINICAL MICROBIOLOGY, Feb. 1986, p. 377-378
29

30. Balgamda gram boyama
 12 çalışmanın meta analizinde
 Duyarlılıkta %15 - 100
 Özgüllükte %11 – 100 arası değişkenlik saptanmış
 Plevral sıvı, T İA ve kan kültürü gibi kommensal
flora ile kontaminasyon riski olmayan kültür
sonuçlarıyla kıyaslanmalı ve uyumlu olduğu
takdirde anlamlı kabul edilmeli*
*Reed, W. W., G. S. Byrd, R. H. Gates, Jr., R. S. Howard, and M. J. Weaver. 1996. West. J. Med. 165:197–204.
30

31. Balgamda gram boyama
 Bir diğer çalışmada;
 Kabul edilebilir örneklerin %79'unda predominant
bir morfotip
 Bu hastaların kan kültürlerinden %85'inde bu
morfotiple uyumlu bir organizma üretilmiştir.*
* Gleckman, R., J. DeVita, D. Hibert, C. Pelletier, and R. Martin. 1988. J. Clin. Microbiol. 26:846–849.
31

32. Balgamda gram boyama
 Başka bir çalışmada
 İyi kaliteli balgamda
 Tek veya predominant morfotip
saptanmasının(±%90)
 Duyarlılık ve Özgüllük
 S.pneumonia :35.4 96.7
 H.influenza :42.8 99.4
* Roson, B., J. Carratala, R. Verdaguer, J. Dorca, F. Manresa, and F. Gudiol. 2000. Clin. Infect. Dis. 31:869–874.
32

33. Yıkanmış balgam örnekleri
 Üniversitemizde yapılan bir araştırmada,
 ASYE’li çocuklarda yıkanmış balgam örneklerinin tanısal değeri araştırılmıştır.
 Önceki bazı araştırmalarda balgamlarda bakteriyel kontaminasyonu azaltmak
için balgam örneklerinin yıkanması ve belirli miktarlarda ekilmesi önerilmiş,
 Bu çalışmada ASYE şüpheli çocuklardan alınan balgam örnekleri bu yöntemle
incelenmiş
 Her alanda >10 yassı epitel hücresi içeren örnekler işleme alınmamış, >25 PNL
içeren örnekler işleme alınmış,
 KK,McKonkey,çikolata agara ekildikten sonra fizyolojik salinle
karıştırılmış(1/10), vortexlenmiş, santrifüj edilmiş, homojenizasyon için eşit
hacimde N-asetil sistein ilave edildikten sonra 37°C’de 15 dakika inkübe edilmiş
 Daha sonra yıkanmış örnekler 1/10 salinle dilüe edilmiş ve 10 µl’lik sıvı aynı
şekilde ekilmiş
 Petriler 37°C’de 48 saat inkübe edilmiş ve koloni sayısı ≥ 10⁶ kob/ml olan
mikroorganizmalar patojen olarak kabul edilmiş
 Yıkanmış örneklerde, H.influenza,S.pneumonia ve Moraxella catarrhalis izole
edilmiş.
 Sonuç olarak, yıkanmış balgam örneği kullanmanın kontaminasyonu 100-1000
kat azalttığı ve balgam örneklerinin tanısal değerini arttırdığı gösterilmiş.*
 Nihan Ziyade, Burak Aksu and Aysegul Yagci, Pediatrics International (2009)
33

34. Pürülan bir örnek olduğu takdirde;
 Gram boyama %80 vakada olası tanı
sağlamaktadır.
 Bu sonuçlar başka çalışmalarla da
doğrulanmıştır. (1,2)
 Sonuç olarak,
 İyi kaliteli bir balgam örneğiyle,
 S.pneumonia ve H.influenza etkenleri,
 30 - 40 dakika içinde yapılan bir gram
boyamayla ve
 Doğrulanan kültürle saptanabilir.
1 Miyashita, N., H. Shimizu, K. Ouchi, K. Kawasaki, Y. Kawai, Y. Obase, Y. Kobashi, and M. Oka. 2008.
Med. Sci. Monit. 14:CR171–CR176.
2 Butler, J. C., S. C. Bosshardt, M. Phelan, S. M. Moroney, M. L. Tondella, M. M. Farley, A. Schuchat, and B. S.
Fields. 2003. J. Infect. Dis. 187:1416–1423.
34

35. NFA (Nazofaringeal aspirat) NFS (Nazofaringeal
sürüntü) OFS (Orofaringeal sürüntü)
NFA
 Daha çok viral kaynaklı enfeksiyonların tanısında
 Ancak tüm virüsler için geçerli olmayabilir
 Daha çok çocuklarda popüler
 Erişkinlerde pek tercih edilmiyor
35

36. NFA
 NFA örneklerinin hızlı influenza virüsü testi için
santrifüj edilmesi ve sulandırılması önerilmektedir.
 Hızlı antijen testi için
 Yüksek kaliteli bir örnek olabilir.
36

37. Hastaneye yatırılan 455 çocuktan alınan NFS örneklerinde
 Abu-Diab, A., M. Azzeh, R. Ghneim, R. Ghneim, M. Zoughbi, S. Turkuman, N. Rishmawi, A.-E.-R. Issa, I. Siriani, R. Dauodi,
R. Kattan, and M. Y. Hindiyeh. 2008. J. Clin. Microbiol. 46:2414–2417.
Virüs Duyarlılık
RSV % 98.4
İnfluenza A % 100
Parainfluenza % 100
Adenovirus % 88.9
37

38. NFA-NFS kıyaslaması
NFA NFS Tanımlama
RSV için Daha iyi RT-PCR, DIF 1
İnfluenza için Daha iyi DIF 1
ASYE etkeni
virüsler için
Optimal örnek RT-PCR,DIF
Örnek alımı Daha kolay
Çocuklar için SYE
virüslerde
Daha iyi PCR 2
38
1Chan, K. H., J. S. Peiris, W. Lim, J. M. Nicholls, and S. S. Chiu. 2008.J. Clin. Virol. 42:65–69.
2Walsh, P., C. L. Overmyer, K. Pham, S. Michaelson, L. Gofman, L. De- Salvia, T. Tran, D. Gonzalez, J. Pusavat, M. Feola, K. T.
Iacono, E. Mordechai, and M. E. Adelson. 2008. J. Clin. Microbiol. 46:2374–2376.

39. ASYE etkenlerinin izolasyonunda optimal
örnekler
 Streptococcus pneumoniae
 Balgam kültürü duyarlılık ve özgüllüğü, flora kontaminasyonu ve
kolonizasyonu nedeniyle düşük
 Yatan hastalar da pozitiflik <%20 - >%90
 Kan kültürleri pozitif olan hastalardan alınan balgam örneklerinde %94’e kadar
pozitiflik saptanmış 1
 Pulmoner patolojisi olmayanlardan da pürülan balgam elde edilebilir 2
 Bir çalışmada, balgam ve kan kültürleri pozitifliği %47
 Başka bir çalışmada %49 uyumlu bulunmuş.3
1-Drew, W. L. 1977 J. Clin. Microbiol.
2-Lentino, J. R., and D. A. Lucks. 1987. J. Clin. Microbiol. 25: 758–762.
3 Barrett-Connor, E. 1971 Am. Rev. Respir. Dis. 103:845–848.
39

40. Streptococcus pneumoniae
Gram boyamada görülen organizmaların
%90‘ından fazlası izole edilen mikroorganizma
ile uyumlu olduğunda balgam kültürü
anlamlıdır.
40

41. Haemophilus influenzae
 BALGAM KÜLTÜRÜ
 Duyarlılığı: %76 - 82
 Özgüllüğü : %99 - 100
41

42. Moraxella catarrhalis
 ASYE’lerde rolü hala sorgulanmakta
 ASYE etkeni olarak saptanmasında en iyi nonsteril
örnek: BALGAM
42

43. Mycoplasma pneumoniae
 Zor üreyen bir bakteri olduğu için rutin olarak
solunum yolları örneklerinde kültürü yapılmamakta
 Çoğu çalışma PCR’a dayalı
 PCR’la M.pneumoniae tanısında OFS ve NFS ile alınan
örneklerden toplam 7 hasta pozitif ( % 10 )
 Bunlardan 6 tanesi OFS
 2 tanesi NFS ile pozitif
 Örnek sayısı az, bu yüzden istatiksel olarak anlamlı
değil *
* Gnarpe, J., A. Lundback, H. Gnarpe, and B. Sundelof. 1997 J. Infect. Dis.
43

44.  Başka bir çalışmada
 PCR ‘la M.pneumonia tanısı için NFS ve OFS eşit derecede etkili
bulundu.
 Ancak her iki yöntem birlikte kullanıldığında en yüksek
duyarlılık elde edildi. 1
 Diğer bir çalışmada NFS ve NFA arasında PCR yöntemiyle
M.pneumonia saptanmasında bir fark bulunamadı .2
Sonuç olarak
M.pneumonia için en iyi örnek balgam
 NFA,NFS ve OFS ikinci seçenek
1 Michelow, I. C., K. Olsen, J. Lozano, L. B. Duffy, G. H. McCracken, and R. D. Hardy. 2004. J. Clin. Microbiol.
2 Reznikov, M., T. K. Blackmore, J. J. Finlay-Jones, and D. L. Gordon. 1995 J. Clin. Microbiol. Infect. Dis.
44

45. Chlamydophila pneumoniae
 3-12 yaş arası çocuklar
 NFA ile OFS kıyaslaması
 NFA, C. pneumoniae izole edilen tüm hasta
çocuklarda pozitif
 OFS aynı çocukların %50’sinde pozitif *
* Block, S., J. Hedrick, M. R. Hammerschlag, G. H. Cassell, and J. C. Craft. 1995. Pediatr. Infect. Dis. J.
45

46.  C. pneumoniae salgını sırasında;
 SYE olan 116 hasta
 Balgam, OFS, NFS örnekleri
 Tüm örneklerin alındığı 61 hastadan PCR, kültür ve
antijen tanımlama performans kıyaslamasında,
 20 hasta C. pneumoniae ile enfekte düşünüldü
 7 NFS
 10 OFS
 20 balgam örneği pozitif *
*Boman, J., A. Allard, K. Persson, M. Lundborg, P. Juto, and G. Wadell. 1997. EIA. J. Infect. Dis.
46

47. EİA ile örneklerin duyarlılık oranları

Örnek PCR Kültür Antijen Tespiti
NFS % 35 % 30 % 30
OFS % 50 % 40 % 25
Balgam % 95 % 100 % 80
47

48.  Sonuç olarak
 C. pneumoniae için
 BALGAM veya NFS
48

49. Legionella pneumophila
 Genel olarak BALGAM en iyi örnek
 İlk PCR çalışmalarında OFS uygun örnek olarak
bulunurken; 1
 Daha büyük,
 242 toplumdan kazanılmış pnömonili hastayla yapılan
çalışmada
 OFS için 2 farklı PCR yapılmış
 Sadece 3/11 onaylanmış legionella vakası 2
1 Ramirez, J. A., S. Ahkee, A. Tolentino, R. D. Miller, and J. T. Summersgill. 1996. Diagn. Microbiol. Infect. Dis.
2 Diederen, B. M., and M. F. Peeters. 2007 J. Clin. Microbiol.
49

50. Respiratuar virüsler
 İnfluenza
 RSV
 Adenovirüs
 Parainfluenza virüs antijenleri DIF veya ticari olarak
EIA ile saptanabilmekte
 Bu testlerin duyarlılığı % 50 - > % 90 arası
değişebilmekte
50

51.  Antijenik tespiti değerlendirmede iki ana
problem
Çalışılan örnek ve Hasta yaşı
 İnfluenza A ve İnfluenza B tespitinde
 Çalışılan örnek tipine göre
 Duyarlılıkta önemli değişiklikler saptanmakta.
51

52. Diğer Örnekler
 İdrarda antijen testi
 S. pneumoniae urinary immünokromatografik
membran test (ICT)
 15 dakika yoğunlaştırılmamış idrar kullanılarak
 Erişkin bakteremik pnömonide
 Duyarlılık: % 70- 80
 Özgüllük > % 95
52

53.  Diğer çalışmaların sonuçlarına göre;
 İdrarda pnömokokal antijen testi, ciddi derecede hasta ve
düzgün gram boyanabilen balgam örneği veremeyen hastalara
yapılmalı 1
 Pnömokokal pnömonili 149 erişkin hastada yapılan araştırmada
idrarda antijen testi için duyarlılık % 77- 78 özgüllük % 67 - 71
olarak saptanmış. 2
 Başka bir çalışmada,
 Pnömokok pnömonisi olan 68 hastada idrar antijen testi % 100
pozitif saptanırken,
 Muhtemel pnömokok pnömonili 52 hastanın 36'sında ( % 69.2)
pozitif saptanırken,
 Pnömokokal pnömonisi olmayan 277 hastanın 50'sinde (% 18)
pozitiflik saptanmıştır.3
1 Roson et al. (86), Van der Eerdenet al. (101), and Ortega et al. (73)
2 Jay C. Butler Journal of Infectious Disease, May 1,2003
3M.A. Marcos, M.T. Jimenez European Respiratory Journal,Feb 1, 2003
53

54. İdrar Antijen Testi
 Legionella enfeksiyonlarında en hızlı yardımcı test
 Tanı konamayan pnömonili
 Yoğun bakımda yatan, hospitalize
 B laktam antibiyotiklere yanıt vermeyen durumlarda
tavsiye edilmekte.
54

55.  Dezavantajı
 Sadece Legionella pneumophila serogrup 1 antijenini
tespit edebilmekte
 Bu serogrup legionella pnömonisinin en sık sebebi
 Avantajı
 Legionella spp. Kültürleri 3-4 gün gibi uzun sürebildiği
için legionella enfeksiyonlarında kullanışlı ve hızlı bir
test
55

56. Duyarlılıkları
 Konsantre idrarda;
 % 86.6 ile % 91.6 arası
 Konsantre olmamış idrarda;
 % 55.5 ile % 66.6 arası (1 , 2)
1 Dominguez, J., N. Gali, L. Matas, P. Pedroso, A. Hernandez, E. Padilla, and V. Ausina. 1999. Eur. J. Clin.
Microbiol. Infect. Dis. 18:896–898.
2 Dominguez, J. A., N. Gali, P. Pedroso, A. Fargas, E. Padilla, J. M. Manterola, and L. Matas. 1998. J. Clin.
Microbiol.
56

57.  Test ilk 5 gün bazı hastalarda negatif olabilir
 6 - 14. günler arası pozitif kalabilir .*
* Bernander, S., B. Gastrin, S. Lofgren, and A. M. Olinder-Nielsen. 1994. Scand. J. Infect. Dis.
57

58.  Sonuç olarak,
 Toplum kaynaklı pnömonilerde legionella idrar
antijen testi;
 Mortaliteyi,
 Yoğun bakım ihtiyacını azaltmakta,
 Gereksiz ve uygunsuz antibiyotik kullanımına engel
olmaktadır.
58

59. Solunum enfeksiyonlarında seroloji
 Zor veya yavaş üreyen mikroorganizmalar için
yapılmakta
 Özellikle;
 Mycoplasma pneumoniae,
 Chlamydia pneumoniae,
 ve Legionella enfeksiyonları ve
 virüsler
59

60. Mevcut enfeksiyon için en güvenilir serolojik kanıt
 7 - 10 gün aralıkla
 veya Ig M antikor varlığında alınan iki serum
örneğinde ;
 Enfeksiyonun yayılması sırasında
 Ig G antikor titresindeki (veya Ig G + Ig M) dört katlık
bir artış olması
60

61.  Tek başına Ig G yüksekliğinin tanısal bir anlamı
yoktur.
M. pneumonia’ e karşı Ig M antikorlarının tanısal değere
ulaşması için
1 hafta veya bazen çok daha fazla süre gerekmekte
 Chlamydia ve Legionella türlerine karşı daha fazla
süre gerekmekte
61

62.  PCR ‘ın serolojiye üstünlüğü kanıtlanmış durumda *
 M. pneumoniae, C. pneumoniae, ve Legionella
türlerine karşı seroloji rutinden ziyade salgın
sırasında faydalı olabilir.
* Nilsson, A. C., P. Bjorkman, and K. Persson. 2008. BMC Microbiol. 8:93.
62

63. Soğuk aglütinasyon testi
 Soğuk aglütininlerin bulunduğu hastalıkların tanısında
kullanılır.
 Bu hastalarda çoğunlukla IgM yapısındaki antikorlar
eritrositlere bağlanarak kronik anemi ve lokal staza neden
olur.
 Atipik pnömoniler (mycoplasma pneumonia, influenza A,
influenza B, parainfluenza, adenovirüs vb. kaynaklı) ve
bazı hemolitik anemilerde aglütinasyon gözlenir.
 37°C inkübasyonda aglütinasyonda düzelme olmuyorsa
reaksiyon soğuk aglütinasyon değildir.
 Mycoplasma pneumonia enfeksiyonunda çocuklarda %50,
erişkinlerde %70 oranında aglütinasyon gözlenir.
63

64. GRACE ARAŞTIRMASI
 GRACE: Avrupa’da Toplum Kaynaklı ASYE (TK-ASYE)’
lerde Antibiyotiklere Dirence Karşı Savaşan Genomlar
 Hedefi 3000 ASYE ‘li hastanın araştırılması
 Eşleştirilmeli kontrollerle ASYE etkenlerinin, NAAT
ve geleneksel yöntemlerle saptanması
 En büyük TK-ASYE araştırması
 Bu yüzden, TK-ASYE’ lerin optimal mikrobiyolojik tanı
metoduna yardımcı olması beklenmekte
64

65. 65

66. Amaçları:
 Antibiyotik kullanımına neden olan TK-ASYE etken
araştırması
 TK-ASYE’ de atipik bakteri ve virüslerin rollerinin
araştırılması
 TK-ASYE’lilerde dirençli S. pneumoniae ve H. İnfluenzae
enfeksiyonu için risk faktörlerinin saptanması
 Antibiyotik kullanımıyla direnç seviyesi ilişkisinin
araştırılması
 Daha hızlı gen tabanlı tanı koydurucu testler geliştirme*
*https://www.grace-lrti.org/portal/en-gb/about/objectives/index
66

67. 67
TEŞEKKÜRLER