Avances en los Protocolos para Diagnóstico de la Leucodistrofia Metacromática Isidro Arévalo
1. PRIMER DÍA MUNDIAL
DE LAS LEUCODISTROFIAS
EN COLOMBIA
Centro de
Medicina
Genómica
de la FCV
Auditorio Ligia Aguirre de Sánchez
3° piso, Fundación Cardiovascular.
29 de septiembre de 2012, Bucaramanga , Colombia.
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2. Isidro Arévalo Vargas M. Sc
Departamento de Ciencias Biológicas
Centro de Investigaciones en Bioquímica
Universidad de los Andes
Bogotá, Colombia 2
3. Las enfermedades de depósito lisosomal (EDL) pertenecen a un grupo
de errores innatos del metabolismo que se caracterizan por el bloqueo en
una ruta metabólica de una o varias enzimas lisosomales.
(Hayashi, Nakamura et al. 2011).
Acumulación
No producción
Ausencia
Clasificación ruta
afectada:
Mucopolisacaridosis
Esfingolipidosis
Glucoproteinosis
Figura tomada el dia 16 de mayo de de gauchercare.com
(Martins 1999; Mehta, Beck et al. 2006)
(Figura modificada el día 14 de mayo de 2012 de Pollitt et.al., 1997)
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4. Modo de herencia:
Autosómico dominante • Distrofia muscular de Duchene
Autosómico recesivo • Gaucher
• Hunter (MPS II)/ Fabry
Ligado al cromosoma X.
Frecuencia
Muy baja
Alta incidencia entre 1:5000-7000 recién
Gaucher 1:57000
nacidos
Sialidosis 1:4.2 Mill.
(Marsden and Levy 2010). (Staretz, et al., 2009).
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5. Perdida de habilidades
adquiridas.
DETERIORO
SUSTANCIA
BLANCA. Devastación
neurologica.
Enfermedades geneticas
Degeneración Defecto: Sintesis
mielina vainas y mantenimiento
SNC. de mielina.
(Kohlschütter & Eichler, 2011)
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6. Progresivo deterioro
Dismielinización Desmielinización
(Anormalidades en la (Pérdida de mielina CLASIFICACIÓN BIOQUIMICA
formación y mantenimiento formada previamente
de mielina). normal tanto morfológica 1) Metabolismo lipídico.
como funcionalmente) 2) Proteínas
3) Ácidos orgánicos
4) Otras causas
Sustancia blanca del CNS.
(Tsuji, 2007; Kanekar and Gustas, 2011).
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7. METABOLISMO LIPIDICO DESORDEN PROTEÍNA DESORDENES ACIDOS OTRAS
MIELINA ORGANICOS LEUCODISTROFIAS
Adrenoleucodistrofia Pelizaeus-Merzbacher Canavan (AR). Alexander.
(Ligado-X). Def. Aspartoacilasa Def. Proteína gliofibrilar
Def. Proteolipido proteico. ácida (GFAP)
Krabbe Desvanecimiento de la
sustancia blanca.
Síndrome de Sjögren- Arteriopatía cerebral
Larsson (AR). autosómica dominante
Def. Lipoaldehído con infartos subcorticales
deshidrogenasa y leucoencefalopatía
Xantomatosis
cerebrotendinosa (AR).
Def. Esterol 27-hidroxilasa.
(Tsuji, 2007.)
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8. Alteración en la ruta de los esfingolípidos
en el metabolismo lisosomal.
(Kolter and Sandhoff , 2006)
Enzima Arilsulfatasa A (ASA)
(Natowicz, Prence et al. 1996;
Cesani, Capotondo et al. 2009)
Deficiencia
Cofactor Saposin B (SapB)
(Deconincka, Messaaoui et al. 2008).
(Figura tomada de Huwiler, Kolter et al. 2000)
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9. Enzima ASA / Cofactor SapB.
Catalizan cerebrósido 3-sulfato (Sulfatidio).
Componente principal en la formación de la mielina
4%. (Riñón, epitelio ducto biliar).
(Gieselmann, 2008)
Sulfatidios.
(Saravanan, Büssow et al. 2007).
Oligodendrocitos (SNC).
Desmielinización
Células de Schwan (SNP).
(Baumann, Turpin et al. 2002; Colsch, Afonso et al.
2008; Faust, Kaye et al. 2010)
Imagen tomada de internet el día 15 de mayo de 2012 de http://www.glycoforum.gr.jp/index.html
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10. La desmielinización generalizada es lo que conlleva a presentar un deterioro en la
función neurológica y por último la muerte.
(Tan, Fuller et al. 2010).
Tres etapas (infantil, juvenil y adulta)
Deterioro progresivo de •Hipotonía Deterioro rendimiento:
varias destrezas •Marcha inestable laboral o escolar.
adquiridas. •Retraso mental Trastornos emocionales,
comportamiento.
(Von Figura, Gieselmann et al. 2001)
(Wang, 2007) Síntomas psiquiátricos
Estado vegetativo en todas las fases de la
enfermedad (Kolter and Sandhoff 2006).
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11. • Valoración de sulfatidios en la orina.
Cromatografía (Rafi, Coppola et al. 2003)
capa fina (CCF)
• Colorimétrico. (Baum, Dodgson et al. 1959; Cordoba 1991)
Actividad de
ASA en
• Fluorométrico. (Shapira, Blitzer et al. 1989)
leucocitos.
• Mutaciones.
(Gieselmann, Polten et al. 1989; Qu, Miller
Biología
Molecular.
• Pseudodeficiencias (PD-ASA). et al. 1997; Pedron, Gaspar et al. 1999)
Deficiencia
• Fluorométrico.
Múltilple de (Artigalás, Roberto da Silva et al. 2009)
Sulfatasas
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12. Limitaciones en cuanto al acceso de los pacientes a los procesos de diagnóstico.
Estudios aislamientos leucocitarios.
Son muy difíciles de cumplir en algunas ciudades intermedias, lo que genera una
serie de inconvenientes que en un buen número de casos dejan las muestras
inservibles para procesos de análisis bioquímico.
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13. Estandarizar.
Protocolo fluorométrico mas sensible.
Establecer y comparar valores.
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14. Resolución No. 008430 de 1993 de
la República de Colombia.
Consentimiento informado.
85 muestras de sangre total de
pacientes control (1-68 años).
(2009-2012) 85 muestras de
individuos TND (0.15-47 años).
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15. Valoración
proteína. FL-
BCA
Prueba FL (Shapira et Análisis
al., 1989). estadístico.
4-metilumberilferona SPSS
Pacientes sulfato (4-MUS)
remitidos. Daño Muestra sangre
sustancia total.
blanca. Aislamiento
Neuroimágen. leucocitos Prueba COL (Baum, et al 1954 y
POSITIVO. (Shapira et al., Córdoba, 1995)
1989) p-nitrocatecol sulfato (p-NCS)
Extracción
sulfatidios –
Muestras
Cromatografía
de orina.
(Rafi, Coppola et Prueba β-GAL (Shapira et al.,
al., 2003). NEGATIVO. 1989.)
Otra enfermedad 4-metilumbeliferona-β-D-
neurodegenerativa. galactosidasa
Prueba FL
ASA B GSSPF
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16. 4 Pacientes detectados ASA.
4 Pacientes confirmados LM.
2 Pacientes confirmados GM1. 7.05 % alto riesgo.
CCF. Prueba sulfatidios diagnostico
diferencial de la LM.
Cofactor SapB.
PD-ASA.
Método de tamizaje.
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17. Es importante concluir que ante casos en los cuales se tengan la prueba FL
positiva de ASA y la presencia de sulfatidios es necesario que se haga al menos
una prueba de una sulfatasa diferente, con el fin de poder descartar una posible
DMS.
Método tamizaje GSSPF. Ventajas sobre los leucocitos con respecto al manejo,
transporte y mantenimiento de la muestra.
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PRIMER DÍA MUNDIAL DE LAS LEUCODISTROFIAS EN COLOMBIA. 29 de septiembre de 2012, Bucaramanga , Colombia.
18. Es importante que nosotros como laboratorio de referencia a nivel nacional e
internacional tengamos las técnicas apropiadas para la detección temprana y de
esta manera que el paciente y la familia tengan la oportunidad de recibir
tratamiento oportuno y mejorar su calidad de vida, que en últimas es nuestro
principal objetivo.
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19. Dedicación especial a todas las familias y
pacientes que fueron participes de este estudio.
Familia Zapata Moncada, Medellín.
Familia Henao García, Bogotá.
Centro de
Medicina
Genómica
de la FCV
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20. “No pretendamos que las cosas cambien, si siempre hacemos lo mismo.
La crisis es la mejor bendición que puede sucederle a personas y países, porque
la crisis trae progresos. La verdadera crisis es la crisis de la incompetencia.
El inconveniente de las personas y los países es la pereza para encontrar las
salidas y soluciones. Hablar de crisis es promoverla, y callar en la crisis es
exaltar el conformismo. En vez de esto, trabajemos duro. Acabemos de una vez
con la única crisis amenazadora, que es la tragedia de no querer luchar por
superarla”.
Albert Einstein
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