1. • Instituto Tecnológico de Ciudad Altamirano
• Alumno: Christian Emmanuel León Salgado
• 3er. Semestre de Lic. En Biología
• Asignatura: Biología celular
• Asesor: Erika Oropeza Bruno
2. En 1937 el bioquímico sueco Arne Tiselius dio a conocer un nuevo método
para separar las proteínas de una mezcla.
• La electroforesis es una técnica para la separación de moléculas según la
movilidad de estas en un campo eléctrico. la electroforesis se usa en una
gran mayoría en la materia del ADN recombinan-te ya que nos permite
saber la carga que poseen los polipéptidos, y separar los diferentes
polipéptidos resultantes de las variaciones del experimento del ADN
recombinante.
3. • Éste consistía en colocar un cierto volumen de una solución de dos o más
proteínas en un tubo de vidrio en forma de “U”, sin llenarlo completamente.
Después el espacio restante en cada extremo se ocupaba con el volumen
necesario de una solución de electrolitos libre de proteína, que actuaba
como amortiguador. Luego se sumergía un electrodo en la solución
amortiguadora libre de proteína de cada extremo, se conectaban los
electrodos a una fuente de electricidad y se sometía todo el sistema a un
campo eléctrico..
4. • Alta sensibilidad, resolución y versatilidad.
• Método de separación de
– Ácidos nucleicos
– Proteínas
– Otras biomoléculas
• Entrega criterio de pureza.
• Separa mezclas complejas
• Permite determinar
– El peso molecular de una proteína
– Punto isoeléctrico.
– Número de cadenas polipeptídicas de una proteína
5. • La variante de uso más común para el análisis de mezclas de
proteínas o de ácidos nucleicos utiliza como soporte un gel,
habitualmente de agarosa o de poliacrilamida. Los ácidos nucleicos
ya disponen de una carga eléctrica negativa, que los dirigirá al polo
positivo, mientras que las proteínas se cargan al unirse con
sustancias como el SDS (dodecilsulfato sódico) (C12H25NaO4S)
que incorpora cargas negativas de una manera dependiente de la
masa molecular de la proteína.
7. • En esta, el campo eléctrico se aplica a disoluciones o
suspensiones. Históricamente, es el origen de la
electroforesis tal y como hoy se conoce y fue
desarrollada por Arne Tiselius en 1937. Actualmente está
en desuso, ya que al ser un fluido el medio en el que se
desarrolla, tiene poco poder de resolución.
8. • Es un método para fraccionar mezclas proteicas, tal como lo es el suero
sanguíneo, como las moléculas tienen distinta movilidad cuando son
sometidas a la acción de un campo eléctrico, separándose en fracciones. El
buffer o tampón que se use para la corrida es fundamental, porque de él va
a depender la carga neta de las moléculas, de su pH. Otros factores
importantes son el tamaño de la molécula, la intensidad de corriente
utilizada y la temperatura.
9. • La electroforesis en gel es un grupo de técnicas empleadas por los
científicos para separar moléculas basándose en propiedades como el
tamaño, la forma o el punto isoeléctrico. La electroforesis en gel se utiliza
generalmente con propósitos analíticos, pero puede ser una técnica
preparativa para purificar moléculas parcialmente antes de aplicar
espectrometría de masas, PCR ( Reacción en cadena de la Polimerasa),
clonación o secuenciación de ADN.
10. • Para separar distintas especies moleculares, se crea un campo eléctrico
para la molécula colocada en un líquido portador. Al generar este campo
existirá una intensidad pasando constantemente del polo positivo al polo
negativo, por lo tanto, actuará una fuerza sobre la molécula y esta
experimentará una aceleración hasta obtener una velocidad en la que la
resistencia, por viscosidad del medio, neutraliza la fuerza impulsora, es
decir, la molécula se desplaza con una velocidad constante.