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AUTODUPLICACION DEL
         ADN (1)


http://www.johnkyrk.com/index.esp.html
http://www.ucm.es/info/genetica/grupod/Replicacion/Replicacion.htm#Okazaki
La herencia. Genética molecular


• La replicación del ADN.
Observaciones


• Comentar que de todos los modelos propuestos para explicar la
  replicación   del     ADN     (dispersivo,   conservativo    y
  semiconservativo), el experimento de Meselson y Stahl demostró
  que el ADN se replica según el modelo semiconservativo.


•    Explicar de forma muy simplificada el mecanismo general de la
    replicación. Mencionar brevemente las encimas implicadas: ADN
    polimerasas (no es necesario que se aprendan los distintos tipos
    de ADN polimerasas), helicasas, topoisomerasas, ligasas.
    Referirse brevemente a los fragmentos de Okazaki.
Semiconservativo   Conservativo   Dispersivo
Modelo Conservativo

• Proponía que el ADN de doble hélice, servía de
  molde para una nueva y completa molécula de
  DNA.
Modelo Dispersivo
• Los segmentos de cada una de las hebras se
  conservan produciendo moléculas de doble
  hebra con fragmentos viejos (del molde) y
  fragmentos nuevos.
Modelo Semiconservativo
• Cada una de las hebras sirve de molde para la
  nueva molécula, resultando dos moléculas
  idénticas entre sí mismas e idénticas a la
  molécula parental.
Teoría semiconservativa




http://www.mhhe.com/sem/Spanish_Animations/sp_meselson_stahl.swf
Muchos orígenes de replicación en Drosophylla melanogaster
Esquema con múltiples orígenes de replicación
Hebra                                       Hebra
 hija                                        molde




                Extremo 3’



pirofosfato


Enlace de un nuevo desoxiribonucleósido
trifosfato




                                          Extremo 5’
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EL ADN es la molécula que permite perpetuar la vida:
               EL ADN es la molécula que permite perpetuar la vida:
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                             REPLICACIÓN DEL ADN
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           Hebra molde




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 Hebra líder




Hebra retardada
 Hebra retardada
Proteínas principales en la replicación
               del ADN
•   Topoisomerasas
•   Helicasas
•   Girasas
•   SSB (single strand DNA-binding protein)
•   Primasas
•   ADN polimerasas
•   Ligasas
Desenrollamiento y apertura de la doble hélice de ADN


                 Ori C                                  Evitan las tensiones debidas a un superenrrollamiento
                                                                              Girasa
                                                            Topoisomerasa
                         Proteínas
                         específicas




                                                                                     Proteínas SSB

                                                                                          Impiden que el ADN
                                                                                           se vuelva a enrollar



                                              Helicasa
Las proteínas
específicas se
unen al punto                           La helicasa rompe los
 de iniciación                                                                               Burbuja
                                        enlaces de hidrógeno
                                                                                                de
                                       entre las bases y abre la
                                                                                           replicación
                                              doble hélice
Topoisomerasas




           Superenrrolamiento en ADN doble hélice circular
http://www2.uah.es/biomolq/BM/Esquemas/Animaciones/supernrollamto%20y%20topoisomerasas%20lhngr.mov
http://www2.uah.es/biomolq/BM/Esquemas/Tema2.htm
La ADN polimerasa sintetiza una cadena en el sentido 5’→ 3’
     uniendo cada nuevo nucleótido en el extremo 3’.




                                                                     3’

                                                                     5’
               5’                                               Una de las hebras se
                                                                sintetiza de modo contínuo.
                                  3’                            Es la conductora o lider.
                                  5’
               3’                      3’
                                                        3’
                                            5’                        3’
La ADN polimerasa necesita un
fragmento de ARN (cebador o
primer) con el extremo 3’ libre                                      5’
para iniciar la síntesis.

                                                 La otra hebra se sintetiza de modo
                                                 discontinuo formándose fragmentos que
                                                 se unirán más tarde. Es la retardada.
Reiji Okazaki / Tsuneko Okazaki(1968)

• Descubrieron unos polinucleótidos de entre
  1000 y 2000 nucleótidos en células procariotas y
  en eucariotas son entre 100 y 200 nucleótidos.
Replicación de DNA
Reiji Okazaki (1968)




              Figura: representación de la duplicación



http://laguna.fmedic.unam.mx/~evazquez/0403/duplicacion%20dna3.html
Horquilla de replicación ADN

http://www.mhhe.com/sem/Spanish_Animations/sp_dna_replication.swf
http://www.mhhe.com/sem/Spanish_Animations/sp_dna_replication_fork.swf




http://biomodel.uah.es/biomodel-misc/anim/replic/replic7.html
Replicación
• Las ADN polimerasas requieren como sustrato
  el extremo 3’ hidroxilo libre de una base
  apareada para catalizar la unión de otro
  nucleótido.

• Se requiere de primers o iniciadores que en la
  mayoría de los casos son de ARN, y son
  sintetizados por primasas.
Esquema Círculo rodante
Esquema Método Theta




http://www.mhhe.com/sem/Spanish_Animations/sp_bidirectionl_replicatn.swf
Autorradiografía de la 2ª generación de Replicación.
Replicación       círculo rodante
                (plásmidos en Gram +,
                algunos virus y conjugación)

orígen de replicación bidireccional
(cromosoma y plásmidos en Gram -)




  Figure 6.16
ADN reparadora
•   En procariotas la enzima ADN polimerasa incorpora 1000 bases/minuto
    (se autoduplica entre 20 y 40 minutos).

•   La enzima ADN polimerasa, en eucariotas, incorpora 50 bases/minuto, por
    eso necesita muchos puntos de iniciación.

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Autoduplicación del adn 2012

  • 1. AUTODUPLICACION DEL ADN (1) http://www.johnkyrk.com/index.esp.html http://www.ucm.es/info/genetica/grupod/Replicacion/Replicacion.htm#Okazaki
  • 2. La herencia. Genética molecular • La replicación del ADN.
  • 3. Observaciones • Comentar que de todos los modelos propuestos para explicar la replicación del ADN (dispersivo, conservativo y semiconservativo), el experimento de Meselson y Stahl demostró que el ADN se replica según el modelo semiconservativo. • Explicar de forma muy simplificada el mecanismo general de la replicación. Mencionar brevemente las encimas implicadas: ADN polimerasas (no es necesario que se aprendan los distintos tipos de ADN polimerasas), helicasas, topoisomerasas, ligasas. Referirse brevemente a los fragmentos de Okazaki.
  • 4. Semiconservativo Conservativo Dispersivo
  • 5. Modelo Conservativo • Proponía que el ADN de doble hélice, servía de molde para una nueva y completa molécula de DNA.
  • 6. Modelo Dispersivo • Los segmentos de cada una de las hebras se conservan produciendo moléculas de doble hebra con fragmentos viejos (del molde) y fragmentos nuevos.
  • 7. Modelo Semiconservativo • Cada una de las hebras sirve de molde para la nueva molécula, resultando dos moléculas idénticas entre sí mismas e idénticas a la molécula parental.
  • 8.
  • 9.
  • 11. Muchos orígenes de replicación en Drosophylla melanogaster
  • 12. Esquema con múltiples orígenes de replicación
  • 13. Hebra Hebra hija molde Extremo 3’ pirofosfato Enlace de un nuevo desoxiribonucleósido trifosfato Extremo 5’
  • 15. EL ADN es la molécula que permite perpetuar la vida: EL ADN es la molécula que permite perpetuar la vida: REPLICACIÓN DEL ADN REPLICACIÓN DEL ADN Hebra molde Hebra molde Hebra líder Hebra líder Hebra retardada Hebra retardada
  • 16. Proteínas principales en la replicación del ADN • Topoisomerasas • Helicasas • Girasas • SSB (single strand DNA-binding protein) • Primasas • ADN polimerasas • Ligasas
  • 17. Desenrollamiento y apertura de la doble hélice de ADN Ori C Evitan las tensiones debidas a un superenrrollamiento Girasa Topoisomerasa Proteínas específicas Proteínas SSB Impiden que el ADN se vuelva a enrollar Helicasa Las proteínas específicas se unen al punto La helicasa rompe los de iniciación Burbuja enlaces de hidrógeno de entre las bases y abre la replicación doble hélice
  • 18. Topoisomerasas Superenrrolamiento en ADN doble hélice circular
  • 20. La ADN polimerasa sintetiza una cadena en el sentido 5’→ 3’ uniendo cada nuevo nucleótido en el extremo 3’. 3’ 5’ 5’ Una de las hebras se sintetiza de modo contínuo. 3’ Es la conductora o lider. 5’ 3’ 3’ 3’ 5’ 3’ La ADN polimerasa necesita un fragmento de ARN (cebador o primer) con el extremo 3’ libre 5’ para iniciar la síntesis. La otra hebra se sintetiza de modo discontinuo formándose fragmentos que se unirán más tarde. Es la retardada.
  • 21. Reiji Okazaki / Tsuneko Okazaki(1968) • Descubrieron unos polinucleótidos de entre 1000 y 2000 nucleótidos en células procariotas y en eucariotas son entre 100 y 200 nucleótidos.
  • 23.
  • 24.
  • 25. Reiji Okazaki (1968) Figura: representación de la duplicación http://laguna.fmedic.unam.mx/~evazquez/0403/duplicacion%20dna3.html
  • 26. Horquilla de replicación ADN http://www.mhhe.com/sem/Spanish_Animations/sp_dna_replication.swf http://www.mhhe.com/sem/Spanish_Animations/sp_dna_replication_fork.swf http://biomodel.uah.es/biomodel-misc/anim/replic/replic7.html
  • 27. Replicación • Las ADN polimerasas requieren como sustrato el extremo 3’ hidroxilo libre de una base apareada para catalizar la unión de otro nucleótido. • Se requiere de primers o iniciadores que en la mayoría de los casos son de ARN, y son sintetizados por primasas.
  • 28.
  • 31. Autorradiografía de la 2ª generación de Replicación.
  • 32. Replicación círculo rodante (plásmidos en Gram +, algunos virus y conjugación) orígen de replicación bidireccional (cromosoma y plásmidos en Gram -) Figure 6.16
  • 34. En procariotas la enzima ADN polimerasa incorpora 1000 bases/minuto (se autoduplica entre 20 y 40 minutos). • La enzima ADN polimerasa, en eucariotas, incorpora 50 bases/minuto, por eso necesita muchos puntos de iniciación.