Este estudio evalúa un modelo de regeneración tisular in vitro utilizando células madre dentales humanas (DPSCs) en matrices biológicas y sintéticas. Las DPSCs se cultivan en matrices y se evalúa su adhesión, proliferación y diferenciación a través de análisis histológicos, de cultivo celular y expresión génica. El objetivo es establecer las condiciones para la regeneración de tejido dental funcional in vitro que pueda utilizarse en el futuro para terapias de regeneración en pacientes.
IMPLEMENTACION IN VITRO DE UN MODELO DE REGENERACIÓN TISULAR BASADO EN CÉLULAS STEM DENTALES HUMANAS
1. IMPLEMENTACION IN VITRO DE UN MODELO DE REGENERACIÓN TISULAR
BASADO EN CÉLULAS STEM DENTALES HUMANAS
D. GUTIERREZ-RIVEROS, R. GARZON-ALARCON, P. AMAYA, K. CORDOBA-PEREZ, J. GUTIERREZ-QUINTERO, S. ROMERO,
N. GUTIERREZ-COLLAZOS J.C MUNEVAR-NINO.
Unidad de Investigación Básica Oral U.I.B.O. Facultad Odontología. Universidad El Bosque. Bogotá. Colombia
danyguti90@gmail.com, rgarzonal@gmail.com, stephiromero@hotmail.com, kathecordoba99@hotmail.com, nicolegutierrez@hotmail.com,
juan.gutierrex.quintero@gmail.com, munevarjuan@unbosque.edu.co
REGENERACIÓN TISULAR
IN VITRO IN VIVO
HOMING CULTIVO ORGANOTIPICO ANIMALES DE
CULTIVO CELULAR ENSAYOS CLINICOS
EXPERIMENTACIÓN
Implantación in vivo de scaf- Unidad formadora de Injerto de células stem in vivo en una matriz
Germen dental in vitro
fold de molar mandibular hu- colonias DPSCs in vi- Experimento de los herma- mineral en la mandibula.Jose J. Mendonca y
a los 5 días de cultivo
mano en el dorso de una rata.
organotípico. Ikeda. E
tro. Munevar y nos Vacanti en rato- col/ 2010 Plastic and reconstructive surgery
Mao y col/2010 J Dent Res col/2009. IADR nes/1995.
y col/2009. PNAS.
INTRODUCCION DISEÑO EXPERIMENTAL CÉLULAS STEM
En tiempos recientes se ha podido identificar Este es un estudio experimental in vitro .
células stem en el cuerpo que han sido blan-
Muestra DPSCs criopreservadas
co de estudio e investigación, dentro de este
grupo se encuentran las células stem de pul- Evaluación in vitro
pa dental (DPSC), un grupo de células multi-
potenciales que pueden dar origen a tejido Protocolo de descongelamiento.
Diferenciación Adhesión Cabina de flujo laminar.
dental, periodontal y óseo; las cuales pueden
unirse y formar un tejido funcional.
Proliferación
Para que haya diferenciación de DPSC in vitro
Obtención de suspensión celular.
deben ser introducidas en matrices especiali-
(Materiales/reactivos/equipos)
zadas o scaffolds, que permiten la adhesión
celular, migración y localización, en el institu- · Histológico
to UIBO se espera crear las condiciones · Cultivo celular Scaffold Tiempo
exactas para que exista una relación adecua- · Citometría de flujo
da entre las matrices y las células stem, y ha- · Histomorfometría
cer que estas proliferen formando a su vez · Inmunohistoquímico Slice tooth 24 hrs 1 mes
un órgano dental funcional in vitro para en · PCR (biología molecular) (Nör JE)
1 semana
un futuro utilizarlas en pacientes.
OBJETIVO GENERAL Análisis estadístico Medios de cultivo
Implementación de un modelo de regenera- NH Expansion
ción tisular in vitro con células stem dentales Medium
Descriptivo Analítico (U
humanas en matrices biológicas y sintéticas. (ANOVA) Man Whitney)
OBJETIVOS ESPECÍFICOS
1-Evaluar histológicamente la colonización de
las matrices por parte de las células stem
dentales.
2-Analizar la cinética de proliferación celular
al interior de las matrices biológicas y sintéti-
cas.
3-Determinar el fenotipo de las células stem
al interior de las matrices biológicas y sintéti-
cas.
Etapas del modelo de rege-
neración tisular in vivo pu-
blicada por V.T Sakai y col.
Modelo in vitro de injuria quirúrgica
En el 2011 publicado en Ad- (Incisión con hoja de bisturí en la
vances in Dental Research. matriz)
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