Dokumen ini membahas berbagai metode pengecatan bakteri untuk melihat struktur dan sifatnya, seperti preparat basah dan kering, pengecatan tunggal dan bertingkat, Gram dan non-Gram, serta pengecatan spor, kapsul, dan flagela. Metode-metode ini berguna untuk membedakan karakteristik berbagai jenis bakteri.

1. PENGECATAN BAKTERI

2. Ada 2 macam cara untuk
melihat sel Bakteri
1. Pembentukan Preparat Basah
Keuntungan : Bakteri masih hidup
sehingga dapat dilihat
gerakannya
Kerugian : sulit mengetahui
bentuk yang pasti
2. Pembentukan preparat yang
berwarna
Keuntungan : Dapat melihat
bentuk yang pasti dan teratur
didalamnya
Kerugian : Bakteri mati

3. MACAM MACAM
PENGECATAN
PENGECATAN
P. POSITIF
P SEDERHANA
( TUNGGAL )
P.BERTNGKAT
P.NEGATIF

4. PENGECATAN
BERTINGKAT A. DIFFERE
NSIAL
- P GRAM
- - P
TAHAN
ASAM
B.
STRUKTUR
KHUSUS
-P SPORA
-- KAPSUL
-- FLAGEL
-- GRANULA

5. P SEDERHANA
BAKTERI AKAN
BERWARNA SESUAI
DENGAN WARNA CAT
CAT YANG BIASA
DIGUNAKAN :
- METILEN BLUE
- SAFRANIN
KRISTAL VIOLET
HANYA MENGGUNAKAN 1
MACAM CAT
DIGUNAKAN UNTUK
MELIHAT BENTUK DAN
SUSUNAN SEL

6. PENGECATAN
BERTINGKAT
DAPAT
DIGUNAKAN
UNTUK
MEMBEDAKAN
SIFAT
KELOMPOK
BAKTERI
UMUMNYA
DIPAKAI
- P GRAM
- P TAHAN
ASAM
MENGGUNAKAN
LEBIH DARI 1
MACAM CAT
PENGECATAN
DIFFERENSIAL

7. PENGECATAN NEGATIF
FAKTOR FKTOR YANG MEMPENGARUHI :
1. Gelas Benda
- Harus betul betul bersih dan kering
- Jika Terdapat lemak/ debu / air -----
penyebaran bakteri tidak merata
2. Jumlah cat ( Nigrosin)
- Terlalu banyak : Bakteri tdk terlihat jelas
- Terlalu sedikit : Latar Belakang terlalu
terang
3. Jumlah Bakteri
- Terlalu banyak akan terlihat bertumpuk
tumpuk sehingga bentuknya tidak terlihat
- Terlalu sedikit : sulit menemukan
4. Cara Meratakan :
Suspensi/campuran bakteri harus diseret
diatas gelas benda

8. PENGECATAN GRAM
• GRAM A
• CAT UTAMA
• BERISI CAT KRISTAL VIOLET (UNGU)
• GRAM B
• LARUTAN MORDAN
• ISI : LAR LUGOL
• FUNGSI : MENGINTENSIFKAN CAT
UTAMA
• GRAM C
• LAR PENCUCI
• ISI : ALKOHOL DAN ACETON
• FUNGSI : MELUNTURKAN CAT UTAM
• GRAM D
• CAT LAWAN
• ISI : CAT SAFRANIN

9. HASIL
PENGECATA
N GRAM
GRAM ( + ) =
WARNA UNGU
KEBIRUAN
GRAM (-) =
WARNA MERAH
BAKTERI
GRAM
POSITIF
BAKTERI
GRAM
NEGATIF
1. Staphylococc
us aureus
2. Bacillus
subtilis
3. Streptococcus
pyogenes
1. Escherichia
coli
2. Salmonella
typosa
3. 3. Neisseria
Gonorhoeae

10. FAKTOR FAKTOR YANG
MEMPENGARUHI P GRAM
1. FIKSASI
Terlalu lama : dinding sel pecah ,
Gram + seperti Gram –
2. KERAPATAN SEL PADA SMEAR
Terlalu tebal : Gram - seperti Gram
+ Sebab belum semua sel luntur
jika dimasukkan Gram C
3. WAKTU PENGECATAN SALAH
Gram C terlalu lama : Gram +
seperti –
terlalu singkat : Gram –
seperti +

11. 4. KONSENTRASI REAGEN
Gram A terlalu encer : Gram ( + ) seperti
gram (-)
5. KONSENTRASI LARUTAN PELUNTUR
Alkohol ------ lambater
Aceton -------cepat
6. UMUR BAKTERI
Terlalu tua ----- Autolisis (sel pecah
pecah) , Gram + seperti Gram –
7. MEDIUM
pH turun (Asam) : Gram (+) seperti
(Gram (-)
pH naik ( Basa) : Gram (-) seperti Gram
(+)
8. NUTRISI
Kurang Nutrien : Gram (+) seperti
(Gram (-)
Bakteri paling suka dengan Glukosa

12. BAKTERI TAHAN ASAM
Bakteri Tahan Asam : merrah
Mycobacterium tubercolusis
Bakteri Tidak tahan Asam :
Biru
Macam macam spesies

13. PENGECATAN SPORA
-Ada beberapa bakteri yang
membentuk spora, spora bakteri
disebut Endospora
-- Fungsi : Mempertahankan
kehidupan / pertumbuhan sel
vegetatifnya terhadap keadaan
yang kurang menguntungkan
-Contoh : kekurangan makanan
-- lingkungan :
- - panas
-- kering
-Dingin
-- radiasi zat zat kimia
--

14. LETAK LETAK SPORA
A. SENTRAL
Ditengah tengah sel
B. TERMINAL
Diujung Sel
C. SUBTERMINAL
Diantara tengah tengah dan
ujung

15. CONTOH BAKTERI
PEMBENTUK SPORA
1. Bacillus Subtillis
2. Clostridium tetani
3. Clostridium perfringens
4. 4. Clostridium Batulinum

16. HASIL PENGAMATAN
METODE KLIEN
Badan vegetative : warna biru
Spora : warna merah
muda
Sel vegetative : bentuk
batang
METODE WIRTZ
Badan vegetative : warna
merah muda
Spora : warna hijau
Sel vegetative : bentuk
batang

17. METODE BARTOLOMEW-MITTWER
Spora : warna hijau
Sel bakteri : warna merah
latar belakang : merah muda

18. PENGECATAN KAPSUL
-Beberapa bakteri dapat
menghasilkan bahan bahan
berlendir sisekeliling permukaan
selnya
-- Jika dikeluarkan secara tidak
teratur ----lapisan lendir
-- Jika dikeluarkan secara teratur
--- Kapsul
-- Sifat Bakteri yang berkapsul =
Koloni berlendir / licin

19. -Fungsi Kapsul ----- tidak ada
yang esensial bagi kehidupan sel
-Diduga :
-Makanan cadangan
-Mencegah kekeringan
-Melindungi sel terhadap
fogositas

20. MACAM MACAM
PENGECATAN KAPSUL
Diperlukan pengecatan khusus
karena
1. Sulit dilihat dibawah
mikroskop
2. Jika diwarnai sulit tercat ----
afinitas terhadap cat kecil
sehingga pada waktu dicuci --
- luntur / hilang
3. Jika difiksasi --- rusak

21. METODE PENGECATAN
1. BURI
Dasarnya pengecata negatif
Cat : Biru metilen , Nigrosin
Hasil : sel : Biru , Kapsul :
Transparan
Latar belakang hitam
2. HIZS
Cat : Basich fuchsin
Pencuci : CuSO4.5 .H2O 20 %
Hasil : Sel – merah ungu
Kapsul Biru muda

22. 3. WELCH
Cat : Karbl Fuchsin
Pencuci : NaCl 0,85 % (Garam
Fisiologis)
Hasil : Sel : merah ungu Kapsul
merah muda
4. ANTHONY
Cat : KRISTAL VIOLET
Pencuci : CuSO4
Hasil : Sel : ungu Kapsul biru
muda

23. Contoh contoh Bakteri
Berkapsul
-Klebsiella
-Diplococcus pneumoniae
-Streptococcus

24. Bacillus subtilis
(sederhana)

25. Bacillus subtilis (gram +)

26. Staphylococcus aureus (sederhana)

27. Staphylococcus aureus (gram +)

28. Pseudomonasputida (sederhana)

29. Pseudomonasputida (gram -)

30. Bacillus subtilis (spora)
Bacillus subtilis (spora)

31. Pengecatan kapsul