3. FISIOLOGÍA DEL EMBARAZO, anatomia de organos reproductores y mecanismos.
PRACTICA N1 FORENSE: Determinación de la presencia de enterobacterias (Shiguella y/o Salmonella) en muestra de leche de tigreptx
1. Determinación de la presencia de
enterobacterias (Shiguella y/o
Salmonella) en muestra de leche
de tigre
Biología Forense
PRESENTADO POR:
Medina Humpiri Eduardo Jeanpiero
2. Objetivo
Determinar la presencia de
enterobacterias (Shigella y/o
Salmonella) . En muestra de leche de
tigre con caldo de tetrationato y agar
XLD.
3. Introducción
Control de calidad de
alimentos:
Es una serie de
parámetros físicos,
químicos, microbiológicos,
nutricionales y
sensoriales.
Normas legales sanitarias :
- RECOMENDACIONES Y
OBLIGACIONES
4. Materiales
Caldo de enriquecimiento
• 4.14g tetrationato
• 90 ml de agua destilada
• 1 Matraz de 300 ml
• 1 probeta de 10 ml
• 1 pipeta de 10 ml
• 1 termometro
• 1 plancha de calentamiento
• 10 ml de “leche de tigre”
5. Materiales
Agar X.L.D. (xilosa, lisina, desoxicolato)
• Agar X.L.D.
• 60 ml de agua destilada
• 1 Matraz de 250 ml
• 1 probeta de 10 ml
• 1 termometro
• 1 plancha de calentamiento
6.
7. Para la preparación del Agar XLD se necesitaron
hacer cálculos para 3 placas Petri, la cantidad
necesaria de agar fue de 3.40 gr. Y 60ml de agua
oxigenada; a continuación, se debe mezclar
correctamente para su ebullición. La ebullición
debe rondar los 45 a 50 °C para luego transportar
el agar a temperatura ambiente en las 3 placas
Petri. Previamente auto clavado nuestras placas.
Preparacion para agar X.L.D.
8. Para la preparación del caldo de enriquecimiento de
tetrationato se calculo la medida de 4.14 gms de fluid
tetrationato en 10ml de agua destilada y calentar
hasta que llegue a hervir. Posteriormente se deja
enfriar hasta los 45°C y esta lista para depositar la
muestra a enriquecer.
Preparacion para caldo de
enriquecimiento
9. Analisis de la muestra
• Enriquecimiento: Se añadió 10ml de la muestra a cultivar en 90ml de
caldo tetrationato (previamente puesto a temperaturas de
aproximadamente 100°C y reposado hasta los 45° C – 50°C) y se incubo a
34.5 °C durante 24 a 72 horas.
• Siembra en placa: A partir del material enriquecido se procedió a
realizar siembra en placa por expansión, en agar X. L. D. Las siembras
fueron incubadas a 35°C durante 72 horas.
• Identificación: Para la identificación de este se observó y a la vez se
realizó un análisis técnico de la coloración y presencia de colonias,
para determinar el género de dicha enterobacteria
10. • De la práctica realizada, no
se detectó Salmonella spp. ni
Shigella spp. en dos de las
tres placas realizadas con la
misma muestra de ceviche.
RESULTADOS
11. RESULTADOS
• Una de las placas
presenta una colonia de
bacteria aparentemente
por contaminación.
NOTA: Hubo un cambio de color en
el agar, de rojo a amarillo, por lo
que se sospecha que por la
fermentación del azúcar xilosa
presente en el agar XLD, disminuye
el pH y el indicador rojo de fenol lo
registra cambiando a amarillo.
12. En el presente trabajo no se logró aislar Salmonella spp.
en dos de las tres placas realizadas, datos similares a los
reportados en el trabajo de Blanco y colaboradores,
quienes únicamente lograron aislar una cepa a partir de
una muestra de cebiche
DISCUSIONES
La falta de toma del pH y la T° de la muestra al momento de ser
enriquecida con el Caldo Tetrationato, ya que en el trabajo de
Koneman y colaboradores en el 2006, afirma que la
temperatura de desarrollo para Salmonella spp. es de 5 a 47°C
(óptimo 35-37°C) y se desarrollan a pH entre 4-9 (óptimo 6.57.5)
