SẢN PHỤ KHOA

1. SỞ Y TẾ TP.HỒ CHÍ MINH
BỆNH VIỆN HÙNG VƯƠNG
_____________________________________
CỘNG HÒA XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM
Độc lập - Tự do - Hạnh phúc
_______________________________________________________________
HƯỚNG DẪN
Quy trình đông phôi và rã đông phôi
(Ban hành kèm theo Quyết định số /QĐ-BVHV ngày 23/5/2014
của giám đốc bệnh viện Hùng Vương)
____________________________
1. ĐÔNG PHÔI
1.1 Chuẩn bị môi trường và dụng cụ
- Môi trường đông phôi được chuẩn bị trong hộp Nunc: giếng 1 chứa 0.25 ml
ES và giếng 2 chứa 0.5 ml VS
- Để môi trường ở nhiệt độ phòng (25o
C) ít nhất 30 phút trước khi sử dụng.
- Ghi thông tin bệnh nhân vào Form đông phôi, cryotop trữ phôi, cassette chứa
cryotop, Nhân viên chéo phải kiểm tra và xác nhận thông tin trên Form đông
phôi giống với thông tin trên cryotop cũng như trên cassette.
- Kéo pipette pasteur có đường kính phù hợp với phôi (kích thước từ
160-220 µm).
1.2 Thực hiện
1.2.1 Cân bằng thẩm thấu
- Load phôi (tối đa 4 phôi) từ đĩa cấy G1 vào ô có chứa môi trường ES. Nhân
viên chéo phải kiểm tra đúng tên của bệnh nhân và đúng thứ tự phôi trữ đông
trên đĩa phôi so với thông tin trên Form đông phôi.
- Thời gian để phôi tiếp xúc với ES khoảng 12 phút.
1.2.2 Thủy tinh hóa
- Chuyển phôi qua môi trường chứa VS và rửa nhiều lần.
- Phôi sẽ được đặt trên phần đầu Cryotop chứa phôi cùng với một lượng rất ít
môi trường VS.
- Sau đó, nhúng Cryotop trực tiếp vào nitơ lỏng.
- Toàn bộ quá trình này diễn ra trong vòng 60-90 giây.
1.2.3 Lưu trữ
- Cho cassette chứa cryotop vào bình chứa nitơ lỏng.
- Nhân viên chéo phải xác nhận vị trí chứa cassette và ghi nhận trên Form đông
phôi.
2. RÃ PHÔI
2.1 Chuẩn bị môi trường và dụng cụ
- Môi trường rã phôi được chuẩn bị trong hộp Nunc:
+ Hộp Nunc 1: cho 0.5 ml môi trường TS vào giếng 1. Để vào tủ ấm 37o
C
1
BỆNH VIỆN HÙNG VƯƠNG

2. + Hộp Nunc 2: cho 0.5 ml môi trường DS vào giếng 1, cho 0.5 ml môi trường
WS vào giếng 2 và 4. Để ở nhiệt độ phòng (25o
C).
- Chuẩn bị môi trường ít nhất 30 phút trước khi sử dụng.
- Kéo pipette pasteur có đường kính phù hợp với phôi (kích thước từ
160-220 µm).
2.2 Thực hiện
- Lấy cassette chứa phôi cần rã từ bình chứa nitơ lỏng. Nhân viên chéo phải
kiểm tra và xác nhận đúng thông tin bệnh nhân trên cassette chứa cũng như
trên cryotop trữ phôi so với thông tin trên Form đông phôi.
- Nhúng thật nhanh cryotop vào giếng 1 chứa môi trường TS (tối đa 1 phút)
- Sử dụng pipette pasteur để chuyển phôi qua môi trường DS. Phôi ở trong môi
trường DS tối đa 3 phút.
- Sau đó, phôi được chuyển vào môi trường WS, để phôi ổn định trong vòng 5
phút.
- Tiếp đến, phôi sẽ được chuyển đến môi trường WS rửa lần 2 ở giếng số 4 (rửa
nhiều lần) trong 1 phút.
- Cuối cùng, phôi sẽ đựơc chuyển vào môi trường nuôi cấy và cất vào trong tủ
cấy 37oC, 6% CO2.
GIÁM ĐỐC
Nguyễn Văn Trương
2
BỆNH VIỆN HÙNG VƯƠNG